2012년 8월 22일
토양 - 전송 helminths (STHs)과 만성 감염 stunting, 그리고 성장 자녀의 낭비, 흡수 장애를 일으 킵니다. 따라서, 이러한 감염은 또한 아이들의 체력을 줄일 것을 그럴듯합니다. 여기, 우리는 STHs과 어린이의 물리적 피트니스을 평가하기위한 20 미터 셔틀이 운영하는 시험의 진단을위한 두 기술을 표시합니다.
다음 방법론들의 목적은 토양 매개로 전파된 헬민스 감염 상태를 평가하고, 이러한 감염이 학령기 아동의 신체적 건강 상태에 영향을 미치는지 여부를 확인하는 시도를 촉진하고 표준화하는 것입니다. 이는 Cato Katz 기법을 사용하여 일반적인 토양 매개 헬민스, 즉 Ascaris Lumoid TUS Tria와 구충 및 CLIs stoma Duo Denali, NTO ERUs의 감염을 진단함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로, Strully Stir Corrales 진단에 가장 널리 사용되는 방법인 Erman 기법을 수행합니다.
다음으로, 아동의 체력을 평가하기 위해 20미터 셔틀런 테스트를 실시합니다. 앞서 언급한 방법론을 바탕으로 헬민스(Helmut) 감염 아동과 비감염 아동 간의 체력 수준 차이를 보여주는 결과가 도출됩니다. 이러한 방법들을 조합하면 토양 매개 헬민스 감염이 감염자의 체력에 영향을 미치는지, 그리고 이러한 감염의 실제 부담은 어느 정도인지와 같은 핵심 질문에 대한 답을 얻는 데 도움이 될 수 있습니다.
Cato-Catz 기법은 감염된 피검자가 배설하는 분변 속의 기생충 알 검출을 용이하게 하기 위해 사용됩니다. 먼저 표준 Cato-CATT 템플릿을 현미경 슬라이드 중앙에 배치하십시오. 장갑을 착용한 상태에서, 템플릿 중앙의 구멍에 41.7 milligrams의 분변을 넣습니다.
신선한 분변 샘플 2~3g을 신문지나 알루미늄 호일 위에 덜어냅니다. 그런 다음, 샘플을 체질하기 위해 분변 위에 와이어 또는 플라스틱 메쉬를 누릅니다. 작은 플라스틱 스패튤라를 사용하여 메쉬에 걸러진 물질을 긁어내고, 이를 Cato Kat 템플릿의 펀치 구멍에 가득 채웁니다.
스패튤라를 사용하여 구멍 내부의 내용물을 평평하게 다듬어 과도한 분변 물질을 제거합니다. 그런 다음, 현미경 슬라이드에 부착된 분변 물질이 흐트러지지 않도록 템플릿을 수직으로 들어 올립니다. 템플릿과 스패튤라는 세제와 물로 세척한 후 재사용할 수 있습니다.
다음으로, 글리세린 말라카이트 그린 용액에 최소 24시간 동안 담가둔 셀로판 조각을 현미경 슬라이드 위의 분변 시료 위에 덮습니다. 분변을 두꺼운 도말 형태로 펴기 위해, 분변 시료가 담긴 슬라이드 위에 깨끗한 현미경 슬라이드를 대고 부드럽게 누르며, 현미경 슬라이드의 너비보다 약간 작은 직경의 원형 범위 내에 시료를 고르게 분산시킵니다. 이제 슬라이드를 직사광선이 닿지 않는 곳에 두고 30분에서 60분 동안 투명해질 때까지 방치합니다.
30분에서 60분 후, 슬라이드를 회수하여 광학 현미경의 40배에서 100배 배율로 도말 표본을 체계적으로 검사합니다. 충란의 수를 세고 종별로 분류합니다. 이제, 충란 수에 24를 곱하여 표준화된 감염 추정치를 산출하며, 이는 일반적으로 분변 그램당 충란 수인 EPG로 표기합니다.
erman 기법을 수행하기 위해 먼저 유리 깔때기를 고정할 수 있는 스탠드를 설치하십시오. 유리 깔때기를 가져와 줄기에 고무 튜브 조각을 부착합니다. 클램프나 스프링 클립으로 튜브를 밀폐한 다음, 스탠드 위에 깔때기를 지지하여 고정하십시오.
다음으로 깔대기에 원뿔 모양의 체 또는 금속망을 넣습니다. 이 망 위에 의료용 거즈를 겹쳐 놓습니다. 그런 다음 장갑을 착용한 상태에서 깔대기에 수돗물을 가득 채우고 장치에서 누수가 없는지 확인합니다.
신선한 대변 20~30g을 의료용 거즈 중앙에 떠 넣고, 필요한 경우 물을 더 추가하여 완전히 잠기게 합니다. 그런 다음 의료용 거즈를 접어 샘플을 감쌉니다. 다음으로, 깔때기 아래쪽에서 인공광을 2시간 동안 조사합니다.
이는 Baermann 기법이 Strongyloides stercoralis 유충이 광성(phototactic)을 가지고 있어 조명된 분변 시료 밖으로 이동한다는 원리를 이용하기 때문입니다. 2시간 후, 고무 튜브의 클립을 조심스럽게 풀어 깔때기 하단의 물 50 milliliters를 원심분리 튜브에 따라냅니다. 다음으로, 수집한 물을 600 times G에서 5분 동안 원심분리합니다.
그 다음 침전물이 섞이지 않도록 상층액을 조심스럽게 따라냅니다. 튜브에 남은 마지막 몇 방울에 침전물을 재현탁시킨 후, 용액 두 방울을 현미경 슬라이드 글라스 위에 피펫으로 분주합니다. 광학 현미경을 사용하여 먼저 40배 배율에서 기생충 존재 여부를 확인하고, 이어서 100~400배 배율에서 종을 확진합니다.
OID stires의 1단계 유충들은 살아 있으며, 셔틀런 테스트를 설정하기 위해 현미경 아래에서 활발하게 움직일 것입니다. 먼저, 20m의 평탄한 직선 주행 코스를 측정하고 콘으로 거리를 표시하십시오. 테스트 참가자의 손목에 심박수 측정기를 착용시키고, 참가자의 가슴 주위에 해당 송신기를 배치하십시오.
이 장비는 테스트 전후의 심박수를 측정하여 참가자가 최대 노력을 기울였는지 모니터링합니다. 모니터를 고정한 후, 20m 구간에 해당하는 사전 녹음된 신호음의 속도에 맞춰 아동이 코스를 왕복하며 달리도록 요청하십시오. 처음에는 시속 8.5km의 달리기 속도로 시작합니다. 20m 간격을 알리는 신호음의 빈도는 매분 시속 0.5km에 해당하는 속도로 자동 증가하여 참가자가 새로운 20m 구간 달리기를 시작하도록 유도합니다.
신호가 울릴 때마다 달리고, 다음 신호가 울리기 전에 도착해야 합니다. 아동이 20m 구간을 두 번 연속으로 페이스에 맞춰 달리지 못할 경우 중단시키십시오. 그다음, 마지막 구간의 달리기 속도를 기록하십시오.
참가자의 연령, 성별 및 도달한 심박수와 함께 모든 항목을 작성하십시오. 테스트 종료 시, 이 심박수가 아동의 최대 심박수인지 확인하십시오. 최대 심박수에 도달하지 않았다면 아동이 최대 노력을 기울이지 않았을 수 있으므로 테스트를 반복해야 합니다.
이제 다음 공식을 사용하여 피험자의 최대 유산소 능력 또는 VO₂ max를 추정합니다. VO₂ max = 31.025 + 3.238 × 속도(km/h) - 3.248 × 연령(세) + 0.1536 × 속도(km/h) × 연령(세)입니다. 다음 두 이미지는 길이 약 45~74 µm, 너비 약 35~50 µm이며 여기의 수정된 *Ascaris lumbricoides* 알에서 볼 수 있듯이 두꺼운 난각을 가진 *Ascaris lumbricoides*의 알을 보여줍니다.
알부민 외피의 외관을 확인하십시오. 이 외피는 황갈색 빛을 띱니다. 이와 대조적으로, 여기에는 수정되지 않은 알루모이드 난자가 표시되어 있습니다. 외피가 없으며, 수정란보다 약간 더 길쭉하고 크다는 점에 유의하십시오.
전반적으로, 이 이미지는 Trichostrongylus orientalis(tea trico)의 충란을 보여줍니다. 길이는 약 50 µm, 너비는 22 µm이며, 뚜렷한 양극 플러그(polar plugs)가 있는 길쭉한 형태입니다. 이와 대조적으로, 여기 보이는 구충(hookworm)의 충란은 벽이 매우 얇으며, 충란 중심부의 조밀한 세포 집락 주변으로 투명한 환(ring)이 나타납니다.
이 이미지에는 S stir Corrales L 1단계 유충들이 나타나 있습니다. 이들은 길이는 약 180에서 380 microns이며 구강(buccal cavity)이 매우 짧습니다. 뚜렷한 생식 원기가 관찰되며 파란색 화살표로 강조 표시되어 있습니다.
빨간색 화살표는 끝이 뾰족한 유충의 꼬리를 나타냅니다. 신체 능력을 측정하기 위해 20미터 셔틀런 테스트를 수행하였습니다. 셔틀런 테스트 결과에 대한 해석은 다양한 방식으로 이루어질 수 있습니다.
아동의 신체 적합도는 연령, 성별, 기타 관련 가능성이 있는 건강 상태, 사회경제적 지위 및 문화적 습관이 유사한 감염자와 비감염자 간에 비교할 수 있습니다. 더 나아가 토양매개기생충(STH) 감염의 강도와 신체 적합도 사이의 가능한 용량-반응 관계를 확인하고, 다중 기생충 감염의 서로 다른 수준과 신체 적합도를 비교할 수 있습니다. 예를 들어, 여기의 그래프는 T. trichiura에 감염된 아동의 신체 적합도가 T. trichiura에 감염되지 않은 아동에 비해 유의하게 감소했음을 보여줍니다.
이 영상을 시청하고 나면 cut cuts 기법, bare mount 기법 및 20미터 셔틀런 테스트를 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 이러한 방법들은 소이 전송기 헬멧 감염이 학령기 아동의 신체적 적응력에 영향을 미치는지 평가하는 데 도움이 됩니다.
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본 연구는 토양 매개 기생충(STH) 감염이 학령기 아동의 신체 능력에 미치는 영향을 조사합니다. 진단 기술을 사용하여 감염 상태를 평가하고, 20미터 셔틀런 테스트를 통해 아동의 체력을 평가합니다.
토양 매개 기생충(STH) 감염 상태와 이것이 신체 적응력에 미치는 영향을 평가하는 것은 자원이 제한된 환경에서 공중 보건 부담을 평가하기 위한 질병 관련 시스템을 제공합니다. 표준화된 진단 및 적응력 측정 방법은 기생충 감염과 유산소 능력 및 생산성 저하를 연결하는 가설의 기전적 위험 요소를 제거할 수 있게 합니다. 이는 감염 강도와 기능적 결과에 대한 정량적이고 재현 가능한 데이터를 생성함으로써, 소외 질환 연구에서 표적 검증 및 표현형 스크리닝을 지원합니다.
이 방법은 STH 감염의 진단적 확인과 신체 적합도의 기능적 평가를 통합하여, 이를 소외된 감염성 질환의 초기 발견부터 전임상 워크플로우까지의 과정에 배치합니다.