2012년 12월 21일
복막 무결성의 손실을 이해하고 만성 골반 통증을 치료 endometriosis의 가벼운 형태의 여성과 쉽게 laparoscopy시 염료의 intraoperative 떨어 뜨림을 사용하여 감지 할 수 할 수있는 새로운 패러다임을 제공합니다.
다음 실험의 전반적인 목표는 골반통이 있는 여성을 진료하는 의료진에게 미세 자궁내막증의 존재와 범위를 명확히 확인할 수 있는 간편한 방법을 제공하는 것입니다. 이는 먼저 가시적인 자궁내막증 조사를 통해 명백한 질환 부위를 식별함으로써 달성됩니다. 두 번째 단계로 메틸렌 블루 염색약을 도포하여, 일반적인 복강경 검사에서는 놓칠 수 있는 미세 자궁내막증 부위를 시각화합니다.
다음으로, 환자의 병변을 완전히 제거하기 위해 청색으로 염색된 모든 부위를 절제합니다. 주사전자현미경(scanning electron microscopy) 분석 결과, 이 접근법은 하부 복막 세포에 영향을 미치는 보이지 않는 자궁내막증을 제거한다는 것이 확인되었습니다. 이러한 보이지 않는 자궁내막증은 결과적으로 월경혈이나 배란혈이 골반에 분포하는 감각 신경에 도달하게 하여 통증을 유발합니다. 이 기술의 함의는 자궁내막증의 진단과 치료 모두로 확장됩니다. 복막 표면을 손상시켜 혈액이 조직 하부의 신경과 접촉하게 함으로써 환자가 겪는 통증의 원인이 되는, 미세하거나 심지어 보이지 않는 자궁내막증까지 식별할 수 있게 해주기 때문입니다.
일반적으로 배란이나 월경 시 일부 혈액이 골반강으로 유입됩니다. 골반과 복강의 내벽은 온전한 중피 세포층으로 덮여 있어, 이러한 혈액이나 혈액 내의 통증 유발 인자들이 감각 신경 섬유와 상호작용하는 것을 방지합니다. 자궁내막증이 있는 여성의 경우, 염증성 자궁내막 유사 세포로 인해 복막 세포 간의 접촉이 소실될 수 있으며, 이로 인해 혈액이 하부 조직 및 신경 섬유로 접근할 수 있게 됩니다.
중피세포의 이러한 틈새는 주사 전자 현미경으로 관찰할 수 있으며, 이는 청색 염료가 해당 부위의 하부 조직을 염색할 수 있는 이유이기도 합니다. I. 만성 골반통을 겪고 있는 여성은 먼저 면담을 통해 병력을 확인하고, 생리 주기와 관련한 통증 발생 시점 및 국소화에 관한 세부 사항을 파악하며, 과민성 대장 증후군이나 방광 관련 증상을 포함한 동반 증상을 기록합니다. 또한, 환자 선정이 완료되면 해당 환자를 대상으로 신체 검사를 수행합니다.
복강경 수술을 받는 여성 환자에게 자궁내막증 절제 가능성과 연구를 위한 조직 사용에 대해 반드시 동의를 구하십시오. 5mm 제와부 포트와 하복부의 추가 5mm 포트를 통해 표준 기술을 사용하여 복강경 수술을 시행합니다. 골반강을 주의 깊게 관찰하여 자궁내막증 소견이 환자가 나타낸 수술 전 통증 부위와 일치하는지 확인하십시오.
다음으로 메틸렌 블루 염료를 멸균 식염수로 1:200 비율로 희석한 후, 흡입 바늘을 사용하여 골반 표면에 용액을 주입합니다. 그런 다음 흡입 세척을 수행하여 과잉 염료를 제거하고 복막 표면을 헹굽니다. 다시 한번 골반을 주의 깊게 검사하고 청색 염료가 흡수된 부위를 기록합니다.
가능한 경우, 복막의 병변 부위를 절제하십시오. 절제가 완료되면 골반강을 검사하여 출혈이 없는지 확인합니다. 그런 다음 CO2 가스를 배출하고 기구를 제거한 뒤 조직 접착제로 절개 부위를 봉합합니다.
회복실에서 한 시간 동안 휴식을 취한 후 환자는 귀가하도록 하며, 주사 전자 현미경(SEM)을 통해 보이지 않는 자궁내막증을 기록하기 위해, 먼저 복막 절편을 멸균 텔파(Telfa) 패드에 봉합하여 시료를 평평하게 펴고 복강 내 쪽이 위를 향하도록 방향을 유지합니다. 그런 다음 절편을 SEM용 글루타르알데히드 고정액에 넣습니다. 적절히 고정되면, 방광에서 자궁내막증 절제술을 받았으며 해당 부위에 더 이상 통증이 없는 다른 환자의 샘플을 주사 전자 현미경으로 처리할 수 있습니다.
염료가 복막 표면을 염색하지 않았으며, 이는 청색 염료 염색의 상관관계와 골반통 존재 사이의 연결성을 뒷받침합니다. 이 복막 표면 이미지는 생리 기간에 악화되는 만성 골반통과 방광 증상을 호소하는 여성으로부터 촬영되었습니다. 복강경 이미지는 청색 염료를 도포하기 전에 촬영되었으며, 복강경 조명의 반사만으로도 이미지의 화살표로 표시된 자궁내막증의 명확한 병변이 의심되는 부위들이 나타났습니다. 동일한 부위에서 촬영된 이 이미지를 통해 방광에 도포된 청색 염료가 복막의 뚜렷한 부분들을 염색시켰음을 확인할 수 있습니다.
이 이미지는 방광 상부를 덮고 있는 복막의 절제 부위를 보여주며, 이 이미지는 주사 전자 현미경(scanning electron microscopy)으로 관찰한 해당 부위의 세포들을 보여줍니다. 시료는 표준 절차에 따라 준비되었으며, 20 nanometers 두께의 금-백금 합금으로 스퍼터 코팅되었습니다. 복막이 자궁내막증으로 추정되는 세포들로 덮여 있으며, 복막의 중피세포들의 세포 간 접합부에 틈이 생겨 그 아래의 세포외 기질이 노출된 것을 확인할 수 있습니다.
반면, 동일한 방식으로 준비한 정상 복막 샘플의 주사 전자 현미경 이미지를 보면 정상 복막의 상피 세포들이 밀접하게 연결되어 있음을 알 수 있습니다. 보시는 바와 같이, 이는 복막 표면의 투과성을 유발하는 미세하고 보이지 않는 자궁내막증을 식별하는 데 도움이 되는, 복강경 수술 시 활용 가능한 상당히 간단한 기술입니다. 자궁내막양 세포를 모두 포함하여 병변 전체를 절제함으로써, 환자에게 통증 완화를 위한 최선의 기회를 제공할 수 있습니다.
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본 연구는 만성 골반통을 앓는 여성의 미세 자궁내막증을 검출하는 방법을 소개합니다. 복강경 수술 중 메틸렌 블루 염료를 사용함으로써, 시술자는 표준 기술로는 확인되지 않을 수 있는 자궁내막증 부위를 식별하고 절제할 수 있습니다.
본 연구는 만성 골반통을 앓고 있는 여성의 주요 진단 공백을 해결하기 위해, 복강경 수술 중 미세한 자궁내막증을 검출하는 메틸렌 블루 염료 기반 기술을 제시합니다. 이 방법은 복막 무결성 손실의 시각화 및 절제를 가능하게 하여, 자궁내막증 연구의 메커니즘적 리스크를 줄이고 통증 경로 연구의 타겟 검증을 개선할 수 있습니다. 이러한 접근 방식은 골반통의 복막-신경 상호작용을 조사하는 전임상 모델을 위한 재현 가능하고 복잡도가 낮은 도구를 제공합니다.
이 방법은 초기 발견(염료 섭취를 통한 가설 검증)부터 전임상 검증(초미세구조 확인) 및 치료적 개입(절제술)에 이르는 자궁내막증 연구 연속체에 부합하며, 반복적인 표적 위험 제거를 지원합니다.