Evaluatie van biomaterialen voor Blaas Vergroting van het gebruik Cystometrische analyses in verschillende diermodellen

Het doel van deze procedure is om het gebruik van biomaterialen voor blaasaugmentatie te evalueren door functionele gegevens via cytometrie te verkrijgen. Dit wordt bereikt door eerst het scaffold te bevestigen aan een defect dat in de blaas is gecreëerd. De tweede stap van de procedure is het tunnelen van de cystostomiebuis naar de buikwand.

De derde stap is het plaatsen van de cystostomiebuis in de uitgebreide blaas en het vastzetten hiervan op de rug van het dier. De laatste stap is het uitvoeren van cytometrie om de uitgebreide blaas vanuit een functioneel standpunt te evalueren. Uiteindelijk kunnen de resultaten via bewuste cytometrie veranderingen aantonen in de blaascapaciteit en compliantie, mictiedrukken, tijden van de voedingscyclus en residuele volumes na mictie.

De implicaties van deze techniek strekken zich uit tot de therapie van congenitale en verworven afwijkingen van de blaas of urethra die leiden tot een verminderde blaascapaciteit, compliantie en algehele functie. Omdat nieuwe biomaterialen die worden gebruikt voor blaasaugmentatie functioneel moeten worden geëvalueerd. Nadat een dier is voorbereid op een abdominale operatie, gebruikt u een scalpel om een midline incisie in het onderste deel van de huid te maken.

Trek de musculus rectus op met een getande pincet en ontleed het achteroppervlak van de spier met fijne scharen en baltonscharen. Exciteer de rest van de spier in de middellijn over de gehele lengte van de huidincisie. Lever de blaas via de incisiewond. Plaats vervolgens een hechting door de achterwand van de blaas en daarna door de voorwand van de blash. Plaats aanvullende hechtingen lateraal op de blaas; knoop deze hechtingen niet aan.

Wanneer de hechtingen strak worden gehouden, krijgt de blaas een vierkante configuratie van ongeveer één centimeter vier; de blaas wordt longitudinaal door de voorste blaaswand geopend, net onder de blaaskoepel langs de middellijn. Let erop dat er niet te veel spanning op deze hechtingen komt te staan, omdat ze gemakkelijk door het blaasweefsel kunnen trekken. Voor deze stap is loepvergroting gewenst voor de anastomose van het scaffold. Trim met een fijne schaar het zijden scaffold tot de geschatte grootte van het blaasdefect.

Begin bij één hoek van het scaffold en hecht dit met een doorlopende hechting aan de blaas. Om over de gehele omtrek van het defect een waterdichte afsluiting te creëren, is het voor de chirurg zeer belangrijk om een spanningsvrije, waterdichte anastomose van het scaffold aan de blaas uit te voeren. Dit garandeert dat alle urine in de blaas blijft, aangezien elk intraperitoneaal lek waarschijnlijk zal leiden tot sterfte van het dier.

Gebruik ter controle een hypodermische naald van 30 gauge om de blaas met water te vullen. Indien er een lek wordt vastgesteld, sluit dit dan met een extra onderbroken hechting. Plaats vervolgens de gereconstrueerde blaas terug in de buikholte voordat de buikwand wordt gesloten.

Injecteer bupivacaïne in de m. rectus abdominis en het onderhuids weefsel voor lokale anesthesie en sluit de incisie. Gebruik vervolgens een doorlopende hechting om de m. rectus abdominis opnieuw te benaderen en sluit de huid met een doorlopende hechting. Na het reinigen en drogen van de incisie wordt het dier overgebracht naar een warme, schone kooi om bij bewustzijn te komen na de anesthesie.

Maak voordat u begint een anker aan het uiteinde van een PE 50-buis van 10 centimeter, zodat deze niet uit de blaas kan glijden. Doe dit door het uiteinde van de buis voorzichtig aan een vlam bloot te stellen om het te laten uitzetten. Controleer vervolgens of de buis niet is geblokkeerd.

Inject zoutoplossing in het niet uitlopende uiteinde en controleer of deze doorstroomt. Nadat een dier voor de operatie is voorbereid, maar voordat de blaas wordt blootgelegd, wordt een incisie van één centimeter gemaakt op de rug tussen de scapulae. Gebruik de Metson balm-schaar om een vlak te creëren tussen de huid en de onderliggende spier.

Plaats vervolgens de punten van de schaar in het vlak en spreid deze om een subcutane tunnel naar de ventrale buikwand te creëren. Draai het dier daarna om. Exposeer de blaas en plaats deze terug in de buikholte.

Keer terug naar de dorsale incisie en plaats een kleine klem in het subcutane tunnel. Gebruik uw vingers om de intra-abdominale inhoud te beschermen en gebruik vervolgens de punten van de klem om door de buikwand te prikken. Pak nu het gladde uiteinde van de uitlopende buis met de klem vast en trek deze terug door de dorsale incisie.

Trek het uitlopende ankeruiteinde niet door de buikwand heen terwijl de tube door de incisie loopt. Plaats een purse-string hechting in de koepel van de blaas. Laat een kleine klem op het losse uiteinde van de hechtdraad zitten, zodat deze niet per ongeluk door de steek wordt getrokken.

Trek de hechting bovendien niet strak aan. Gebruik nu een naald van 18 gauge om de blaaswand in het centrum van de purse-stringhechting net genoeg door te prikken om intraluminaal te zijn. Plaats vervolgens de fijne pincet in de opening en spreid deze voorzichtig om het gat te verbreden.

Voer het uitlopende uiteinde van de katheter in het defect in de blaas in totdat deze intraluminaal is. Trek de purse-stringhechting rond de katheter strakker aan en knoop deze vast. Wikkel vervolgens het vrije uiteinde van de hechting één keer om de katheter en knoop dit vast.

Test nu de blaas door langzaam fysiologische zoutoplossing via de tube in te spuiten. Als er vloeistof uit de urinebuis stroomt, aspireer dan de zoutoplossing om de blaas te decomprimeren. Als er een lek wordt gevonden, moet dit met hechtingen worden gerepareerd; een urinilek kan leiden tot sterfte.

Sluit de abdominale incisie zoals eerder gedemonstreerd. Ga vervolgens over tot het sluiten van de dorsale incisie. De procedure voor het sluiten van de dorsale incisie verschilt voor ratten en muizen.

Knip bij ratten de katheterbuis op huidniveau door met een schaar. Plaats vervolgens een stompe naald van 22 gauge in de buis. Sluit de huid over de buis met een doorlopende hechting, waarbij de naaldhub naar buiten steekt.

Plaats nu een dop voor een intraveneuze lijn op de stompe naald en bevestig de catheterpunt aan de huid. Reinig vervolgens de incisie en laat het dier herstellen in een warme omgeving. Bij muizen moet de catheter als volgt worden bevestigd: laat de catheter lang en sluit het uiteinde van de catheter af door deze met een vlam te smelten.

Rol het uiteinde van de slang op en laat dit in de subcutane poche op de rug van het dier. Sluit de huid over de slang met een continue hechting. Laat zowel voor ratten als voor muizen voorafgaand aan de cytrische analyse ten minste vijf tot zeven dagen postoperatieve hersteltijd verstrijken.

Na het herstel op de dag van de cytometrie. Voor muizen is het noodzakelijk om eerst onder anesthesie de dorsale incisie te openen en de opgerolde slang uit de subcutane pouch te verwijderen. Sluit na het verwijderen van de slang deze incisie en wacht tot de muis volledig is wakker geworden uit de anesthesie voordat de cytometrie wordt uitgevoerd; begin hiermee door de dieren in metabole kooien te plaatsen die boven weegschalen zijn opgehangen.

Toegang nu tot de suprapubische katheters met een naald van 27 gauge, die via een ttu is verbonden met de druktransducer en de infusiepomp. Begin met de infusie van fysiologische zoutoplossing. Laat de registratie van het mictepatroon stabiliseren.

Gedurende de volgende 10 tot 20 minuten stijgt de blaasdruk eerst, gevolgd door een mictie. Registreer vervolgens de mictiecycli gedurende 15 tot 120 minuten, of ten minste drie of vier mictiecycli tijdens de procedure. Let op knikken van de katheter en andere complicaties.

Urodynamische registraties kunnen vervolgens worden geanalyseerd om parameters af te leiden zoals het uitgewiste volume, de compliantie, de maximale mictiedruk tijdens contractie, het interval, de mictiecyclustijd en het post-mictie residuele volume. Na het bekijken van deze video heeft u een goed inzicht in hoe de blaas kan worden uitgebreid met behulp van elk gewenst biomateriaal. U weet daarnaast hoe u de functie van elke blaas bij knaagdieren kunt evalueren met behulp van cystometrie bij bewuste, niet-gefixeerde dieren.