Określanie statusu zakażenia helmintozami przenoszonymi przez glebę oraz sprawności fizycznej dzieci w wieku szkolnym

Celem poniższych metodologii jest ułatwienie i standaryzacja prób oceny stanu infekcji helminthami przenoszonymi na tej drodze oraz ustalenie, czy infekcje te wpływają na sprawność fizyczną dzieci w wieku szkolnym. Osiąga się to poprzez zastosowanie techniki Kato-Katz w celu zdiagnozowania infekcji pospolitymi helminthami przenoszonymi przez glebę, a mianowicie Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura oraz glistami haczykowatymi Ancylostoma duodenale i Necator americanus. W drugim kroku wykonuje się technikę Ermana, która jest najszerzej stosowaną metodą diagnostyki Strongyloides stercoralis.

Następnie, w celu oceny sprawności fizycznej dzieci, przeprowadza się test biegowy wahadłowy na dystansie 20 metrów. Uzyskane wyniki wykazują różnice w poziomach sprawności fizycznej między dziećmi zakażonymi i niezakażonymi Helmut, w oparciu o wyżej wymienione metodologie. Połączenie tych metod może pomóc w udzieleniu odpowiedzi na kluczowe pytania, takie jak to, czy infekcje helmet przenoszone przez soję wpływają na sprawność fizyczną osób zakażonych oraz jakie jest rzeczywiste obciążenie wynikające z takich infekcji.

Technika Cato-Catza jest stosowana w celu ułatwienia wykrywania jaj pasożytów wydalanych w kale przez zakażone osobniki. Należy rozpocząć od umieszczenia standardowego szablonu Cato-Catza w centrum szkiełka przedmiotowego. Szablon posiada otwór w środku, przeznaczony do umieszczenia 41.7 milligrams kału przy zachowaniu środków ochrony w postaci rękawiczek.

Nanieś od dwóch do trzech gramów świeżej próbki kału na kawałek gazety lub folii aluminiowej. Następnie dociśnij do kału kawałek siatki drucianej lub plastikowej, aby przesiać próbkę. Za pomocą małej plastikowej szpatułki zgarnij przesiany materiał z siatki i całkowicie wypełnij nim otwór w szablonie Cato Kat.

Wyrównaj zawartość otworu za pomocą szpatułki, aby usunąć nadmiar materiału kałowego. Następnie wyjmij szablon pionowo, nie naruszając materiału kałowego, który przylega teraz do szkiełka przedmiotowego. Szablon i szpatułkę można ponownie wykorzystać po umyciu ich wodą z detergentem.

Następnie na próbce kału znajdującej się na szkiełku mikroskopowym należy umieścić kawałek celofanu, który był namaczany w roztworze gliceryny i zieleni malachitowej przez co najmniej 24 godziny. Aby rozprowadzić kał w postaci grubego rozmazu, należy delikatnie docisnąć czyste szkiełko mikroskopowe do szkiełka z próbką i równomiernie rozprowadzić materiał w obrębie koła o średnicy nieco mniejszej niż szerokość szkiełka mikroskopowego. Teraz należy odłożyć szkiełko w miejsce osłonięte od bezpośredniego światła słonecznego i pozostawić je do przejaśnienia na 30 do 60 minut.

Po 30 do 60 minut należy wyjąć preparat i systematycznie zbadać gruby rozmaz pod mikroskopem świetlnym przy powiększeniu od 40 do 100 razy. Należy policzyć liczbę jaj i podzielić je na gatunki. Następnie liczbę jaj mnoży się przez 24, aby uzyskać zestandaryzowany szacunek stopnia zakażenia, który konwencjonalnie wyraża się jako liczba jaj na gram kału lub EPG.

Aby przeprowadzić technikę Ermana, należy najpierw przygotować statyw, który może utrzymać lejek szklany. Należy wziąć lejek szklany i przymocować do jego stopki odcinek rurki gumowej. Rurkę należy zamknąć za pomocą zacisku lub żabki, a następnie przymocować lejek do statywu.

Następnie umieść w lejku sito lub kawałek siatki drucianej w kształcie stożka. Wyłóż siatkę kawałkiem gazy medycznej. Następnie napełnij lejek wodą z kranu i, mając na dłoniach rękawiczki, upewnij się, że układ nie przecieka.

Przenieś od 20 do 30 gramów świeżego kału na środek gazy medycznej i upewnij się, że próbka jest całkowicie zanurzona w wodzie, dodając więcej wody w razie potrzeby. Następnie złóż gazę medyczną nad próbką. W kolejnym kroku naświetlaj lejek sztucznym światłem od dołu przez dwie godziny.

Dzieje się tak dlatego, że technika Ermana opiera się na zasadzie, według której larwy *S. stercoralis* wykazują fototaksję i w związku z tym migrują poza oświetloną próbkę kału. Po dwóch godzinach delikatnie zwolnij zacisk w gumowej rurce i zlej 50 ml wody z najniższej części lejka do probówki wirówkowej. Następnie odwiruj zebraną wodę przy 600 ×g przez pięć minut.

Następnie ostrożnie odlej nadsącz, nie naruszając osadu. Pozostaw w probówce ostatnie kilka kropel, resuspenduj i nanieś pipetą dwie krople roztworu na szkiełko przedmiotowe. Preparat zbadaj pod mikroskopem świetlnym, najpierw przy powiększeniu 40× w celu wykrycia pasożytów, a następnie przy powiększeniu od 100× do 400× w celu potwierdzenia gatunku.

Larwy pierwszego stadium OID są żywe i będą aktywnie poruszać się pod mikroskopem w celu przygotowania testu biegów wahadłowych. Najpierw odmierz płaski, prosty tor biegowy o długości 20 metrów i wyznacz odległość za pomocą pachołków. Umieść monitor tętna na nadgarstku uczestnika testu, a odpowiadający mu nadajnik wokół klatki piersiowej uczestnika.

Urządzenie to służy do pomiaru tętna przed i po teście, co pozwala monitorować, czy uczestnik włożył maksymalny wysiłek. Po zamocowaniu monitorów poproś dziecko o bieg w przód i w tył na torze, dostosowując tempo do wcześniej nagranych sygnałów dźwiękowych odpowiadających pętlom o długości 20 metrów, zaczynając od prędkości biegu 8,5 km/h. Częstotliwość sygnałów wskazujących interwały 20 metrów automatycznie zwiększa się o równowartość 0,5 km/h w każdej minucie, aby zapewnić, że uczestnik rozpoczyna bieg w nowym interwale 20 metrów.

Sygnał brzmi w regularnych odstępach czasu i kończy się przed pojawieniem się następnego. Zatrzymaj dziecko, jeśli nie utrzyma tempa przez dwa kolejne odcinki o długości 20 metrów. Następnie zapisz prędkość biegu z ostatniego odcinka.

Uczestnik ukończył badanie, a następnie odnotowano wiek, płeć oraz osiągnięte tętno uczestnika. Po zakończeniu testu należy upewnić się, że tętno to jest tętno maksymalne dziecka. Jeśli tętno maksymalne nie zostało osiągnięte, dziecko mogło nie włożyć maksymalnego wysiłku i test należy powtórzyć.

Następnie oszacuj maksymalną zdolność tlenową lub VO₂ max uczestnika, korzystając z następującego równania. VO₂ max równa się 31,025 plus 3,238 razy prędkość w km/h minus 3,248 razy wiek w latach plus 0,1536 razy prędkość w km/h razy wiek w latach. Dwa poniższe obrazy przedstawiają jaja Ascaris lumbricoides, które mają około 45–74 µm długości i 35–50 µm szerokości oraz posiadają grube ściany skorupki, co widoczne jest tutaj na przykładzie zapłodnionego jaja Ascaris lumbricoides.

Zwróć uwagę na wygląd otoczki albuminowej, która nadaje jej złotobrązową barwę. Dla kontrastu, tutaj przedstawiono niezapłodnione jajo alumoidowe. Zauważ brak zewnętrznej otoczki oraz fakt, że jajo jest nieco wydłużone i większe od jaja zapłodnionego.

Ogólnie rzecz biorąc, na tym obrazie widoczne są jaja *T. trichiura*. Mają one około 50 mikronów długości i 22 mikrony szerokości, są wydłużone i posiadają wyraźne korki biegunowe. W przeciwieństwie do nich, widoczne tutaj jaja glisty mają bardzo cienką ściankę, za którą następuje przejrzysty pierścień otaczający gęsty skup komórek w centrum jaja.

Na tym obrazie przedstawione są larwy S stir Corrales L one. Ich długość wynosi około 180 do 380 mikronów i posiadają one bardzo krótką jamę gębową. Można zaobserwować wyraźny prymordium narządu płciowego, który został zaznaczony niebieską strzałką.

Czerwona strzałka wskazuje ogon larwy, który ma ostry koniec. Test biegowy wahadłowy na dystansie 20 metrów został przeprowadzony w celu pomiaru sprawności fizycznej. Interpretację wyników testu biegowego wahadłowego można przeprowadzić na różne sposoby.

Kondycję fizyczną dzieci można porównać między osobnikami zakażonymi a niezakażonymi, którzy są podobni pod względem wieku i płci, innych potencjalnie istotnych stanów zdrowotnych, statusu społeczno-ekonomicznego oraz nawyków kulturowych. Można ponadto próbować zidentyfikować możliwą zależność dawka-odpowiedź między intensywnością zakażeń STH a kondycją fizyczną oraz porównać różne poziomy multiparazytyzmu z kondycją fizyczną. Przykładowo, przedstawiony tutaj wykres pokazuje, że kondycja fizyczna była znacząco obniżona u dzieci zakażonych T Tri Coria w porównaniu z dziećmi, które nie były zakażone T Tri Coia.

Po obejrzeniu tego filmu powinni Państwo posiadać solidną wiedzę na temat przeprowadzania techniki cut cuts, techniki bare mount oraz testu biegu z migawką na dystansie 20 metrów. Metody te pomogą ocenić, czy infekcje hełmów soy transmitter wpływają na sprawność fizyczną dzieci w wieku szkolnym.