Rim murino técnica de transplante

O objetivo geral deste procedimento é demonstrar uma técnica de anastomose arterial modificada para transplantes renais em camundongos. Isso é feito primeiro dissecando cuidadosamente os vasos relevantes no doador. O segundo passo é criar um manguito de calcanhar e dedo do pé da aorta abdominal doadora adjacente à artéria renal.

Em seguida, esse manguito de calcanhar e dedo do pé é usado para formar a anastomose arterial no receptor. Em última análise, essa técnica deve resultar em casos muito baixos de trombose arterial. Este vídeo mostrará como criar um calcanhar arterial e um manguito de dedo do pé para facilitar os transplantes de rim na boca.

A principal vantagem desta técnica de resistir aos métodos é que o caminho do fluxo sanguíneo da aorta receptora para a artéria renal do doador é endireitado, resultando em uma redução da ativação plaquetária e formação de trombose Usando a técnica estéril sob um microscópio cirúrgico, colha o rim do doador, execute corretamente. O tempo de colheita será de 15 a 20 minutos. Remova o pelo e prenda o animal.

Prepare o local da cirurgia lavando a pele com iodopovidona, cubra o mouse e comece a cirurgia com uma incisão abdominal na linha média de dois centímetros. Retraia o intestino para o peito e envolva-o em gaze úmida. Mantenha a gaze úmida durante todo o procedimento.

Agora, encontre os grandes vasos abdominais e mobilize-os. Quaisquer ramos lombares devem ser cauterizados ou ligados com sutura de náilon 10 zero. Em seguida, disseque sem rodeios uma divisão de dois milímetros da veia cava inferior e da aorta distal aos vasos renais esquerdos.

Em seguida, ligado e divida quaisquer pequenos ramos arteriais e venosos que se ligam ao vaso renal. Continuar a dissecção romba para separar a veia renal da artéria renal, permitindo assim a posterior criação de um remendo de Carroll na extremidade proximal da veia renal, este remendo será utilizado para a formação da anastomose venosa. Em seguida, goste e divida os vasos supra-renais esquerdos para acessar a aorta supra-renal.

Uma vez acessado, laço seis zero seda. Sutura ao redor da aorta supra-renal para uso posterior. Agora mobilize os vasos renais e o ureter da fáscia circundante.

Gire o rim para a direita no lado posterior, ligue e divida todos os ramos vasculares com foco no ureter. Liberte cuidadosamente o ureter da fáscia circundante. Não perturbe o hilo renal e preserve os vasos eréticos.

Em seguida, divida o ureter ao nível do ducto deunal. O rim agora pode ser recuperado. Primeiro, injete lentamente 300 unidades de heparina na VCI distal para heparinizar o doador.

Em segundo lugar, amarre a sutura de seis zero ao redor do aa supra-renal. Em seguida, perfundir o rim esquerdo da aorta abdominal, injetando 0,8 mililitros de solução salina de heparina a 100 unidades por mililitro. Após a perfusão, crie imediatamente o adesivo de caril venoso, evitando assim o refluxo para o rim.

Retraia a veia renal em direção ao rim para revelar o AA e a artéria renal. Agora divida a aorta adjacente à artéria renal. Faça um calcanhar e um punho.

Então, se zero minutos de isquemia fria for necessário, transfira o rim recuperado para um receptor preparado. Alternativamente, transfira os órgãos para uma câmara de armazenamento de quatro graus Celsius e, em seguida, eutanasiará os doadores conforme indicado no protocolo de texto. Este procedimento levará de 35 a 45 minutos, conforme feito para anestesiar o doador.

O receptor também complementa o bolus inicial conforme necessário. Forneça ao destinatário creme oftálmico. Em seguida, dê ao animal uma injeção de buprenorfina e continue sua administração após o procedimento, após fazer a incisão inicial e deslocar o intestino como feito com o doador, prossiga com uma nefrectomia direita, ligue a artéria e veia renal com seis sutura zero ligar e dividir o ureter proximal ao rim com seis sutura zero.

Em seguida, excisar o rim distal à sutura vascular. Agora abaixo dos vasos renais, isole o AA e a VCI então superior ao local da anastomose. Coloque uma gravata de algodão de quatro zero ao redor da aorta e a IVC faça o mesmo inferior ao local.

Quaisquer vasos lombares encontrados na região devem ser cauterizados ou ligados com sutura de náilon 10 zero firmemente não a sutura inferior e, em seguida, firmemente não a sutura superior. Isso reterá um pouco de sangue na aorta, facilitando a autotomia AOR. Realize a atomia com uma agulha de calibre 30 e, em seguida, estenda a incisão para cerca de dois milímetros de comprimento usando uma microtesoura fina.

O próximo passo é fazer uma anastomose endo, do calcanhar doador e do manguito do dedo do pé até a aorta do receptor. Primeiro, coloque um ponto de permanência no calcanhar da aorta doadora com sutura de 10 zeros. Continue isso através da extremidade inferior da incisão na aorta do receptor e amarre.

Em segundo lugar, coloque uma sutura zero 10 na extremidade superior da incisão aórtica e continue até o dedo do pé do manguito doador e amarre. Em terceiro lugar, começando pela extremidade superior, faça uma sutura líquida na parede lateral da aorta e amarre contra o ponto inferior colocado anteriormente. Em seguida, vire o rim e continue uma sutura contínua ao longo da parede medial e amarre contra o ponto superior.

Complete a anastomose venosa puncionando a VCI com a agulha e, em seguida, estendendo a incisão com uma microtesoura fina. Usando náilon 10 zero, amarre a veia renal do doador ao canto inferior da VCI. Coloque outra sutura de 10 zero na extremidade superior da VCI e da veia doadora e faça uma sutura contínua em ambos os lados.

Tal como acontece com a anastomose arterial, a aversão às bordas do tecido ajuda na vedação e cicatrização. Agora, verifique seu trabalho. As paredes opostas não devem ser presas pelos pontos ou o fluxo sanguíneo será muito restrito.

Outro fator de vital importância para garantir que a tensão da linha de sutura da anastomose seja ideal é muito frouxa e haverá vazamento irreversível muito apertado e haverá estenose para fluir. Se for do lado arterial, isso resultará em baixa profusão do enxerto. Se no lado venoso resultará em um rim congestionado.

Quando a anastomose estiver concluída, solte a braçadeira distal para estabelecer o fluxo venoso. Em seguida, afrouxe gradualmente o laço proximal e lave para hemostasia na anastomose arterial. Quando ambas as anastomoses são confirmadas como seguras, aqui está a bexiga do receptor com uma agulha de calibre 20 fazendo dois orifícios, passe uma pinça pelos orifícios e puxe o ureter doador pela bexiga.

Em seguida, ancore a extremidade proximal do ureter à parede da bexiga com 2 10 0 suturas. Apare o comprimento excessivo do ureter saliente para que ele se retraia dentro da bexiga. Em seguida, feche o outro orifício na bexiga com sutura de 10 zeros.

Complete a cirurgia substituindo o intestino, fechando o abdômen em duas camadas com cinco suturas de seda zero e injetando um microlitro de solução salina no abdômen antes de fechar. Após o fechamento do abdômen, injetar mais 0,8 mililitros de soro fisiológico por via subcutânea e recuperar o animal em um cobertor quente Em um ano de coleta de dados, essa técnica reduziu significativamente a incidência de trombose arterial de 35% para 0% e essa taxa de trombose de 0% foi mantida desde que a imuno-histoquímica foi realizada em um rim não transplantado e um rim transplantado. Usando a técnica descrita, uma coloração de deslocamento ácido periódico revelou células tubulares proximais normais no controle e no doador.

As células são cuboidais com um citoplasma claro e um núcleo de luz redondo no meio da célula para ambas as setas. Aponte evidências de uma leve lesão na borda da escova, mas a maioria das bordas da escova é regular e bem preservada. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como realizar uma anastomose arterial do calcanhar e do dedo do pé que resultará em casos reduzidos de trombose e transplantes renais mais bem-sucedidos.