Развитие амелогенина-хитозана гидрогеля для Экстракорпоральное Эмаль Восстановление с плотной интерфейса

Общей целью этой процедуры является разработка протокола изготовления гидрогеля AMLO и хитозана для поверхностной реконструкции эмали. Это достигается путем предварительной подготовки протравленных срезов зубов. На втором этапе готовится свежий гидрогель AMLO и китан.

Далее на поверхность среза зуба наносится гидрогель AMLO и китан. Наконец, зубная эмаль восстанавливается с помощью гидрогеля AMLO chizen в искусственной слюне. В конечном счете, ультразвуковая обработка и нанопротез могут быть использованы для оценки механической прочности вновь образованного слоя и его связывания с натуральной эмалью.

Применение этой методики распространяется и на разработку нами технологии, которая при нанесении на пораженную зубную эмаль, как у взрослых, так и у детей, останавливает раннее поражение кариесом, восстанавливает потерю эмали из-за кариеса, сохраняет структуру зуба и предотвращает прогрессирование кариеса. Демонстрировать процедуру будет доктор Читтар Уан, постдокторант из моей лаборатории. Начните с выбора третьего коренного зуба человека без восстановленного кариеса.

Используйте низкоскоростную алмазную пилу с водяным охлаждением, чтобы разрезать коронку в продольном направлении на срезы толщиной два миллиметра, а затем удалите корневую часть коренного зуба ультразвуком. Очистите ломтики в течение двух минут, а затем трижды промойте их ионизированной водой, чтобы смоделировать эрозивные поражения. Протравите два среза 30% фосфорной кислотой в течение 30 секунд.

Затем сразу же промойте их ионизированной водой. Затем ультразвуковым. Снова очистите протравленные ломтики на две минуты и промойте их ионизированной водой.

Еще три раза. Приготовить казанский сток раствором. Сначала растворите 1% веса на объем, Казань в растворе уксусной кислоты 1% объема на объем, затем перемешайте при 80 градусах Цельсия в течение ночи.

Охладив раствор до комнатной температуры, процедите эсан через фильтр 0,45 микрометра, а затем добавьте один моляр гидроксида натрия для регулировки рН до 5,0. Чтобы приготовить исходный раствор кальция и фосфата, взвесьте хлорид кальция и смешайте 0,1 молярного раствора. Затем перебейте раствор вихрем до тех пор, пока он не станет прозрачным, и отрегулируйте значение pH до 11 с помощью одного молярного гидроксида натрия.

Затем взвесьте диба фосфат натрия. Смешайте 0,1 молярный раствор и перемешайте до тех пор, пока раствор не станет прозрачным. Чтобы приготовить гидрогель AMLO Genin kaizan, добавьте 960 микролитров свежеприготовленного 1%-ного раствора эсана в тюбик, содержащий 200 микрограммов рекомбинантного свиного AMLO genin.

раствор в вихревом состоянии до прозрачного состояния. Теперь добавьте 25 микролитров 0,1 молярного раствора хлорида кальция, а затем 15 микролитров 0,1 молярного раствора диба натрия фосфата в раствор AMLO, содержащий озан. Вортексируйте раствор в течение пяти минут.

Затем осторожно добавьте один молярный гидроксид натрия, чтобы отрегулировать pH AMLO, и озановый раствор до 6,5 AMLO, и озан-гидрогель сформируется, когда значение pH достигнет 6,5, чтобы инициировать повторный рост эмали в AMLO andaz, гидрогеле. Сначала отрегулируйте pH раствора искусственной слюны до 7,0 с помощью одного молярного гидроксида натрия и храните раствор при температуре четыре градуса Цельсия. Затем с помощью шприца нанесите около 20 микролитров гидрогеля AMLO и чизен на краевой срез зуба и поместите его в влагопоглотитель при комнатной температуре.

Через два часа добавьте в раствор слюны 300 ppm фторида натрия, а затем переложите срез зуба в стакан, содержащий 30 миллилитров раствора. Накройте стакан алюминиевой фольгой, а затем поставьте стакан в духовку при температуре 37 градусов Цельсия. Наконец, удалите срез зуба через три-семь дней и поместите его в влагопоглотитель при комнатной температуре до тех пор, пока он не высохнет После ремонта с помощью AMLO и гидрогеля чизен в течение семи дней на поверхности вытравленной эмали образуется слой эмали толщиной 15 микрометров.

Вновь выращенный слой состоит из высокоупорядоченных массивов кристаллов диаметром около 50 нанометров, растущих преимущественно вдоль морской оси, перпендикулярной поверхности. Обратите внимание, что эти игольчатые кристаллы организованы в пучки, похожие на основные единицы натуральной эмали. Выбранное изображение дифракции электронов восстановленного слоя демонстрирует дугообразную картину, показывающую иерархическое выравнивание вновь выращенных кристаллов.

Рентгеноструктурный анализ в направлении 0 0 2 подтверждает, что вновь выращенный слой состоит из аппетита, которые выровнены вдоль кристаллографической оси С в соответствии с данными сканирующей электронной микроскопии и выбранной области наблюдений электронной дифракции на этом изображении показана микроструктура границы раздела между вновь выращенным слоем и натуральной эмалью. Обратите внимание, что вновь выращенные кристаллы не росли в том же направлении, что и исходный кристаллит эмали, и что рост, опосредованный белком, приводит к перпендикулярной ориентации вновь выращенных кристаллов относительно кристаллов естественной эмали. На границе раздела между только что выращенным слоем и эмалевой подложкой нет видимого зазора.

На наноуровне эмаль и выращенные кристаллы слились воедино, образуя бесшовный интерфейс. После 10 минут ультразвуковой обработки вновь выращенный слой, образовавшийся в гидрогеле AMLO Genin chito, все еще плотно связан с поверхностью эмали и организованная структура сохраняется для образца, обработанного гидрогелем tizen, без аммологена. И тем не менее, наблюдается большой зазор между эмалью и ремонтируемым слоем, чтобы четко отличить только что выросший слой от натуральной эмали.

В этом эксперименте генин AMLO во вновь выращенном слое был иммунофлуоресцентно помечен, а присутствие генина AMLO было затем подтверждено зеленой флуоресценцией в только что выращенном слое. Как показано на графике после кислотного травления, твердость и модуль модуля поверхности эмали снижаются почти на 98 и 88% соответственно. Контрольная группа, получавшая озан-гидрогель без генина AMLO, демонстрирует лишь ограниченное улучшение как твердости, так и модуля упругости.

Напротив, после минерализации в гидрогеле AMLO и озане наблюдается увеличение модуля упругости почти в четыре раза и в девять раз по твердости. В VI и дальнейшей оценке на моделях этот протокол может быть расширен для разработки технологии лечения дефектов энама, таких как ранний кариес, расстояние и эрозия. Ena.