Оценка анализатора тестирования в месте оказания медицинской помощи для измерения лейкоцитов периферической крови
22 марта 2022 г.
Здесь представлен протокол измерения лейкоцитов периферической крови с помощью анализатора лейкоцитов на основе карты POCT. Одни и те же образцы крови были протестированы двумя автоматизированными гематологическими анализаторами для оценки согласованности и точности результатов. Результаты показали, что оцениваемый анализатор имел хорошую корреляцию с системой отсчета.
Подробное описание стандартизированной работы анализатора в протоколе может помочь человеку, который никогда не оперировал анализатором, завершить эксперименты в основном важными, точными и с достоверными результатами. Использование инновационной технологии Jove имеет такие преимущества, как наличие комплекта для обнаружения одного человека, отсутствие жидких отходов, быстрота, бесплатность для планового обслуживания и удобная эксплуатация. Нужно сначала понять принцип обнаружения анализатора, а затем ознакомиться с несколькими критическими шагами в протоколе, такими как забор крови, подъем реагентов и так далее.
Начать запуск анализатора можно с выключения или включения питания на задней панели анализатора, чтобы убедиться, что индикатор анализатора горит. Введите имя пользователя и пароль в диалоговом окне входа и нажмите на логин. Система должна выполнить самопроверку и автоматически начать инициализацию и отобразить страницу анализа образца.
Начните подготовку к тесту, нажав на следующий образец, затем правильно введите пол, имя и другую клиническую информацию и выберите соответствующую референс-группу. Позже нажмите ok, чтобы сохранить информацию. Разорвите тонкую пленку модуля обнаружения клеток крови, нажмите кнопку входа со склада и правильно поместите модуль обнаружения клеток крови в склад машины, с его отверстием, обращенным наружу.
Прокольте гемолитический реагент потолочной пленки кончиком количественной пипетки. Для забора капиллярной крови продезинфицируйте левый безымянный палец один раз ватным тампоном, смоченным в спирте одним способом. После того, как спирт естественным образом высохнет, используйте кровяной ланцет, чтобы проколоть кожу левого безымянного пальца.
Аккуратно выдавите первую каплю крови и протрите ее ватным тампоном. Выжмите достаточно крови, чтобы сформировать полную каплю воды и собрать пять микролитров образца крови, используя капиллярную трубку внутри количественной пипетки. Для смешивания реагентов вставьте количественную пипетку в гемолитический реагент и плотно надавите на него, чтобы освободить образец крови из капиллярной трубки.
Смешайте кровь в капиллярной трубке и гемолитическом реагенте, перевернув ее вверх дном 15-20 раз с постоянной скоростью, пока в капиллярной трубке не останется красной крови. Начните анализ образца, открыв крышку и вдавив раствор в модуль обнаружения клеток крови. Далее нажмите кнопку входа со склада.
После того, как модуль обнаружения клеток крови войдет на склад, нажмите кнопку подсчета. На интерфейсе анализатора дважды нажмите на кнопку OK, чтобы подтвердить, что модуль обнаружения клеток крови был удален. На интерфейсе анализатора нажмите на кнопку печать, чтобы распечатать результаты теста.
Чтобы выключить анализатор, нажмите на кнопку завершения работы на интерфейсе анализатора и выберите да в диалоговом окне, которое появляется на интерфейсе. Убедитесь, что система начинает выполнять последовательность завершения работы. Установите переключатель выключения или включения на задней панели мэйнфрейма на выключение после завершения последовательности завершения работы.
На рисунке показан точечный график и корреляционный анализ Спирмена оцениваемых и опорных систем. Количество лейкоцитов и количество гранулоцитов демонстрируют самую сильную корреляцию. Принимая во внимание, что число лимфоцитов демонстрирует самую слабую корреляцию между оцениваемой и эталонной системами.
Был получен график Бланда-Альтмана для визуализации анализа согласованности. Результаты лейкоцитов, обнаруженные оцениваемой системой, согласуются с системой отсчета. Средние значения различий в индексах лейкоцитов выше нуля, что свидетельствует о том, что результаты тестов оцениваемой системы несколько выше, чем у эталонной системы.
Во время эксперимента мы должны сделать все возможное, чтобы кровь, которую мы собрали, составляла ровно 5 микролитров, а сторона помещения полностью растворялась гемолитическим реагентом.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Обзор
В данной статье представлен протокол измерения количества лейкоцитов периферической крови с помощью портативного анализатора лейкоцитов на основе тест-карт (POCT). Точность и согласованность работы данного анализатора оценивались в сравнении с двумя автоматическими гематологическими анализаторами.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Гематология
- Клиническая диагностика
- Экспресс-диагностика (Point-of-care testing)
Теоретическая часть
- Анализ лейкоцитов имеет решающее значение для диагностики различных заболеваний.
- Автоматические анализаторы обеспечивают быстрое и точное получение результатов.
- Устройства для экспресс-диагностики (POCT) повышают доступность и удобство проведения тестирования.
- Понимание принципов работы этих устройств необходимо для получения надежных результатов.
Цель исследования
- Оценить эффективность нового анализатора лейкоцитов.
- Сравнить результаты с данными установленных автоматических гематологических анализаторов.
- Предоставить подробный протокол для эффективного использования анализатора.
Используемые методы
- Стандартизированная работа анализатора лейкоцитов.
- Сбор и подготовка образцов крови.
- Тестирование образцов на новом анализаторе и на референсных анализаторах.
- Статистический анализ для оценки корреляции и точности.
Основные результаты
- Новый анализатор продемонстрировал хорошую корреляцию с референтными системами.
- Результаты были согласованными при использовании различных методов тестирования.
- Операционная эффективность была отмечена как ключевое преимущество.
- Удобный интерфейс упростил эксплуатацию устройства.
Выводы
- POCT-анализатор лейкоцитов является надежным инструментом для анализа крови.
- Он обладает значительными преимуществами с точки зрения скорости и простоты использования.
- Рекомендуется дальнейшая валидация в клинических условиях.
Часто задаваемые вопросы
Практическая значимость для отрасли
Анализаторы лейкоцитов для использования по месту оказания медицинской помощи восполняют критические пробелы в диагностике первичного звена здравоохранения, обеспечивая быструю и точную дифференцировку лейкоцитов без необходимости в централизованной лабораторной инфраструктуре. Эта возможность способствует ранней сортировке инфекций и рациональному применению противомикробных препаратов в условиях ограниченных ресурсов, что напрямую влияет на рабочие процессы валидации доклинических биомаркеров, где корреляционные гематологические изменения определяют релевантность моделей заболеваний. Продемонстрированная корреляция с референсными гематологическими анализаторами обеспечивает прогностическую достоверность для трансляционного применения в моделях воспалительных заболеваний.
Стратегическое применение в биофармацевтических исследованиях и разработках
Ранний поиск и валидация мишени
- Научная ценность: позволяет исследовать опосредованные лейкоцитами воспалительные пути в моделях заболеваний посредством количественного анализа сдвигов в популяциях нейтрофилов, лимфоцитов и промежуточных клеток.
- Практическая ценность: обеспечивает воспроизводимые гематологические показатели для исследований по валидации мишеней, в которых инфильтрация иммунных клеток служит фармакодинамическим биомаркером.
Скрининг и разработка анализа
- Научная ценность: Позволяет получать стандартизированные данные дифференциального подсчета лейкоцитов, необходимые для скрининга готовности анализа иммуномодулирующих соединений в системах цельной крови.
- Практическая ценность: Устраняет образование жидких отходов и необходимость сложной подготовки проб, обеспечивая совместимость с высокопроизводительным скринингом при минимальном уровне технической подготовки.
Трансляционные и доклинические исследования
- Научная ценность: Обеспечивает валидацию систем, имеющих значение для изучения заболеваний, путем корреляции динамики периферических лейкоцитов с тканеспецифическими воспалительными конечными точками в доклинических моделях.
- Практическая ценность: Облегчает продольный мониторинг в доклинических исследованиях благодаря минимальным требованиям к объему крови (5 µL при капиллярном отборе) и быстрому получению результатов.
Интеграция конвейеров и рабочих процессов
Анализатор служит инструментом обеспечения непрерывности процесса от этапа поиска до доклинических исследований, позволяя использовать профилирование лейкоцитов в промежутке между ранним тестированием гипотез о мишенях и фазами оптимизации ведущих соединений, когда иммуномодуляция является ключевым механизмом действия.
- Биология открытий: способствует снижению механистических рисков путем количественной оценки иммунного ответа клеток на модуляторы сигнальных путей, что уменьшает количество ложноположительных результатов в каскадах валидации мишеней.
- Скрининг: обеспечивает получение количественных коррелированных данных по лейкоцитам (WBC, гранулоциты, лимфоциты), что позволяет сравнивать эффект соединений в различных группах терапии.
- Аналитика: предоставляет измерения, подтвержденные корреляцией Спирмена (rs = 0.972 для WBC/гранулоцитов, rs = 0.851 для лимфоцитов), обеспечивая надежную сопоставимость между системами для принятия решений на основе данных.
- Трансляционные исследования: связывает профилирование лейкоцитов на этапе открытий с доклиническим этапом за счет согласованности с эталонными гематологическими системами, подтвержденной методом Бланда-Альтмана.
- Корпоративное повторное использование: представляет собой развертываемый функционал для множества терапевтических областей, требующих иммунного мониторинга, что сокращает избыточные усилия по валидации.
Операционное и организационное воздействие
- Научная ценность: Прогностическая уверенность в лейкоцит-опосредованном механизме действия, снижение механистической неопределенности при скрининге иммуномодуляторов.
- Операционная ценность: Стандартизация за счет эксплуатации без необходимости технического обслуживания, воспроизводимость благодаря пределам согласия 95% и масштабируемость посредством наборов для детекции, рассчитанных на одного специалиста.
- Стратегическая ценность: Более обоснованные решения о продолжении или прекращении разработки (go/no-go) в программах по созданию иммуномодуляторов, эффективность использования капитала за счет исключения зависимости от базовых лабораторий и снижение биологических рисков на поздних стадиях благодаря раннему иммунному профилированию.
- Влияние на портфель: Приоритизация соединений с учетом рисков на основе профилей лейкоцитарного ответа, что позволяет принимать решения о продвижении препаратов на основе транслируемых гематологических биомаркеров.
Особенности реализации
- Требуются базовые знания в области гематологии для точной интерпретации лейкоцитарной формулы (нейтрофилы, лимфоциты, промежуточные клетки).
- Необходима подготовка по забору капиллярной крови и навык работы с количественными пипетками для обеспечения точного объема образца 5 µL.
- Требуется межкомандная стандартизация подбора референтной группы (нормы с поправкой на возраст/пол) для согласованного лонгитюдного мониторинга.
- Необходима валидация адаптации при переходе от цельной крови человека к доклиническим модельным системам (например, мышиным или моделям нечеловеческих приматов).
- Практическое ограничение: более низкая корреляция по лимфоцитам (rs = 0.851) обуславливает необходимость ортогональной валидации при использовании иммунотерапии, направленной на лимфоциты.
