Ortotopik Aort Nakli: Rat Modeli Kronik Vaskülopati Geliştirme Çalışması

Bu prosedürün genel amacı, transplant vaskülopatisi gelişimini incelemek için doğru bir model ve kolayca uygulanabilir bir yöntem oluşturmaktır. Bu, PVG'den CI su kombinasyonuna doğru bir uygulama kullanılarak gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, donör aortanın hasat edilmesidir.

Prosedürün üçüncü adımı, alıcının hazırlanmasıdır. Prosedürün son adımı, donör aortun alıcının aortu ile anastomozlanmasıdır. Nihayetinde, patohistoloji kullanılarak neointima oluşumunu gösteren sonuçlar elde edilebilir.

Merhaba, ben Sonya Schwefel, Almanya'daki Hamburg Üniversite Kalp Merkezi'nde bulunan TS Eye Lab'de transplant immünolojisi profesörüyüm. Ben de Manish Duboff, ben de TS Eye Lab'denim.

Laboratuvarım transplant immünolojisi ile ilgilenmektedir. Bu videoda, farelerde transplant vaskülopatisi gelişimini incelemek için kolay ve geçerli bir model olan Ortotopik aort transplantasyonu modelini tanıtacağız. Bu prosedürü, kardiyovasküler greftlerde kronik reddi araştırmak için laboratuvarımızda kullanmaktayız.

Ortotopik aort transplantasyon modelinde, aorta histolojik olarak kolayca değerlendirilebilir. Ek olarak, CI modeline PVG uygulanması, özellikle transplant vaskülopatisi çalışmaları için faydalıdır. Çünkü akut vasküler reddetme önemli bir karıştırıcı faktör değildir ve vaskülopati gelişimi klinik bulgularla benzerlik göstermektedir.

Hadi başlayalım. Bu ORTOTOPİK aort transplantasyonunda kullanılan donör, yaklaşık 250 ila 300 gram ağırlığında bir PVG sıçanıdır. Hayvan anestezi altına alındıktan sonra abdominal ve torasik tüylerini tıraş edin.

Sıçanı sırtüstü yatırın ve burnu ile ağzına bir yüz maskesi yerleştirin. Anesteziyi sürdürmek için, karın ve göğüs bölgesini önce Provo iyot ile genişçe dezenfekte edin, ardından %80 etanol uygulayın. Sonrasında, hayvanın arka ayaklarını sıkarak reflekslerini kontrol edin.

Yeterince anestezi uygulandığından emin olun. Karın boşluğunu açıp abdominal aortada bir delik oluşturarak sıçanı kanatın. İnen torasik aortayı bulmak için göğüs kafesini dikkatlice açın.

Torasik aortu; yağlar, sinirler ve özofagus gibi çevre dokulardan ayırın. Aorta doku hasarı vermeden, acuta pens ile aorttan 1,5 santimetrelik bir parça çıkarın. Aort greftini soğuk salin ile iyice perfüze edin ve grefti dört santigrat derecede saklayın.

Bu ortotopik aort transplantasyonu için alıcı, yaklaşık 250 ila 300 gram ağırlığında bir A CI sıçanıdır. Bu prosedüre başlamak için, anestezi altındaki sıçanın karın bölgesini tıraş edin ve anestezi sırasında gözlerin kurumasını önlemek için göz merhemi uygulayın. Sıçanı sırtüstü yatırın ve anesteziyi sürdürmek için burun ve ağzının üzerine bir yüz maskesi yerleştirin.

Ardından, abdominal bölgeyi önce provo iyot, ardından %80 etanol kullanarak dezenfekte edin. Sıçanın yeterince anestezi aldığını doğrulamak için arka ayaklarını çimdikledikten sonra, orta hat abdominal insizyon yaparak ve deri ile kası ayırarak abdomeni açın. İki adım.

Karın açıldıktan sonra, bağırsakları serum fizyolojik ile doldurulmuş eldivene yerleştirin. Nem kaybını önlemek için eldiveni bağırsakların etrafına katlayın. Abdominal aortayı örten yağ dokusunu temizleyin.

Damar dallarına zarar vermemeye dikkat ederek, aortayı infrarenal bölgeden bifurkasyona kadar disseke edin. Gerekirse, aortayı disseke ettikten sonra aorta dallarını ligatize edin. İlk olarak, kan akışını durdurmak için aortanın infrarenal kısmına bir mikrocerrahi klempi uygulayın.

Ardından, aortanın çatallanma bölgesine yakın bir yere ikinci bir klempli yerleştirin. Kan akışı durdurulduğuna göre, aortadan kısa bir segment çıkarın. Daha sonra, buz üzerinde %0.9'luk salin içerisinde bekletilen donör aort greftini alın.

Uygun uzunluğa getirin ve aorttaki boşluğa yerleştirin. Kraniyal uç uca anastomozla başlayarak, 8-0 prolene dikişlerle sürekli sütür tekniği uygulayarak donör aortu alıcı aorta bağlayın. Distal uç uca anastomoz tamamlandığında, distal klempi dikkatlice açın.

Ardından, kraniyal klempi dikkatlice açın. Aortun distal ucunda görünür bir nabız olmalıdır. Şimdi bağırsakları tekrar abdomen içine yerleştirin ve abdomeni önceden ısıtılmış steril salin ile yıkayın.

Karın duvarının kas tabakasını 6-0 proline sütürler kullanarak sürekli dikişle kapatın. Ardından, sıçan hala anestezi altındayken cildi 5-0 proline sütürler ile sürekli dikişle kapatın. Kilogram başına 4-5 mg karprofeni deri altına enjekte edin.

Hayvanı kafesine geri koyun. Ağrı tedavisi için üç gün boyunca içme suyuna methimazole ekleyin. Transplantasyon sonrası.

120 gün sonraki histopatoloji sonuçları histoloji mikroskobumuzda gösterilecektir. Görüntüler, transplant vaskülopatisi gelişimini net bir şekilde ortaya koyacaktır. Oluşan lüminal daralma, bilgisayar animasyonu ile vurgulanacaktır.

Sıçanlarda ototopik aort transplantasyonunun nasıl gerçekleştirileceğini göstermiş olduk. Ayrıca histopatoloji kullanarak 120 gün sonra transplant vaskülopatisinin başarılı bir şekilde geliştiğini kanıtladık. Bu yöntem, ilaçların kronik allogreft vaskülopatisi üzerindeki başlangıç etkilerinin araştırılmasına olanak tanır.