Yetiştirilmesi için Optimum Protokol Fopius arisanus Tephritid Meyve bir parazitoit Sinekler

FOIA Aus, tropik bölgelerde ve özellikle burada, Hawaii'de ciddi ekonomik zararlılar olan meyve sineklerine saldırdığı için Hawaii'de önemli bir biyolojik kontrol ajanıdır. FOIA Aus'un avantajı, zararlı böceğin yumurta evresine saldırması ve böylece böceği erken bir aşamada kontrol altına almasıdır. Aşağıdaki kliplerde, FOIA Aus'u laboratuvar ortamında nasıl yetiştirdiğimizin yakın çekimlerini görebileceksiniz.

Bu programın sonunda, bu özel parazitoidin Fransız Polinezyası'ndaki başarılı bir salım programında nasıl kullanıldığına dair bazı tartışmalar göreceksiniz. Protokolümüze, bir konak meyve sineği yumurtasına osis yapmaya hazır olan yetişkin parazitlerle başlayacağız. İlk adım, meyve sineği yumurtalarını parazite sunmak için hazırlamaktır.

Ardından, meyve sineği larvalarının yumurtadan çıkmalarına, gelişmelerine ve pupa evresine geçmelerine izin verilir. Meyve sinekleri pupa evresine ulaştığında, parazitleri zenginleştirmek amacıyla boyutlarına göre ayıklanırlar. Son olarak, parazitler çıkar ve olgunlaşana kadar muhafaza edilirler.

Ardından buluşurlar ve yeni bir meyve grubuna yumurta bırakmaya tekrar hazır hale gelirler. Sinek yumurtaları. Bu, döngüyü tamamlar.

Kenar uzunlukları yaklaşık 10 santimetre olan agar blokları hazırlayarak meyve sineği yumurtaları için bir substrat hazırlayın. Agar, litre başına dokuz gram agar tozu konsantrasyonunda hazırlanır.

Düz bir yüzey kullanarak, kapları kenarlarına kadar sıvı auger ile doldurun ve en az 45 dakika boyunca katılaşmaya bırakın. Auger blokları katılaştıktan sonra, her bir auger bloğunun üst kısmını örtecek şekilde tek kat kağıt havlu yerleştirin. Yüzey nemi nedeniyle kağıt havlu, auger'a kolayca yapışacaktır.

İkinci kez yuvarlama işlemi yapılır. Meyve sineği yumurtaları, auger bloklarının doku kaplı yüzeylerine uygulanır. Süspansiyon halindeki 0,5 mililitre hacmindeki meyve sineği yumurtası, blok başına yaklaşık 6.000 yumurta sağlar.

Meyve sineği yumurtalarını doku yüzeyine eşit şekilde yaymak için suya batırılmış 2,5 santimetre genişliğinde bir fırça kullanılır. Meyve sineği yumurtaları, parazitlerin üzerine yerleşmesine izin vermek için parazit kafeslerinin alt teli altına yerleştirilir; telin alt kısmına vurmak, meyve sineği yumurtalarını engelleyebilecek ölü parazitleri uzaklaştırır. Sineği yumurtaları, parazitlerin gece boyunca üzerine yerleşmesini sağlar.

Meyve sineği yumurtalarının yüksek bir yüzdesinin parazitlenmesi için yaklaşık 21 saat yeterlidir. Daha uzun süreli maruziyet, süper parazitlenme riskini artırır. Parazitlere maruz kaldıktan sonra yumurtaların yetiştirilmesi için gereken temel bileşenler; meyve sineği larva diyeti, larva diyeti kapları ve pupasyon kaplarıdır.

Parazitlenmiş yumurtalar içeren üç ila üç buçuk adet hazırlanmış burgu bloğunu, birleme çeyrek litre meyve sineği larva diyetinin üzerine yerleştirin. Yumurtaların bulunduğu diyet kabını bir yükseltici üzerine, pupasyon kabını ise 1,5 cm derinliğindeki ince taneli vermikülit veya yıkanmış kum tabakasının üzerine yerleştirin.

Pupasyon kabının kenarlarını maskeleme bandı ile bantlayın. Larvaların dışarı çıkıp aşağıdaki vermikülite düşebilmeleri için diyet kabının üst kısmı ile pupasyon kabı kapağı arasında yeterli boşluk olduğundan emin olun. Pupasyon kaplarını bir hafta boyunca 27 °C sıcaklık ve %80 bağıl nem değerindeki bir odaya taşıyın.

Bir haftanın ardından, ilk dört gün boyunca kapların üzerini ağır bir bezle örtün. Pupasyon kaplarını açın ve larva besinini çıkarın. *Drosophila* türlerini, *Drosophila* türlerini yetiştirmek için konak meyve sineği olarak kullanıyoruz.

Asfa ve sitis cinslerindeki diğer türler de potansiyel konakçılardır. Vermikülit içerisinde pupa olmamış larvalar varsa, gece boyunca pupa olmalarına izin verin ve ardından eleyin. Vermikülitteki pupaları ayırmak için kaba bir elek ve geniş bir kapla başlayın.

Ardından, içinde opia içeren vermikülit kümelerini temizlemek için bir el eleği kullanın. Ais, parazitlenmemiş meyve sineklerinden kısmen ayrıştırılabilir. Önceki araştırmalara dayanarak, sadece çapı 1.65 ve 2.26 milimetre arasında olan aria'ları topluyoruz; daha küçük olanlar çoğunlukla yetersiz boyutlu parazitoidler içerir.

Daha büyük arealar çoğunlukla sinek içerir. Pupaların boyutlarına göre ayrılması için çeşitli yöntemler uygulanabilir. Toplanan parazitlenmiş arealar için özel boyutlu bir ayırıcı kullanılan mekanik bir yöntemi açıklayacağız.

Dişilerin yüzdesi boyutla birlikte artar; puy'lar mekanik boyut ayırıcısının üst kısmındaki huniye yerleştirilir. Bir titreşimli besleyici, onları 30 derecelik bir açıyla, hafifçe farklılaşan bir çift döner çubuk çiftinin üstüne taşır. Aria'lar, huniler aracılığıyla 10 ayrı kaba boşaltılan bir dizi yuvaya tek tek düşer.

1,65 mm ile 2,26 mm boyut aralığındaki pupaları, sineklerin çoğunun parazitlenmiş pupalardan çıkacağı zamana kadar yedi gün daha bir çıkış kafesine yerleştirin. Ardından, boş sinek arealarını hala canlı parazitoidler içerenlerle ayırmak için bir fan kullanın. Opia Aus kolonisini sürdürmek için, her bir kenarı yaklaşık 25 cm uzunluğunda olan, çıkarılabilir cam ön yüzeye sahip bir parazit tutma kafesi kullanın.

Kafesin üst kısmında ve iki yan tarafında bir milimetrekare boyutunda elek bulunmaktadır. Kafesin arkası, erişim için dokuz santimetrelik bir deliğe sahip kauçuk bir levha ile kaplıdır. Kafesin alt kısmında, iç tarafı bir ila iki milimetrekarelik bir elekle kaplanmış bir kesik yer almaktadır.

Meyveli iki adet auger bloğunun, parazit aşılama için sinek yumurtalarının yerleştirilmesine izin verecek kadar geniş olmalıdır. Tutma kafeslerinin cam ön yüzünün alt çeyreği boyunca, parazitlerin kafesin ön kısmında toplanmasını en aza indirmek için renkli bir bölüme sahip olması gerekir. Seçilen aryadan yaklaşık 11 gramı, çapı yaklaşık dokuz santimetre olan plastik kaplara yerleştirin.

Bu işlem, kafes başına yaklaşık 600 ila 700 parazit üretmelidir. Boyut seçimi sonucunda yaklaşık %60 dişi elde edilmelidir. Konteynırlara süzgeçli kapaklar takın. Kapaklar, çıkış sonrası meyve sineklerinin konteynırlardan ayrılmasına izin veren ancak geri kalan meyve sineklerini içeride tutan iki milimetrekarelik bir süzgeçle kaplanmalıdır.

Parazitleri 24 °C sıcaklıkta, yaklaşık %45 bağıl nemde, 12:12 fotoperiyotla ve iyi havalandırma altında tutun; kafeslerin üst kısmına haftada en az üç kez santrifüjle ayrıştırılmış bal şeritleri sürün. Alternatif olarak, mevcut bal kuruduğunda, santrifüjle ayrıştırılmış balı bir parmak ucu yardımıyla dar şeritler halinde uygulayın. Şeritlerin çok yoğun olması durumunda balın kafes içine damlayacağını unutmayın. Şeritlerin çok ince olması durumunda ise bal hızla kuruyacak ve sık uygulama gerektirecektir. Parazitlerin nem ihtiyacını karşılamak için kafeslerin üzerine 10 cm kare ve 4 cm derinliğinde agar blokları yerleştirin.

Bu bloklar haftada iki kez değiştirilmelidir. 2001 yılında, Doğu meyve sineğinin o dönemde tüm tropikal meyvelerde inanılmaz bir istilaya neden olması sebebiyle, durumu hafifletmeye yardımcı olmak için Fransız Polinezyası'na biyolojik kontroller getirip getiremeyeceğimizi görmek amacıyla küçük bir başlangıç hibesi aldık. Buradaki Hawaii laboratuvarından 10 sevkiyat gerçekleştirdik.

Bu sevkiyatların her biri genellikle yaklaşık yüz bin *Fopius arisanus* örneğinden oluşuyordu; aslında sayı bundan oldukça fazlaydı ancak biz, parasitoidin içinde bulunduğu oryantal meyve sineği pupalarını gönderiyorduk ve ardından onları çıkartıyorduk. Tahiti'de küçük bir laboratuvar kurduk ve bu örnekleri teslim alıp *Fopius arisanus*ların çıkışını sağlıyorduk. Böylece, yaklaşık bir yıllık bir süre zarfında bir milyona yakın *Fopius arisanus* saldık.

Genel olarak bu, Hawaii dışındaki en başarılı uygulamadır. FOIA Aus ilk kez Hawaii'de piyasaya sürüldüğünde, Pasifik genelindeki meyve sineklerinin biyolojik kontrolü konusunda en iyi örnek olmuştur. Son 10 yılda, dünya genelinde Bactrocera dorsalis kompleksinin muazzam bir yayılımı gerçekleşmiştir.

Bactrocera carbo Güney Amerika'ya, Surinam'a yayılmış durumda ve şu an Kuzey Brezilya'da bulunuyor. Ayrıca, tüm Afrika'ya yayılmış olan ve her türlü yıkıma neden olan Bactrocera inana adlı başka bir tür daha mevcut. Bunun yanı sıra, Bactrocera papaya'nın da yayılımı gerçekleşmiştir.

Dolayısıyla bu başarı, söz konusu FOIA Aus'ların Güney Amerika, Afrika ve Asya'nın diğer bölgelerinde kullanıma sunulması için yeni fırsatlar yaratmaktadır.