Gelişim Araştırmaları Pencereleme Tavuk Yumurta

Kramer Laboratuvarına hoş geldiniz. Ben Matt Korn, California Üniversitesi Irvine Nörobiyoloji ve Davranış bölümündenim. Bugün size boncuk yerleştirme, boya enjeksiyonu veya ovo içi inceleme dahil olmak üzere çeşitli manipülasyonlar için tavuk yumurtalarının nasıl hazırlandığını göstereceğim.

Öyleyse daha fazla vakit kaybetmeden başlayalım. Tamam, şimdi yumurtayı temizleyeceğiz. Bunun nedeni, inkübatöre girebilecek birçok farklı maddenin bulunabilmesidir.

Bunu bantla mühürleyeceğiz. Yumurtanın yerleştirileceği pencere bölgesine küçük parçaların girip, embriyoyu çıkarmak istediğimiz ana kadar ölme olasılığını artırmasını istemiyoruz. İnkübatörde gördüğünüz üzere, yumurtalar geniş kısımları yukarı bakacak şekilde duruyor.

Şimdi yapacağımız işlem, yumurtayı alıp yan tarafına çevirmek olacak. Bu iki amaca hizmet edecek: Birincisi, penceresi tam burada olacak ve ikincisi, herhangi bir manipülasyon yapabilmemiz için embriyonun üste çıkması gerekecek.

Şimdi, inkübatördeki raftan birkaç tanesini karton bir yumurta tutucuya yerleştireceğim. Bu parça aslında yumurtalar teslim edildiğinde kutunun içinde gelen parçadır. Bugün, bunu sadece yumurtaları tutmak için kullanacağız.

Şimdi düzenleme size kalmış. Ben bu şekilde yapmayı tercih ediyorum çünkü tüm yumurtalara her an erişebiliyorum ve hiçbirbirinin birbirine değmediğinden emin oluyorum. Eğer çatlamış ve gevşemiş bir yumurta bulup düşürürsem, hepsinin arasında bir miktar boşluk kalmış oluyor.

Şimdi gazlı bezimi alıp şu şekilde uygun bir yığın yapacağım ve bunu ikiye ayıracağım. Buradaki %70 alcohol kullanarak, alt kısmın nemlendiğini hissedene kadar dolduracağım. Çünkü tüm yumurtaları silmek için bu yığının tamamını kullanacağım.

Ardından üstten birkaç tane alacağım, sadece üst kısmı yapacağım ancak aslında burada yumurtanın neredeyse tamamını dolaşmış olacağım. Bu işlem tamamlandıktan sonra, alkol oldukça hızlı kurur ve ardından üzerine bant yapıştırabiliriz. Bant güzelce yapışacaktır ve bir seti bitirdiğimde, genellikle ilki kurumuş olur ve yumurta hazırlama sürecimizin bir sonraki adımına geçebiliriz.

Böylece, onu tekrar çöpe atıyoruz ve bir sonraki adıma geçmeye hazırız. Tamam, tüm yumurtalar alkolle silindikten sonra, yumurtanın büyük kısmına, yani tabanına bir tahliye deliği açabiliriz. Bu, biraz albümin çıkarabilmemizi sağlayacaktır; çünkü albümini çıkarmazsak embriyo uygun şekilde yerleşmez.

Herhangi bir manipülasyon yapamıyoruz. Bu yüzden sadece bir bıçak alıp bu plastik bandı keseceğim. Biraz elastik, ki bu harika.

Bu yöntem, delik istediğimizden biraz daha büyük olduğunda genişletme yapmamıza olanak tanımakla kalmaz, aynı zamanda yumurtanın tamamını kapladığımızda bu kısmı germemiz gerekecektir. Böylece pencerenin olacağı alan tamamen kapatılmış olur. Bu nedenle, parçayı bu şekilde kesip yaklaşık 1 mm genişliğinde bir şerit oluşturacağım.

Ardından buradan yaklaşık bir milimetrekare boyutunda bir bant parçası hazırlayabilirim. Sonra bunu, tarihin hemen sol üst kısmına yerleştireceğim. Tam oraya koyuyorum ve görebilirsiniz.

Çok güzel bir şekilde yapışıyor. Ardından, daha önce hazırladığım şeride geri dönebilirim ve bir milimetrelik bir bant parçası daha kesebilirim. Ve tekrar, bunu oradaki numaranın soluna, ki burası aslında yumurtanın üst kısmıdır, yerleştiriyorum.

Yan çevirdiğimize göre, artık sağda kalıyor. Ve buraya bir parça daha ekliyoruz. Ellerimi yıkadığım için şu an eldiven kullanmıyorum; çünkü eldiven kullanmak bu bandın eldivenlere yapışmasına neden olur.

Şu aşamada aktif maddeye başka herhangi bir şeyin bulaşması konusunda pek endişeli değilim. Bu yüzden, sivri uçlu bir makas alacağım. Bandı yapıştırdığım yerin merkezine girip, bant biraz yırtılana kadar saat yönünün tersine doğru döndüreceğim.

Orada küçük bir delik olduğunu göreceksiniz. Şırıngayı içeri yerleştirdiğimizde deliği yeterince büyüteceği için deliğin çok büyük olması gerekmez. Ancak bunu, doğrudan bir iğne ile girip yumurtayı onunla kırmaya çalışmamak için yapıyoruz; çünkü bu durum genellikle yumurtanın tüm yan tarafının parçalanmasına yol açar.

Bu durumda yumurtayı artık kullanamayız. Tamam, şimdi yumurtayı boşaltmaya geçiyorum. Yan tarafta güzelce açılmış küçük bir delik var; albuminü çekmek için bu 10 mililitrelik şırıngayı ve oldukça geniş kalibreli bir iğneyi kullanacağım.

Şimdi yaklaşık üç veya dört mililitre istiyorum; kesinlikle üçten fazla, ancak dört buçuk veya beşten çok fazla değil. Bu, şu an üstte duran embriyomuzun kabuktan biraz uzaklaşmasını sağlayacaktır. Ardından manipülasyonlarımızı gerçekleştirebileceğiz.

Böylece 45 derecelik bir açıyla girerek sarının altına ulaşıyorum. Ardından, altına sızmak için sağa doğru biraz çeviriyorum ve iğne ucunun yumurtanın tabanına değdiğini hissedebiliyorsunuz. Şimdi yaklaşık üç veya dört tane ekstre edeceğim ve oldukça rahat bir şekilde çıkıyor.

Albumininle birlikte atık kovasına geçiyorum ve şimdi diğer yumurtalarla devam edebilirim. Tamam, devam ediyorum. Burada, drenaj için açtığım deliğin istediğimden biraz daha büyük olduğunu göreceksiniz, ancak bunun bir sorun teşkil etmediği ortaya çıktı.

Endişe ettiğim nokta, iğneyi batırırken yumurtayı daha fazla çatlatmamak. Bu yüzden işleme devam edeceğim. Tamam, yumurtada zaten küçük bir çatlak olduğunu görebiliyorum.

Küçük çatlaklar sorun teşkil etmez, ancak çatlağın yumurtanın başka bir düzlemine uzandığında endişelenmeniz gerekir. Bu durumda, olduğu gibi, bunu delikten görebilirsiniz.

Neredeyse tepeye kadar uzanıyor. Aslında, penceremiz tam olarak burada yer alacak. Bu yüzden maalesef bu yumurtayı ayırıp atmak zorunda kalacağız.

Ve bunu atmakla ilgili özel bir durum yoktur. Belirli bir protokol yazmanıza veya benzeri bir şeye gerek yoktur. Doğrudan atık kovasına atabilirsiniz.

Bunların hayvan atığı olduğunu belirtmek için bu siyah çöp kovalarını kullanıyoruz, ancak bunun dışında her şey halledildi. Bir sonraki yumurtaya geçebiliriz. Tamam, artık tüm yumurtalarımızı süzdüğümüze göre, süzgeç deliğini kapatabiliriz.

Şimdi bu nokta oldukça önemli; çünkü eğer bunu yapmazsak, inkübatörün içindeki albümin kalıntılarının çok büyük bir kısmı buharlaşabilir. Kuruyan bir yumurta ise ölü bir yumurtadır. Bu nedenle, yaklaşık aynı boyutta bir bant parçası alıp deliğin üzerine yerleştireceğiz; böylece bir daha bu deliği açmakla uğraşmamız gerekmeyecek.

Bazı durumlarda, yumurta açıldıktan sonra daha fazla albümin boşaltmayı denemek isterseniz, bu delik, içine bir iğne sokabileceğiniz ve çok fazla albümin kaybetmeyeceğiniz mühürlü bir alan görevi görür. Tamam mı? Peki, şimdi yumurtaları uygun büyüklükte bir bant parçasıyla kapatacağız.

Bunu, bir balona iğne batırmadan önce üzerine bir parça bant yapıştırmaya benzetiyorum. İşin güzel yanı balonun patlamamasıdır ve bu durumda yumurtanın üzerine küçük bir bant yapıştırıyoruz. Böylece yumurta birden fazla yerden çatlamıyor ve ardından pencere kapatılabiliyor; pencere kapandığında, bant kullandığımız için güzel bir sızdırmazlık oluşuyor ve bu sayede herhangi bir buharlaşma konusunda endişelenmemize gerek kalmıyor.

Gördüğünüz gibi bandın boyutu, muhtemelen şu ana kadar kestiğim en büyük parça; ancak yine de onu hafifçe gereceğim ve gerçekten biraz çekeceğim, orada hafif bir gerginlik oluşturup yumurtanın üzerine yerleştireceğim. Ardından arkadan dolanıp, pencerenin geleceği yerin üzerinde hiçbir kırışıklık kalmayacak şekilde bandı yumurtanın üzerine çok dikkatli bir şekilde gereceğim. Bandı biraz yeniden konumlandırabilirsiniz.

Endişe etmenizi gerektirecek kadar çok yapışmıyor. Bir kez yapıştığında, yapışmış olur. Ve burada, pencereyi keseceğim genel alanı görebilirsiniz.

Tamam, tüm yumurtaları bantladığımıza göre, üst kısımdan bir pencere açma işlemine geçebiliriz. Bu, en zor kısım olabilir ve genellikle yumurtalarınızın çoğunluğunu burada kaybedersiniz. Bu yüzden, makaslarımı alkollü bir gazlı bezle güzelce silecek ve ardından kurulayacağım.

Alkol neredeyse kendiliğinden kurur, ancak alkolün doğrudan yumurtanın içine girmesini istemezsiniz. Bu nedenle, bandın olduğu yerin tam ortasından gireceğim ve yine, hafif bir çatlama sesi duyana kadar saat yönünde ve saat yönünün tersine hareket ettireceğim. Böylece bıçağın içeri girdiğini anlamış olacağım.

Ardından, makaslarımı yumurtanın yüzeyine neredeyse paralel olacak şekilde dışarıya doğru hareket ettirmek istiyorum. Makasın tamamı içeri girene kadar küçük kesikler yapacağım. Yaklaşık bir yarım daire oluşturduğumda diğer yöne doğru geri döneceğim; tam bir daire tamamlamak istemiyorum çünkü bir pencere açmak istiyorum, ancak sonrasında yumurtayı açabilirim.

Şu anda yaklaşık olarak beklediğim yaşta görünüyorlar, çok fazla kan damarı yok ancak embriyonun bulunduğu bölgenin çevresinde, özellikle kanamanın başladığı ve kalp atışının durduğu delion bölgesinden kaynaklanan bir miktar kan mevcut. Bu yüzden orayı kapatacağım, öylece üstte kalmasını sağlayacağım ve tekrar çevresine gelip pencereleri kapatacağım. Ve tekrar, sadece yüzeye paralel bir şekilde ve diğer yöne doğru.

Ve tamam, burada birkaç kabarcık var ve embriyonun kenara kaydığı görülüyor. Şu an yapabileceğimiz iki şey var. Eğer yeterince yumurtamız varsa ve her birini kullanma konusunda endişe duymuyorsak, bunu doğrudan atabiliriz.

Ya da yapabileceğimiz diğer şey, pencereyi kapatıp embriyonun tekrar istediğimiz üst kısma doğru çıkmasını sağlayacak şekilde ayarlamak olabilir. Manipülasyonlara başladığımızda, embriyo istediğimiz konumda olabilir. Eğer değilse, o sırada imha edebiliriz.

Burada yaptığım şey, onu sadece belirli bir açıyla yerleştirmek oldu. Biraz albümin akıntısı olacaktır ancak bu, embriyonun olması gereken yere dönmesine yardımcı olacaktır. Tamam, artık tüm bu pencerelere sahip olduğumuza göre, herhangi bir manipülasyon yapmadan önce kapalı olduklarından emin olmamız ve onları kapatmamız gerekiyor.

Ardından yumurtayı yeniden mühürleyebiliriz. Ancak pencere açık kalmışsa, bazen sarısı dışarı kayabilir. Bir odadan diğerine yürürken yumurtanın hafifçe eğildiğini fark ederseniz, içeriğin tamamının dışarı dökülmesini istemezsiniz.

Yani tek yaptığım, plastik banttan yaklaşık üç, iki veya üç milimetre genişliğinde ve uzunluğunda bir parça daha kesmek. Bunu tam orta kısma yerleştirmeyi tercih ediyorum. Eğer yumurtanın önünde aşağıya doğru çekebilirsem, bu durum bandın sıkılaşmasını sağlıyor.

Ve pencerenin, diğer bandın olduğu yere, pencereyi kestiğimiz noktaya nasıl oturduğunu görebilirsiniz; bu, şimdilik oldukça sızdırmaz hale getiriyor. Yani, birazdan bazı manipülasyonlar yapacağız, bu yüzden tamamen hava sızdırmaz olmasına gerek yok. Yumurtalarınızı bu şekilde hazırlayıp pencere açıyorsunuz.

Deneylerinizde başarılar dileriz.