Uzaktan Yüksek throughput fenotipleme için Fare Göz Enükleasyon

Bu video, fare gözünü ve nükleasyonu veya göz küresinin göz çukurundan çıkarılmasını gösterecektir. Göz küresi, alt kapak kenarı ile sınırlanmıştır. Burası medial veya nazal kantustur.

Arkada temporal veya lateral kantus yer alır. Üstte üst göz kapağı sınırı bulunmaktadır. Burada bir cerrahi örnek görülmektedir.

İğne şeffaf korneayı göstermektedir. Merceğin iris üzerinden birazcık dışarı çıktığını görebiliyoruz. İris, merceği örten kahverengi bölgedir.

En önemli cerrahi referans noktası, hemen arkasından ponksiyon yapılacak olan bu beyaz çizgi veya limbustur. Globun arka yarısı limbusun arkasındadır ve bir kas insersiyonunu işaret ediyoruz. Burada kasa karşı globun üzerinde yatan kası ve ardından orbite dolan ve Arian bezini içeren bağ dokusunu görebilirsiniz.

Ve son olarak, bu, künt diseksiyon sonucu elde edilen optik sinirin beyaz uzun şerididir. Keskin bir uçla özelleştirilmiş, eğri pansuman pensi kullanarak göz kapaklarını birbirinden ayırarak başlayın. Bu işlem, gözün dışarıya ve uzağa doğru itilmesini sağlar.

Penseti dikkatlice orbite ve göz küresinin arkasına yerleştirin, göz küresini sıkmadan arkasından hafifçe sıkıştırın ve öne doğru çekin. Göz küresini değil, bağ dokusunu kavramış olmanız gerekir. Göz küresini yana doğru çevirdiğinizde, beyaz optik sinirle birlikte orbital dokuyu görebilirsiniz.

Bu, canthus'tan girip forsepi göz küresinin arkasına ittiğinizi, bağ dokusunu kavradığınızı ve göz küresine baskı uygulamadan ileriye doğru çektiğinizi tekrar göstermek için yapılan ikinci bir diseksiyondur. Tekrar görebileceğiniz üzere, bağ dokusu optik sinirin uzun beyaz şeridinde yer almaktadır. Delici bir yara oluşturmak için, göz küresini bir kas insersiyosundan tutun ve gözü stabilize etmek için tuttuğunuz yerin hemen yanındaki limbus'un arkasından bir iğne yerleştirin.

Bu işlem, tespit edicinin göze girmesine olanak tanıyacaktır. Delme işlemini gözü tuttuğunuz yerden uzağa yaparsanız, göz küresi oldukça stabil olmayacak ve gözü sıkıştırmadığınız veya aşırı basınç uygulamadığınız sürece o yarayı oluşturmak zor olacaktır. Ayrıca, göz küresinin hemen arkasındaki tüm bağ dokusunu da kavrayabilirsiniz.

Bazı tespit ediciler delinme yarası gerektirmez. Genel olarak, gözün tamamen daldığından emin olmak için gözü, en az 3 cc tespit edici içeren beş cc'lik bir sintilasyon tüpüne koyuyoruz. Perfüzyonla tespit edilmiş hayvanlar için keskin bir diseksiyon gereklidir.

Kavisli calibri pens ve kavisli wescott makası kullanıyoruz. Alt göz kapağını calibri pens ile kavrayın. Makası orbital kemiğe yaslayarak yerleştirin ve bağ dokusunu kesmeye başlayın.

Göz küresinden uzaklaşan eğriyi kullanır ve boyutlandırmadan kaçınırız. Alt göz kapağı kenarı boyunca, bir kantalustan diğerine kadar gözün herhangi bir bölümü uygun olacaktır. Belirli bir noktada, bağ dokusunun çoğu temizlenmiş olacak ve makasınızı bulbun arkasına kaydırıp onu çekerek uzaklaştırabileceksiniz.

İşte bir örnek daha; makaslar orbita yerleştirilir, ancak göz küresi yerine orbital kemiğe doğru tutularak bağ dokusu kesilir. Bu işlem, bir sepet içindeki basketbol topu gibi duran göz küresini serbest bırakmaya başlayacaktır. Göz kapaklarını geri çekmek için pens kullanın ve göz küresinin çevresinde nazik, kısa kesiler yapın.

Burada, bağ dokusunu veya bir kas yapışma noktasını Collibra ile kavrayarak göz küresinin orbital bağ dokusundan tamamen kesilip ayrılmasını tamamlıyoruz. Göz küreleri uygun şekilde fikse edildikten sonra, eğer taşınmaları gerekiyorsa, saklama tüpünün etrafına biraz parafilm sarıyoruz.

Paketleme, üniversitenizin ve hükümetin yönetmeliklerine uygun olmalıdır. Genellikle bunları, herhangi bir sıvıyı tutması için bir miktar pamuk içeren bir kaba yerleştiriyoruz; bu kabın çok sıkı bir şekilde kapatılması gerekir. Bu nakliye kabı daha sonra bir balonlu naylon torbaya yerleştirilir.

Bu, gerekli belgelerle birlikte sıvı laboratuvar sevkiyat paketine yerleştirilir.