Distraksiyon Osteogenezi, ya da Eleştirel Ölçekli Kusurların Şifa, Intramembranous kemikleşme değerlendirilmesi için Kademe Stabilize Kırıklar oluşturma

Bu prosedürün genel amacı, stabilize edilmiş kırık iyileşmesi, distraksiyon, osteogenez ve segmental boşluk defektinin iyileşmesinin analizi için kullanılabilecek eksternal fikse edilmiş bir tibia oluşturmaktır. İlk olarak, steril entomoloji iğneleri tibianın proksimal ve distal kısımlarına yerleştirilerek fiksatör halkaları konumlandırılır ve sabitlenir, ardından halkalar steril entomoloji iğnelerine güvenli bir şekilde bağlanır. Daha sonra, tibianın orta diyafizinde bir kırık veya osteotomi oluşturulur. Prosedürün son adımında, proksimal ve distal halkaları tam olarak stabilize etmek için üçüncü dişli çubuk yerleştirilir.

Nihayetinde, röntgen, histolojik ve moleküler analizler yoluyla kırık iyileşmesi, distraksiyon, osteogenez ve kemik greftleme mekanizmalarını gösteren sonuçlar elde edilebilir. Prosedürü uygulamak olanlar; California Üniversitesi San Francisco, San Francisco Genel Hastanesi Ortopedik Travma Enstitüleri iskelet rejenerasyonu laboratuvarından kıdemli araştırmacılar Dr. Diane, Y Yuu ve doktora sonrası araştırmacı Dr. Chelsea Baney'dir. Özel olarak tasarlanmış eksternal fiksayon cihazını monte ederek başlayın.

Fiksasyon çerçeveleri, üç paslanmaz çelik dişli çubuk, sekiz altıgen somun ve 17 uygun civata ile stabilize edilmiş iki alüminyum halkadan oluşur. Kırık başına iki alüminyum halka gereklidir; proksimal halkayı oluşturmak için dört altıgen somunu ve uygun civataları ilgili deliklere gevşek şekilde vidalayın. Distal halkayı oluşturmak için yine dört somun ve civatayı tam sıkmadan vidalayın, ardından fiksatörü stabilize edecek uzun dişli çubuklardan ikisini distal halkadaki saat 12 ve 6 konumlarında bulunan deliklere yerleştirin ve iki altıgen somunla sabitleyin.

İstenilen yaş ve cinsle ilgili fareyi, ketamin ve ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile anestezi edin. Tam anestezinin gerçekleştiğini ayak parmağı sıkıştırma testi ile doğrulayın. Tüyleri temizleyip antiseptik ile yıkadıktan sonra göz kaydırıcı uygulayın ve ardından prosedürün geri kalanı boyunca fareyi ısıtma pedine yerleştirin.

Proksimal halkayı, somunlar distal yöne bakacak şekilde bacağa yerleştirin ve halkayı diz ekleminin üzerine kaydırın. Pinleri bir matkaba takıp kemiğin içinden geçirerek, sol tibianın proksimal ve distal metafizlerini dört adet 0,25 milimetre steril böcek pini kullanarak transfikse edin. Pinleri tibianın uzun eksenine dik ve birbirine 90 derece olacak şekilde yönlendirin; proksimal ve distal pinler arasında en az 10 milimetre mesafe bırakın.

Tibia'nın alüminyum halkanın içinde merkezi konumda kaldığından emin olarak pinleri proksimal halkaya sabitleyin. İkinci halkayı distal pinlerin altına yerleştirin. İki çubuğu proksimal halkaya sabitleyin ve ardından altıgen somunları kullanarak pinleri halkaya sabitleyin.

Daha önce olduğu gibi, uygun bir cihazla üç nokta eğme yöntemiyle transvers kırık oluşturun. Tibianın posterolateral yüzeyini blokların üzerine yerleştirin. Ağırlığı düşme kolu boyunca önceden belirlenmiş bir yüksekliğe kaldırın ve ağırlığı, tibianın anterolateral kısmına temas edecek şekilde bırakın.

Küt kırığı oluşturmak için, kırığı röntgen ile doğrulayın. Ardından, distal uçtan başlayarak son paslanmaz çelik dişli çubuğu halkalara takın. Çubuğu yerleştirin ve çubuğu sabitlemek için distal halkaya bir somun vidalayın.

Ardından, proksimal halka üstte kalacak şekilde çubuğa başka bir somun takın. İki halkanın eşit mesafelerde tutulduğundan ve pimleri zorlamadığından emin olun. Proksimal halkayı üçüncü bir somun kullanarak çubuklara sabitleyin.

Anesteziyi geri çevirmek için aamaz all ve analjezi için buprenorfin uygulayın; hayvanlar yanıt verebilir ve hareket edebilir hale gelene kadar izleyin. Ardından, analjezi için buprenorfinle deri altı enjeksiyonları yapın ve standart distraksiyon osteogenezi için dört saat sonra tekrar uygulayın. Bu modeli kullanarak, tespit cihazlarını tibia üzerine yerleştirin, kırık oluşturun ve beş günlük bir latenis süresi boyunca onları kendi hallerine bırakın.

Beş gün sonra, sabitleyici çubuklar üzerindeki somunları çevirerek distraksiyon osteogenezi gerçekleştirin. Yedi gün boyunca her gün çeyrek tur çevirin. Hayvanlar, ameliyat sonrası ek analjezik ihtiyacı açısından yakından takip edilir.

Kemik köprülemesi 10. güne kadar ve tam konsolidasyon distraksiyonun tamamlanmasından sonraki 27. güne kadar gözlemlenir. Anestezi uygulandıktan, tüyler epilasyon yöntemiyle temizlendikten ve cilt antiseptik ile temizlendikten sonra, daha önce tarif edildiği şekilde fiksatörleri uygulayın. Medial tibia'yı görüntülemek için fareyi diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin ve ardından bir bistüri üzerindeki 10 numaralı bıçakla beş ila yedi milimetrelik bir insizyon yapın.

Tibianın orta diyafizini açığa çıkarmak için kası nazikçe kesin ve ayırın. Bir makasın ucunu kullanarak, kemiği büyük bir mekanik kuvvetle yerinden oynatmamaya dikkat ederek tibianın üç milimetrelik bir segmentini yavaşça kesin. Ardından, kalan kemik fragmanlarını pensetle temizleyin.

Cerrahi bölge kemik fragmanları açısından kontrol edildikten sonra, tibianın künt uçlarının etrafındaki kasları yeniden yerleştirin. Cilt üzerindeki insizyonu 6.0 polimonofilament ile iki veya üç sütürle kapatın ve ardından eksternal fiksatörü stabilize etmek için üçüncü çubuğu yerleştirin. Daha önce gösterildiği gibi, anestezinin etkisini tersine çevirin, analjezikler uygulayın ve hayvanları ağrı açısından izlemeye devam edin.

Daha önce açıklandığı üzere, uygun şekilde uygulandığında eksternal fiksatörler, kapalı tibial kırıklarda yüksek derecede rijit stabilite ve mükemmel redüksiyon sağlar; bu durum, kırık sonrası çekilen ve ok ucuyla gösterilen iyi hizalanmış kemik segmentlerinin bulunduğu bu radyografide görülmektedir. Bu yöntemle stabilize edilen kırıklar, burada trikrom boyama ile gösterildiği gibi, öncelikle intramembranöz ossifikasyon yoluyla iyileşir; stabilize edilen kırık, kırık bölgesinde bir miktar yeni kemik oluşumu göstermektedir. Buna karşılık, kırık stabilize edilmezse, kırık boşluğunda geniş bir kartilaj kallusu oluşur ve bu yapı, gelişimi tamamlandıktan sonra endokondral ossifikasyon süreci yoluyla kemikleştirilir. Bu teknik, ortopedi alanındaki araştırmacıların farelerde stabil kırık iyileşme mekanizmalarını keşfetmelerinin önünü açmıştır.