İzole Kan-perfüze Sıçan Akciğer Hazırlık Tek Mikrodamar Geçirgenliği miktarının

Bu prosedürün genel amacı, floresan bazlı bir yöntem kullanarak izole edilmiş sıçan akciğerlerinin tek mikro damarlarındaki geçirgenliği ölçmektir. Bu, önce sıçan akciğerlerini izole ederek ve bunları otolog kanla perfüze ederek gerçekleştirilir. Prosedürün ikinci adımı, flora dört etiketli dekstrini infüze etmek için akciğerin küçük bir bölgesine bir sol atriyal mikrokateter yerleştirmektir.

Daha sonra etiketli dekstrin infüze edilirken, akciğer mikro damarlarının görüntüleri toplanır. Son adım, yazılım kullanarak görüntülerden tek mikro damarların geçirgenliğini ölçmektir. Sonuç olarak, sonuçlar, LPS tedavisi sonrası gibi farklı koşullar altında akciğer mikro damarlarının geçirgenlik derecesini gösterebilir.

Bu prosedürü göstermek, laboratuvarımdan doktora sonrası bir araştırmacı olan Dr.Kava Kasami olacak Onaylanmış bir cerrahi anestezi düzleminde bir erkek sıçan üzerinde trakeotomi yaparak başlayın. Bir PE 90 trakeal kanül kullanın ve dikişlerle sabitleyin. Daha sonra, 21 gauge kelebek iğnesi kullanarak kalbe 100 ila 200 ünite heparin verin.

Bir dakika bekleyin ve ardından kanı boşaltın. Kanı toplayın ve tuzlu su ile bir kenara koyun. Dört santimetre uzunluğunda ve bir ucunda alevli üç milimetre tigon borusundan yapılmış iki kanülü doldurun.

Şimdi bir torakotomi yapın. Sağ ventriküle kanül için yeterince büyük bir kesi yapın ve bir kanülün alevli ininde pulmoner artere doğru kaydırın. Kanülü dikişlerle sabitleyin.

Diğer kanülü sol ventrikülün tepesine sol atriyuma doğru yerleştirmek için aynı tekniği kullanın. İki milimetre genişliğinde göbek bandı ile sabitleyin. Şimdi engelleyici bağ dokularını çıkarın ve kanüllerle birlikte uzun ve kalbi çıkarın.

Bunları, akciğerin diyafragma yüzeyi yukarı bakacak ve üç kanül aynı hizada olacak şekilde bir Petri kabına aktarın. Diseke edilmiş hazırlığı, giriş ve çıkış tüpleri olarak işlev gören basınç transdüserlerine bağlı 18 numaralı tigon borusu ile donatılmış ayarlanabilir bir aşamaya taşıyın. Şimdi kan alımını eşit hacimde% 5 albümin çözeltisi ile karıştırın.

Bu karışımı yükleme haznesine ekleyin. Pompayı dakikada 14 mililitre ile çalıştırın. Hortumda hava kabarcığı olmadığından emin olun.

Hazırlık aşamasında. Pulmoner arteri akciğer giriş tüpüne ve sol atriyal kanülü çıkış tüpüne takın. Boruda hava olmadığını iki kez kontrol edin ve ayrıca şantın açık olduğunu kontrol edin.

Trakeal kanülü üçüncü bir basınç dönüştürücüsüne bağlayın. Trakeal kanül yoluyla akciğerleri% 30 oksijen ile şişirin. Akciğerleri beş santimetre su basıncında tutun.

Şimdi şöntü sıkıştırın ve pompayı dakikada 14 mililitre ile çalıştırın. Perfüzyon sırasında akciğer perfüzyonuna başlamak için, pompayı pulmoner basıncı yaklaşık 10 santimetre suda tutacak ve sol atriyal basıncı üç santimetre suda tutacak şekilde ayarlayın. Kanla infüze edilmiş akciğeri hazırlamakla başlayın.

İlk olarak, 30 santimetre uzunluğundaki PE 90 tüpüne yerleştirilmiş 40 santimetre uzunluğundaki PE 10 tüpünden bir infüzyon kateteri oluşturun. PE 10 borusunun diğer ucunu bir cc'lik şırıngaya bağlı 30 gauge bir iğneye takın. Akciğere bağlı borunun ucunu preparatın üzerine getirin ve infüzyon kateterini ona takın.

İnfüzyon kateterini sol atriyuma ve ardından dirençle karşılaşana kadar akciğere yönlendirin. Aşırı kuvvet akciğere zarar verir. Mikrokateterin akciğere vereceği herhangi bir hasar protokolün başarısını azaltacağından, mikrokateterin uygun şekilde kesilmesi kritik öneme sahiptir.

Ardından, şırıngayı zil sesleriyle doldurun ve bir pompaya takın. Çözeltiyi dakikada 10 mikrolitre hızında yavaşça demleyin. Yavaş yavaş, infüzyon bölgesi hariç, akciğer yüzeyini plastikte hızlı bir şekilde nemli tutmak için infüzyon bölgesi akciğerin geri kalanına kıyasla soluklaşacaktır.

Şimdi akciğeri görselleştirmek için, 22 milimetrelik bir kapak kızağına bir O-ring takarak bir görüntüleme penceresi oluşturun. Musluk gresi kullanarak, O-ringi bir test tüpü tutucusuna sabitleyin. Ardından pencereyi infüzyon bölgesinin üzerine yerleştirin.

Kapak kaymasının üzerinde 20 x'lik bir objektifi sallayarak ve akciğere odaklanarak kurulumu tamamlayın. Görsel bir bozulma beklenmez. Şimdi akciğeri tercih edilen bir çözelti ile demleyin.

Bu örnekte, salini takiben, bir mililitre ZI konjuge dekstrin, 60 dakika boyunca şırınga pompası aracılığıyla akciğere infüze edilir. Görüntüleme yazılımını kullanarak, bir saatlik infüzyon boyunca dakikada bir görüntü kaydedin ve sonraki yıkama sırasında kayda devam edin Adım 10 dakika daha Fitz dekstrin infüze edildikten sonra, akciğer zil solüsyonunu aynı akış hızında en az 10 dakika daha infüze ederek yıkayın. Sonra. Elde edilen görüntüler analiz edilirken, uyum infüzyonu sırasında ilgilenilen bölgedeki maksimum floresan yoğunluğu puanlanır.

Ardından, 10 dakikalık yıkamadan sonra kalan floresanın maksimum floresan yoğunluğunu puanlayın. Vasküler geçirgenlikteki değişiklikler, bakteriyel lipopolisakkarit ile tedaviyi takiben fitzy dekstrin infüzyonu kullanılarak araştırıldı, çünkü bu yaygın olarak kullanılan bir LI modelidir. Ayrıca, ringer infüzyonu ile karşılaştırıldığında, LPS infüzyonu geçirgenlik indeksinde önemli bir azalmaya neden oldu ve bu da görüntü alanındaki tüm damarlarda geçirgenlikte küresel bir artış olduğunu düşündürdü.

Ayrıca, ringer infüzyonu ile karşılaştırıldığında, LPS infüzyonu geçirgenlik indeksinde önemli bir azalmaya neden oldu ve bu da görüntü alanındaki tüm damarlarda geçirgenlikte küresel bir artış olduğunu düşündürdü. Bu videoyu izledikten sonra, izole kuş profili akciğerlerinin nasıl hazırlanacağını, sol kuyruk mikrokateterinin nasıl yerleştirileceğini ve mikroda geçirgenliği nasıl tanımlayacağını iyi anlamalıdır.