Oyalama Osteogenesis fonksiyonel rejenere uyluk için önde gelen bir fare modeli için verimli ve tekrarlanabilir bir protokol

Bu protokolün genel amacı, fonksiyonel kemik rejenerasyonunu değerlendirmek için bir sıçan modelinde femoral distraksiyon osteogenezini tekrarlanabilir ve verimli bir şekilde indüklemektir. Bu yöntem, osteogenez tıbbı alanında konsolidasyon süresinin belirlenmesi ve kısaltılması veya kemik onarım mekanizmasının tanımlanması ile ilgili temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, eksternal fiksatörü kimin yaptığı ve ameliyatı kimin yaptığı konusunda rehberlik etmek, optimal kemik rejenerasyonu için stabil bir ortam sağlamak için hayati önem taşır.

Bu tekniğin etkileri, kemik tümörü eksizyon ameliyatından sonra ortaya çıkan tüm terapötik üst ve alt ekstremite uzatmalarına veya kemik defektine kadar uzanır. Prosedürün gösterimi, laboratuvarımdan bir eczacılık öğretim görevlisi olan Edouard Lamy tarafından yapıldı. Anestezi uygulanmış 12 haftalık bir erkek Sprague Dawley sıçanını sol lateral pozisyona yerleştirerek ve sağ arka bacaktan kılları alarak başlayın.

Göz merhemi uyguladıktan sonra, cerrahi bölgeyi Povidon-iyot çözeltisi ile dezenfekte edin ve hayvanı sırtüstü pozisyona getirin. Eksternal fiksatör mediolateral eksen boyunca konumlandırılmışken, sagital düzlemin medial çizgisi boyunca dizde bir nokta ve kalçada ikinci bir nokta yapmak için bir işaretleyici kullanın. İki noktayı birleştirin ve çizgi boyunca bir cilt kesisi yapmak için bir neşter kullanın, femur tamamen açığa çıkana kadar pazı femoris ve vastus lateralis arasında kesin.

Periosteumu kaldırın ve yumuşak dokuyu kemikten ayırmak için bir rougine kullanın. Pimleri eksternal fiksatörün en proksimal ve distal deliklerine yerleştirin. Her iki pim de sabitlenebiliyorsa, kasları açmak için iki Senn ekartörü kullanın ve proksimal ve distal deliklerden başlayarak ve ortadaki iki delikle bitirerek uyluk kemiğinin ortasındaki bir delme kılavuzunun kelepçesini sıkın, dört kılavuz delik oluşturmak için kemikten metal bir 0,6 milimetre matkap ucu geçirin.

0,8 milimetre yarım dişli bir pim kullanarak, uyluk kemiğine dik kalmasına dikkat ederek dört ön deliği büyütmek için pimi ileri geri hareket ettirin. Pimleri implante etmek için, her 1 milimetrelik yarım dişli pimin başını kavramak için bir iğne tutucu kullanın ve kılavuz deliklerini büyütmek için pimleri ayrı ayrı batırın. Pimlerin 1 milimetreden fazla çıkıntı yapmadan her iki kortekse de nüfuz ettiğini doğrulamak için bir Senn ekartörü kullanın.

Pimler yerindeyken, harici fiksatörü yarım dişli pimlere bağlayın, kolay dikiş ve iyi sertlik sağlamak için ofsetin yaklaşık 6 milimetre olduğundan emin olun. Ardından, harici fiksatör pimlere kilitlenecek şekilde dört kilitleme vidasını sabitleyin. Bir Piezotome kullanarak, iki merkezi pim arasında bir osteotomi yapın.

Daha sonra yarayı kapatmak için bir Mayo-Hegar İğne Tutucu, emilebilir bir 5-0 dikiş ipliği ve sürekli bir dikiş kullanın. Ameliyattan hemen sonra, pimlerin derinliğini ve osteotomize ekstremitelerin uzun eksen boyunca hizalanmasını kontrol etmek için hayvanın röntgenini çekin. Ardından, farenin izleme ile tamamen iyileşmesine izin verin.

Bir hafta sonra, pimlerin konumunu ve kemik segmentlerinin hizalamasını yeniden kontrol etmek için uzuvun röntgenini çekin. Dikkat dağıtmayı gerçekleştirmek için, kare somunu 12 gün boyunca her 10 saatte bir saat yönünde yarım tur manuel olarak çevirin. Pimlerin konumunu ve kemik segmentlerinin hizalanmasını izlemek için dikkat dağıtma işleminin yarısında ve sonunda uzuvun röntgenini çekin.

Dikkat dağınıklığının sonunda, uzuvları haftada bir röntgenleyin ve 64. günde eksternal fiksatörü çıkarın. 66. günde, kalçanın üstünden dizin önüne kadar ameliyat izinden bir cilt kesisi yapmak için bir neşter kullanın. Femur tamamen açığa çıkana kadar pazı femoris ve vastus lateralis arasında kesin ve kasın kemikten mümkün olduğunca bağlantısını kesin.

Dizin tüm bağlarını kesin, eklemleri sökün ve kalçanın eklem kapsülünü kesin. Tüm yumuşak dokuyu çıkarmak için bir neşter kullanarak, pimleri çıkarmadan kemiği iyice temizleyin. Kontralateral uyluk kemiği temizlendiğinde, her iki uyluk kemiğini de röntgenleyin.

Mikro bilgisayarlı tomografi tarama analizi için pimleri çıkarın ve femurları eksi 20 santigrat derecede saklayın. Bu temsili deneyde, ameliyattan hemen sonra konsolidasyonun sonuna kadar röntgen görüntülemesi, femur pimleri içindeki yarım dişli pimlerin prosedür boyunca paralel kaldığını, iyi korunduğunu ve gevşetilmediğini ortaya çıkardı, bu da stabil bir ankrajın göstergesidir. Ayrıca, osteotomize ekstremiteler, distraksiyon osteogenezi süreci sırasında kemiğin uzunlamasına ekseni boyunca açıkça iyi hizalanmıştı.

Gecikme süresinin sonunda, osteotomize ekstremitelerin yakınında kalsifiye alan görülmedi. Dikkat dağıtma döneminin sonunda, önceden var olan kortekslere yakın birkaç kalsifiye alan görüldü. Konsolidasyondan 28 gün sonra, osteotomize ekstremiteler arasındaki boşluğun kalsifiye olmayan bölgesi daha küçüktü ve pimlerle boşluk seviyesinin yakınında periosteal bir kallus gözlenebildi.

47 günlük konsolidasyondan sonra, yenilenen kallus tamamen köprülendi. Eksternal fiksatörün çıkarılmasından ve iki günlük fizyolojik ağırlık taşımadan sonra, hayvanlar fizyolojik bir yürüyüş sergiledi ve herhangi bir kırık belirtisi gözlenmedi. Rejenere edici kallusun seri longitudinal kesitlerinin 3D mikro bilgisayarlı tomografi analizi, kalsifiye köprülemenin her zaman mevcut olduğunu ve rejenere edici kallusun çevresinde sürekli bir dış kortikal gözlendiğini gösterdi.

49 günlük konsolidasyondan sonra, rejenere kallusun merkezinde daha az mineralize bir bölgenin persistine rağmen kırık gözlenmedi. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu cerrahi teknik uygun şekilde uygulanırsa 45 dakikada tamamlanabilir. Bu prosedürü denerken, ameliyat sırasında steril bir ortam sağlamayı ve ameliyattan sonra hayvanı kapsamlı bir şekilde izlemeyi unutmamak önemlidir.

Bu teknik, geliştirildikten sonra, tıp alanındaki araştırmacıların, özellikle klinik uygulamada konsolidasyon süresini kısaltmak için distraksiyon osteogenezisi tekniğini geliştirmesinin önünü açmıştır. Bu prosedürü takiben, kemiğin konsolidasyonu iyileştirilebilir mi, gibi ek soruları yanıtlamak için büyüme faktörleri veya yapı malzemeleri eklemek gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. Bu videoyu izledikten sonra, pimler arasında paralelliği sağlamak için bu teknikleri kılavuz olarak kullanarak bir sıçan modelinde femur uzatmanın nasıl yapıldığını iyi anlamış olmalısınız.