18 Temmuz 2025
Bu makale, araştırmacıların, uzun süreli üreter tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli yapısal ve fonksiyonel sonuçların analizine izin veren standart bir model kullanarak farelerde geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığı gerçekleştirmelerini sağlamak için ayrıntılı talimatlar sağlar.
Laboratuvarım, böbrek hasarından sonra uzun vadeli sonuçları iyileştirmek için mekanizmalar ve tedavi üzerinde çalışıyor ve bu protokolün özel odak noktası, idrar tıkanıklığının tersine çevrilmesinden sonra uzun vadeli sonuçları incelemek için bir araç geliştirmektir. Böbrekte idrar tıkanıklığını tersine çevirmenin uzun vadeli fonksiyonel ve yapısal sonuçlarını değerlendirmemize olanak tanıyan, tek taraflı geri dönüşümlü üreter tıkanıklığının bir fare modelini geliştirdik. Diğer yöntemler, çoğu laboratuvarın erişemediği birden fazla ameliyat veya mikrocerrahi uzmanlığı gerektirir. Ayrıca bu tek taraflı obstrüksiyon olduğu için diğer yöntemlerin çoğu, split böbrek fonksiyon testleri yapılmadan iyileşmenin fonksiyonel olarak değerlendirilmesine izin vermez. Gerçekten sadece iki tane var. Birincisi, her deneyde vasküler klempin proksimal üreter üzerinde aynı pozisyonda tutarlı bir şekilde yerleştirilmesi, ikincisi ise vasküler klempin birkaç gün sonra üreter veya böbreğe zarar vermeden çıkarılmasıdır.
[Rachel] Başlamak için, anestezi uygulanmış bir farenin cerrahi tarafını antiseptiklerle hazırlayın. Makas ve forseps kullanarak cilt ve deri altı katmanları boyunca orta hat boyunca 1,5 santimetre uzunlamasına dorsal kesi yapın. Böbreğin üzerindeki sol yan kas ve fasyadan küçük bir kesi yapın. Daha sonra bir çift forseps ile sol böbreği dışsallaştırın. Künt forseps kullanmak. Alt kutuptaki yağı ve üreterin yakınındaki bir miktar bağ dokusunu dikkatlice inceleyin. Üreter bölgesini bulun. Ardından, renal ven ve arterin klemp ile dahil edilmesini önlemek için üreteri bağ dokusu ile birlikte renal pedikülden ayırın. Vasküler kelepçeyi açmak için kelepçe aplikatörleri kullanın ve doğrudan üreterdeki renal pelvisin altına yerleştirin. Tüm farelere eşit basınç uygulandığından emin olmak için kelepçe üzerindeki işaretleri kullanın. Şimdi böbreği kelepçe ile nazikçe retroperitoneal boşluğa geri itmek için tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanın. Ardından emilebilir bir dikiş kullanarak kas tabakasını dikin. Cilt katmanını kapatmak için cilt klipsleri kullanın. Üreter kelepçesini çıkarmak için yara klipslerini çıkarın ve kelepçeye erişmek için orijinal kesileri kullanarak cerrahi alanı yeniden şekillendirmeden temizleyin. Kas tabakasını yeniden açın ve retroperitoneal boşluğu ortaya çıkarın. Böbreği dışsallaştırmadan klempi retroperitoneal boşluğa dikkatlice yerleştirmek için forseps kullanın. Kelepçe aplikatörleri ile, güvenli bir şekilde çıkarmak için forseps kullanarak çevreleyen dokuyu çekerken kelepçeyi yavaşça açın. Şimdi renal pelviste tıkanıklık olup olmadığını kontrol etmek için böbreği dışarıya çıkarın. Şişmiş bir renal pelvis hidronefrozu doğrular. Tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanarak böbreği retroperitoneal boşluğa geri itin ve insizyonu gösterildiği gibi dikin. Kontralateral nefrektomi yapmak için, orijinal cilt kesisini kullanarak dorsal bölgeyi yeniden açın. Boyut olarak, sağ yan kas ve böbreğin üzerinde fasya. Ardından forseps kullanarak sağ böbreği dışarıya çıkarın. Sağ böbreği pürüzsüz, kavisli forseps ile tutun ve üst ve alt kutupları çevre dokudan ayırın. Böbreği serbest bıraktıktan sonra, çift cerrahi düğüm kullanarak böbrek damarlarının ve üreterin etrafına bir Foro ipek sütür bağlayın. Böbrek koyulaşana kadar yaklaşık 30 saniye bekleyin. Ardından pürüzsüz kavisli forseps ile tutun ve kavisli makas kullanarak düğümün distalini keserek çıkarın. Kalan böbrek pedikülünü tuzlu suya batırılmış steril bir pamuklu çubuk kullanarak yavaşça retroperitoneal boşluğa geri itin, ardından dikişler ve klipsler kullanarak kas ve cilt katmanlarını kapatın. Tipik sağkalım ve böbrek fonksiyon ölçümleri, geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığından 84 gün sonra yapıldı. Fonksiyonel çalışmalar, geri dönüşümlü tek taraflı üreter tıkanıklığını, kan üre azotu, transdermal glomerüler filtrasyon hızı ve 18 saatlik su yoksunluğundan sonra idrar ozmolaritesi açısından tek başına nefrektomi ile karşılaştırdı. İdrar ozmolarite değerleri, aynı zaman noktalarında nefrektomi kontrol farelerinden belirgin şekilde daha düşüktü.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, idrar yolu obstrüksiyonunun geri döndürülmesini takiben uzun vadeli sonuçların analizini kolaylaştırmak amacıyla, farelerde geri dönüşümlü tek taraflı üreter obstrüksiyonu gerçekleştirilmesi için standartlaştırılmış bir protokol sunmaktadır.
Üriner sistem obstrüksiyonunun giderilmesinin ardından ortaya çıkan uzun vadeli renal sonuçlar, translasyonel nefroloji ve preklinik ilaç geliştirme süreçlerinde kritik bir zorluk olmaya devam etmektedir. Bu fare modeli, hem yapısal hem de fonksiyonel böbrek iyileşmesinin güçlü bir şekilde değerlendirilmesine olanak tanıyarak, kronik böbrek hastalığı ve akut böbrek hasarı portföyleri için hedef validasyonu ve mekanistik risk azaltma süreçlerinde öngörüsel güveni destekler. Tekrarlanabilirliği ve farklı suşlara uyarlanabilirliği, bu modeli erken keşif ve preklinik araştırma hatları için temel bir araç konumuna getirmektedir.
Bu model, hasar geri dönüşü sonrası renal sonuçların boylamsal değerlendirmesine olanak tanıyarak erken keşif, öncü bileşik belirleme ve preklinik doğrulama arasındaki köprüyü kurar.