تقييم المواد الحيوية لتكبير المثانة باستخدام تحليلات Cystometric في نماذج القوارض مختلفة

يهدف هذا الإجراء إلى تقييم استخدام المواد الحيوية لتكبير المثانة من خلال الحصول على بيانات وظيفية بواسطة قياس التدفق الخلوي. ويتم تحقيق ذلك أولاً عبر تثبيت السقالة في عيب تم إحداثه في المثانة. وتتمثل الخطوة الثانية من الإجراء في تمرير أنبوب فغر المثانة إلى البطن.

تتمثل الخطوة الثالثة في وضع أنبوب فغر المثانة داخل المثانة المُعززة وتثبيته على ظهر الحيوان. أما الخطوة النهائية فهي إجراء قياس تدفق البول لتقييم المثانة المُعززة من منظور وظيفي. وفي نهاية المطاف، يمكن أن تظهر النتائج من خلال قياس تدفق البول في الحالة الواعية تغيرات في سعة المثانة وامتثالها، وضغوط التبول، وأوقات دورة التغذية، وأحجام البول المتبقية بعد التبول.

تمتد تطبيقات هذه التقنية لتشمل علاج التشوهات الخلقية والمكتسبة في المثانة أو الإحليل التي تؤدي إلى ضعف في سعة المثانة، ومرونتها، ووظيفتها العامة. وذلك نظراً للحاجة إلى تقييم المواد الحيوية المبتكرة المستخدمة في توسيع المثانة من الناحية الوظيفية. بعد تحضير الحيوان للجراحة البطنية، استخدم المشرط لإجراء شق في خط المنتصف السفلي عبر الجلد.

باستخدام ملقط مسنن، ارفع العضلة المستقيمة وقم بتشريح السطح الخلفي للعضلة باستخدام مقصات ميتزنباوم دقيقة، ثم قص بقية العضلة في الخط الناصف على كامل طول شق الجلد. قم بإخراج المثانة من خلال جرح الشق. ضع غرزة جراحية عبر الجدار الخلفي للمثانة ثم عبر الجدار الأمامي للمثانة. ضع غرزاً إضافية جانبياً على المثانة ولا تقم بربط هذه الغرز.

عندما يتم شد الغرز، ستتخذ المثانة تكويناً مربعاً يبلغ حجمه حوالي سنتيمتر مربع واحد، وذلك طولياً عبر الجدار الأمامي للمثانة، أسفل قبة المثانة مباشرة على طول الخط الناصف. يجب توخي الحذر لتجنب الشد الزائد على هذه الغرز لأنها قد تنزلق بسهولة عبر أنسجة المثانة. في هذه الخطوة، يُفضل استخدام التكبير عبر الحلقة (loop magnification) لإجراء المفاغرة للسقالة. وباستخدام مقص دقيق، يتم تقليم السقالة الحريرية لتناسب المساحة التقريبية لخلل المثانة.

ابدأ من إحدى زوايا السقالة وقم بخياطتها إلى المثانة بطريقة الخياطة المستمرة. ولإنشاء ختم محكم للماء حول العيب بالكامل، من المهم جداً للجراح إجراء مفاغرة محكمة للماء وخالية من الشد بين السقالة والمثانة. سيضمن ذلك احتواء جميع البول داخل المثانة، حيث أن أي تسرب داخل الصفاق سيؤدي على الأرجح إلى نفوق الحيوان.

وكاختبار، استخدم إبرة تحت الجلد بقياس 30 gauge لملء المثانة بالماء. في حال وجود تسريب، قم بإغلاقه باستخدام غرزة متقطعة إضافية. بعد ذلك، أعد المثانة المعاد بناؤها إلى تجويف البطن قبل إغلاق جدار البطن.

احقن العضلة المستقيمة والأنسجة تحت الجلد بـ bupivacaine للتخدير الموضعي ثم أغلق الشق الجراحي. بعد ذلك، استخدم غرزة جراحية مستمرة لتقريب العضلة المستقيمة وإغلاق الجلد بغرزة جراحية مستمرة. بعد تنظيف الشق وتجفيفه، انقل الحيوان إلى قفص نظيف ودافئ للإفاقة من التخدير.

قبل البدء، قم بعمل مثبت عند نهاية أنبوب PE 50 بطول 10 centimeter لضمان عدم انزلاقه خارج المثانة. يتم ذلك عن طريق توسيع نهاية الأنبوب بتعريضه للهب برفق. ثانياً، تحقق من أن الأنبوب ليس مسدوداً.

احقن الطرف غير المتسع بالمحلول الملحي وتأكد من تدفقه. بعد تجهيز الحيوان للجراحة، وقبل كشف المثانة، قم بعمل شق بطول 1 cm على الظهر بين لوحي الكتف. وباستخدام مقصات metson balm، قم بتطوير مستوى بين الجلد والعضلة الكامنة تحته.

ثم ضع طرفي المقص في المستوى وقم بمباعدتهما لإنشاء نفق تحت جلدي وصولاً إلى الجانب البطني. بعد ذلك، اقلب الحيوان. قم بكشف المثانة ثم أعدها إلى التجويف البطني.

بالعودة إلى الشق الظهري، ضع ملقطاً صغيراً داخل النفق تحت الجلد. استخدم أصابعك لحماية المحتويات داخل البطن، ثم استخدم طرفي الملقط للثقب عبر جدار البطن. الآن، أمسك الطرف الأملس للأنبوب الموسع باستخدام الملقط واسحبه للخلف عبر الشق الظهري.

لا تسحب طرف المرساة المتسع خلف جدار البطن بينما يمر الأنبوب عبر الشق. ضع غرزة كيسية (purse string stitch) عند قبة المثانة. ضع مشبكاً صغيراً على الطرف الحر للخيط لضمان عدم سحبه عن طريق الخطأ عبر الغرزة.

كذلك، لا تشد الغرزة بقوة. الآن، استخدم إبرة قياس 18 EU لثقب جدار المثانة في مركز غرزة كيس النقود (purse string suture) بما يكفي لتكون داخل التجويف. ثم ضع الملقط الدقيق في الفتحة وباعد بين طرفيه برفق لتوسيع الثقب.

أدخل الطرف المتسع من القسطرة في الفتحة الموجودة بالمثانة حتى تصبح داخل اللمعة. ثم شد غرزة كيس التبغ حول القسطرة واربطها. بعد ذلك، لف الغرزة الحرة حول القسطرة مرة واحدة واربطها.

الآن، يتم اختبار المثانة عن طريق حقن المحلول الملحي فيها ببطء عبر الأنبوب. في حالة وجود تدفق من الإحليل، يتم سحب المحلول الملحي لتفريغ ضغط المثانة. وكرر العملية مرة أخرى. وإذا تم اكتشاف تسريب، يجب إصلاحه باستخدام الغرز الجراحية، حيث إن تسرب البول قد يؤدي إلى الوفاة.

أغلق الشق البطني كما تم توضيحه سابقاً. ثم انتقل إلى إغلاق الشق الظهري. تختلف إجراءات إغلاق الشق الظهري بين الجرذان والفئران.

بالنسبة للجرذان، استخدم المقص لقطع أنبوب القسطرة عند مستوى الجلد. ثم أدخل إبرة ذات طرف غير مدبب عيار 22 في الأنبوب. استخدم الغرز الجراحية المستمرة لإغلاق الجلد فوق الأنبوب، مع ترك محور الإبرة بارزًا للخارج.

ضع الآن غطاءً لخط الوريد على الإبرة غير المدببة، وثبّت طرف القسطرة بالجلد. بعد ذلك، نظف مكان الشق واترك الحيوان ليتعافى في بيئة دافئة. أما في الفئران، فيجب تثبيت القسطرة على النحو التالي: اترك القسطرة طويلة وسُدّ طرفها عن طريق صهره بلهب.

قم بلف نهاية الأنبوب واتركه في الجيب تحت الجلد على ظهر الحيوان. أغلق الجلد فوق الأنبوب باستخدام غرزة جراحية مستمرة. وقبل إجراء التحليل الخلوي، اترك فترة تعافٍ بعد الجراحة لا تقل عن خمسة إلى سبعة أيام سواء للجرذان أو الفئران.

بعد فترة النقاهة في يوم قياس التدفق الخلوي. بالنسبة للفئران، من الضروري أولاً فتح الشق الظهري تحت التخدير وإزالة الأنابيب الملتفة من الجيب تحت الجلد. بعد إزالة الأنابيب، يتم إغلاق هذا الشق والانتظار حتى تستيقظ الفئران تماماً من التخدير قبل البدء في قياس التدفق الخلوي، وذلك بوضع الحيوانات في أقفاص أيضية معلقة فوق موازين.

الآن، قم بالوصول إلى القساطر فوق العانة باستخدام إبرة قياس 27 متصلة عبر أنبوب T بمحول الضغط ومضخة التسريب. ابدأ بتسريب المحلول الملح الفسيولوجي. انتظر حتى يستقر تتبع نمط التبول.

خلال الـ 10 إلى 20 دقيقة التالية، يرتفع ضغط المثانة أولاً، ويلي ذلك عملية التبول. ثم يتم تسجيل دورات التبول لمدة تتراوح من 15 إلى 120 دقيقة، أو لثلاث أو أربع دورات تبول على الأقل خلال الإجراء. يجب مراقبة القسطرة للتأكد من عدم التوائها وتجنب أي مضاعفات أخرى.

يمكن بعد ذلك تحليل مخططات الديناميكا البولية لاستخلاص معاملات مثل أحجام التبول، والامتثال، وضغوط التبول القصوى أثناء الانقباض، والفاصل الزمني، ووقت دورة التبول، وأحجام البول المتبقية بعد التبول. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تعزيز المثانة باستخدام أي مادة حيوية. ستعرف أيضاً كيفية تقييم وظيفة أي مثانة قوارض باستخدام قياس التبول لدى الحيوانات الواعية غير المقيدة.