لماذا يعتبر تعزيز التألق الذاتي مهماً للتحقق من صحة الهدف؟

يتيح تعزيز الفلورة الذاتية الناتج عن معالجة الكاشف المبرد بالثلج تحديداً سريعاً ودقيقاً لخلايا بيتا البشرية أثناء التشريح المجهري بالليزر، مما يقلل من أخطاء الاختيار ويضمن الحصول على مجموعات منقاة للتحقق النسخي من الأهداف العلاجية في أبحاث السكري.

كيف يتناسب عزل أربعة مقاطع تجميدية في المرة الواحدة مع مسار عملية الاكتشاف؟

تؤدي معالجة أربعة مقاطع تجميدية في الدفعة الواحدة إلى تحسين الإنتاجية مع الحفاظ على سلامة الـ RNA، مما يدعم التوليد الفعال للعينات المكررة اللازمة لاختبار الفرضيات وتقليل المخاطر المتعلقة بالأهداف في سير عمل الاكتشاف المبكر.

ما هي القياسات الكمية التي تتيح إجراء تحليل ترانسكريبتومي موثوق؟

يؤدي دمج عشر عينات مستأصلة مجهرياً قبل استخلاص الـ RNA باستخدام طقم Pico Pure إلى توفير كمية مدخلات كافية (11 µL) لإجراء تحليل ترانسكريبتومي حساس، مما يسمح بالمقارنة الكمية للتعبير الجيني بين الحالات المرضية.

لماذا تعد متطلبات التكرار مهمة للتعاون متعدد الوظائف؟

يضمن إجراء التشريح الدقيق لجميع المقاطع العشرين المجمدة وتجميع النواتج المتحللة توفير مكررات بيولوجية، وهي أمر ضروري لتوليد بيانات متسقة عبر الفرق البيولوجية والتحليلية والترجمية التي تقيم مدى صلاحية الهدف.

ما هي قدرات التحليل الإحصائي المطلوبة قبل التنفيذ؟

يتطلب التنفيذ إجراء تقييم أساسي لسلامة RNA وتباين الإنتاجية عبر العينات لوضع معايير القبول، مما يسمح بإجراء مقارنة إحصائية بين الجزر المعالجة وجزر التحكم في الدراسات اللاحقة.

تحسين بروتوكول للتسليخ مجهري ليزر من الجزر البنكرياسية الإنسان من عينات جراحية

514 مشاهدات

تم الاستشهاد 27 مرة

09:43 د

يناير 6, 2013

10.3791/50231-v

يناير 6, 2013

514 مشاهدات

Dorothée Sturm¹^,² , Lorella Marselli³ , Florian Ehehalt¹^,² , Daniela Richter¹ , Marius Distler² , Stephan Kersting¹^,² , Robert Grützmann² , Krister Bokvist⁴ , Philippe Froguel⁵ , Robin Liechti⁶ , Anne Jörns⁷ , Paolo Meda⁸ , Gustavo Bruno Baretton⁹ , Hans-Detlev Saeger² , Anke M. Schulte¹⁰ , Piero Marchetti³ , Michele Solimena¹

¹Molecular Diabetology, Paul Langerhans Institute Dresden, ²Department of GI-, Thoracic- and Vascular Surgery, University Hospital Carl Gustav Carus, University of Technology Dresden, ³Department of Endocrinology and Metabolism, Metabolic Unit University of Pisa, ⁴Labs DC0522, Lilly Corporate Center, ⁵Genomics, Faculty of Medicine Imperial College London, ⁶Vital-IT, SIB Swiss Institute of Bioinformatics, ⁷Clinical Biochemistry, Hannover Medical School, ⁸Cell Physiology and Metabolism, Medical School, University of Geneva, ⁹Department of Pathology, University Hospital Carl Gustav Carus, University of Technology Dresden, ¹⁰R&D DIAB Division / Translational Medicine, Sanofi-Aventis

تسليخ مجهري بالليزر هو الاسلوب الذي يسمح للانتعاش الخلايا المحددة من كميات ضئيلة من حمة. نحن هنا وصف بروتوكول للحصول على الجزر البنكرياسية الإنسان من العينات الجراحية لاستخدامها في الدراسات transcriptomic. لدينا بروتوكول يحسن تألق ذاتي لا يتجزأ من خلايا بيتا الإنسان، مما يسهل تحصيلها.

استكشف المزيد من الفيديوهات

RNA PALM MicroBeam AdhesiveCap

Chapters in this video