إنشاء نموذج القوارض من الابهر البطني عن طريق حظر أدفينتيتيال Vasa Vasorum التروية

الهدف العام من هذا الإجراء هو إحداث نقص الأكسجة في الأنسجة الأبهرية لبدء تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني أو AAA مع تمدد الأبهر التدريجي في الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في فترة بحث تمدد الأوعية الدموية الأبهري حول الآليات المسؤولة عن تطور تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني وتمزقه. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الخصائص المورفولوجية والمرضية لتلك الموجودة بين نموذج الفئران تشبه تلك التي تظهر في تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني البشري.

خطرت لنا فكرة هذه الطريقة لأول مرة عندما كنا نحقق في احتمال آخر لوجود AAA بشري. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية حيث يصعب تعلم جراحة تحريض نقص الأكسجة من خلال التعليمات النصية وحدها. سيظهر الإجراء تاتسورو ياتا ، جراح الأوعية الدموية لدينا ، وهيرونا كوجو ، وكلاهما من المستندين السابقين من مختبرنا.

بعد التأكد من المستوى المناسب من التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم ، استخدم ماكينة حلاقة كهربائية لحلق شعر البطن لفأر يتراوح وزنه 300 إلى 400 ملليغرام ، متبوعا بتطهير محلول كحول وبوفيدون اليود المتسلسل للجلد المكشوف. ضع الجرذ على طاولة العمليات في وضع ضعيف وضع المرهم على عيون. بعد ذلك ، استخدم مقصا لعمل شق بطني في خط الوسط في البطن واستخدم شاشا معقما وضام الجرح لتعبئة محتويات البطن داخل تجويف البطن.

لفصل الشريان الأورطي عن الأنسجة المحيطة بالأوعية الدموية ، استخدم الملقط لالتقاط خلف الصفاق وتمزيقه برفق ، مما يؤدي إلى تعريض جدار الأبهر. بعد ذلك ، قم بتقشير الشريان الأورطي تحت الكلوي داخل الفضاء خلف الصفاق من الوريد الكلوي الأيسر إلى التشعب من الأنسجة المحيطة بالأوعية الدموية. استخدم خياطة حريرية 5-0 لربط الأوعية المتفرعة من الشريان الأورطي البطني لمنع تدفق الدم عند نقطة بعيدة عن الشريان الأورطي لا تضيق تجويف الأبهر.

لمنع تدفق الدم الأبهري، ضع مشابك الأوعية الدموية أسفل الشريان الكلوي مباشرة وفوق تشعب الشريان الأورطي مباشرة. على غرار إحداث نزيف نقطي على سطح جدار الأبهر ، أدخل المقص الدقيق 5 مم بعيدا عن مشبك الأبهر المجاور لفروع الشريان الكلوي لقطع جدار الشريان الأبهري الأمامي واستخدم إبرة ساكنة قياس 24 لإدخال قسطرة من البولي يوريثين بشكل ضحل من خلال الشق. قم بتوصيل حقنة سعة 1 مل مملوءة بالماء بالبولي يوريثين وقم بإخراج الدم المتبقي من الشريان الأورطي.

بعد ذلك ، قم بقص قسطرة بولي يوريثين جديدة بطول 10 مم وأدخل هذه القسطرة بالكامل في شق تجويف الأبهر. أعد وضع منتصف القسطرة لتتناسب مع موقع الشق واستخدم 8-0 خياطة أحادية الشعيرات لإغلاق الشق بخياطة متقطعة. اربط الشريان الأورطي البطني بعقدة الجراح باستخدام خياطة حريرية 5-0 وقسطرة البولي يوريثين.

عندما تكون القسطرة آمنة ، قم بإزالة المشابك الوعائية عند تشعب الأبهر وأسفل الشريان الكلوي لاستعادة تدفق الدم المسبق وتأكيد وجود نبض الأبهر الإجمالي. بعد إزالة الشاش ، استخدم خياطة 4-0 من مادة البولي بروبلين لإغلاق شق البطن بإحكام في طبقتين لمنع بروز العضو. بعد ذلك ، ضع الليدوكائين الموضعي على شق البطن وضع الجرذ على وسادة تدفئة مع المراقبة حتى التعويض الكامل.

بعد الجراحة ، راقب تطور المسار الزمني للشريان الأورطي المتضخم على تصوير صدى بالموجات فوق الصوتية ، وقياس الحد الأقصى للقطر من الحافة الداخلية إلى الحافة الخارجية للشريان الأورطي البطني وفقا للبروتوكولات القياسية. بعد 28 يوما من الجراحة ، استخدم مشرطا لفتح البطن بشق بطني جديد واستخدم المقص لحصاد تمدد الأوعية الدموية. ضع الشريان الأورطي المحصود في الفورمالين المخزن بشكل محايد بنسبة 10٪ لمدة 24 إلى 48 ساعة.

بعد تضمين الشريان الأورطي في البارافين والحصول على أجزاء من الأنسجة الأبهرية ، وفقا للبروتوكولات القياسية ، قم بترطيب أقسام البارافين الثابتة في الماء المقطر لمدة 10 دقائق ، تليها الحضانة في الهيماتوكسيلين في فيرهوف. يمكن التعرف على الصدأ والتآكل من خلال نشاط مختبر الهيماتوكسيلين ومحلول فان جيسون. لذلك ، فإن نضارة وأوقات الحضانة لأصباغ الأنسجة هذه مهمة للأرشفة والتلوين الاختياري.

بعد 25 دقيقة ، اشطف الأقسام بثلاث غسلات لمدة دقيقة واحدة في الماء ، متبوعة ب 10 إلى 30 غموسة في محلول التمايز. اشطف الأقسام ثلاث مرات في الماء مرة أخرى وضع العينات في 5٪ ثيوسلفات الصوديوم لمدة دقيقة واحدة. بعد غسل الماء مرة أخرى ، اغمر العينات في محلول فان جيسون لمدة خمس دقائق.

بعد ذلك ، قم بتجفيف الأنسجة في غمر الإيثانول التصاعدي لمدة 30 ثانية ، متبوعا بإزالة حضانات الزيلين لمدة 5 دقائق. ثم استخدم وسيط تركيب الرنين لتغطية الأقسام بزلات غطاء ذات حجم مناسب. في هذه الصور ، يظهر تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني التمثيلي ، بعد 28 يوما من إدخال القسطرة.

يكشف قياس الأطراف العلوية والسفلية للشريان الأورطي عن طريق التصوير بالموجات فوق الصوتية عبر البطن عن قطر طبيعي بدون تمدد مباشرة بعد وضع القسطرة ، والذي يزداد إلى الحد الأقصى للحجم بعد حوالي 14 يوما من وضعه ويظل دون تغيير أو يزيد قليلا حتى نهاية الفترة التجريبية. يكشف التحليل النسيجي المرضي لتمدد الأوعية الدموية في اليوم 28 عن تدهور بارز للألياف المرنة مقارنة بتلك التي لوحظت في اليوم الصفر. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في حوالي ساعة واحدة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل التحليل في المختبر للإجابة على أسئلة إضافية حول الوظائف التسلسلية الفردية. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني لاستكشاف المرض في التركيبة السكانية المحددة للمرضى. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إحداث نقص الأكسجة في الأنسجة الأبهرية لبدء تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع التمدد التدريجي للأبهر في الفئران.

لا تنس أن العمل باستخدام الأدوات الجراحية يمكن أن يكون خطيرا للغاية وأنه يجب دائما اتخاذ الاحتياطات ضد الإصابة والعدوى أثناء إجراء هذا الإجراء.