رباعية الداما : تعديل لوحة الداما ثلاثية الأبعاد لدراسة تركيبات المخدرات

رقعة الشطرنج الرباعية هي تقنية تدرس جميع التركيبات الممكنة التي يمكن الحصول عليها من خلال الجمع بين أربعة أدوية ، ومن المهم إيجاد علاج للكائنات الحية الدقيقة المقاومة ، وخاصة MDRs أو المعروفة أيضا باسم الكائنات الحية الدقيقة المقاومة للأدوية المتعددة. هذه التقنية ليست كثيفة العمالة ويمكن الحصول على النتائج في اليوم التالي أو بعد انتهاء فترة الحضانة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكنه دراسة جميع التركيبات الممكنة وليس فقط مجموعات محددة ومحدودة للغاية يمكن الحصول عليها من خلال الجمع بين هذه الأدوية الأربعة وكل ذلك في تجربة واحدة.

بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام هذه التقنية في تخصصات متعددة وليس فقط في علم الأحياء الدقيقة وحتى في علم الأحياء الدقيقة. يمكنه دراسة جميع التركيبات الممكنة بين العوامل المضادة للميكروبات المختلفة وليس فقط العوامل المضادة للبكتيريا. بالإضافة إلى جزء علم الأحياء الدقيقة ، يمكن استخدامه لدراسة التوليفات بين الأدوية المضادة للسرطان ، وبين المستخلصات النباتية والأدوية ، وحتى بين لوحات العلاجات الجزيئية الفعالة الجزيئية.

مكان التحضير 4 96 ، ألواح البئر بجانب بعضها البعض لتشكيل مربع باستخدام شريط ، قم بلصق قاعها معا. كرر هذه الخطوة من أجل الحصول على أربع لوحات تحتوي كل منها على أربع لوحات وقم بتسميتها واحدة ، و اثنان ، و ثلاثة ، وأربعة. أضف 50 ميكرولتر مولر.

تلميح ومرق إلى الآبار بين العمود الثاني والعمود 11 في عام 1696 ، تضيف ألواح الآبار من الألواح الأربعة 200 ميكرولتر من مرق مولر هينتون إلى البئر H 12 بمثابة عنصر تحكم سلبي. حسنا ، في ألواح الآبار لعام 1696 من الألواح الأربعة ، أضف مرق مولر هينتون سعة 50 ميكرولترا إلى الآبار A و One و H ، وواحد يعمل كآبار تحكم إيجابية في ألواح الآبار لعام 1696 من الألواح الأربعة ، وهو دواء واحد من cefotaxime التخفيف التسلسلي إلى أنبوب مخروطي الشكل عند 15 مل. ماء مقطر معقم.

احسب الحجم المراد إزالته من محلول مخزون الدواء بعد الصيغة C واحد V واحد يساوي C اثنين V اثنين. قم بإزالة الحجم المحسوب من الماء المقطر المعقم سعة 15 مل وأضف نفس الحجم من محلول مخزون الدواء إلى ماصة الأنبوب المخروطي 50 ميكرولتر من محلول الدواء المحضر في كل بئر في العمود 11 والعمود 12 ، باستثناء البئر H 12 ، ابدأ التخفيف التسلسلي عن طريق إزالة 50 ميكرولتر من العمود 11 ووضعه في الآبار المقابلة في العمود 10 ، ثم من 10 حتى الوصول إلى العمود الثاني حيث سيتم التخلص من 50 ميكرولترا المأخوذة من العمود الثاني. كرر التخفيف التسلسلي لكل لوحة من ألواح الآبار 1696 من الألواح الأربعة.

المخفف التسلسلي لدواء اثنين أميكا إلى أنبوب مخروطي الشكل عند 10 مل. ماء مقطر معقم. احسب الحجم المراد إزالته من محلول مخزون الدواء.

قم بإزالة الحجم المحسوب من الماء المقطر المعقم سعة 10 مل وأضف نفس الحجم من محلول مخزون الدواء إلى الأنبوب المخروطي. خذ صفيحة منفصلة سعة 96 بئر ، أضف مائة ميكرولتر من مرق مولر هينتون المعقم إلى الآبار بين الورد G و B.In هذا الطبق ، أضف مائة ميكرولتر من الدواء المعد مسبقا. ثانيا ، حل لآبار الصف G.تمييع بشكل متسلسل من الصف G إلى الصف B عن طريق أخذ مائة ميكرولتر من كل بئر في RO G. وأخيرا التخلص من مائة ميكرولتر من آبار الصف B.كرر هذه الخطوات من أجل إعداد ثمانية ألواح منفصلة 96 بئر نقل الدواء اثنين إلى أربعة ألواح ماصة 50 ميكرولتر من الدواء اثنين من الآبار بين الصفين G و B في الآبار المقابلة في كل لوحة في الألواح الأربع ، تحتوي لوحة واحدة محضرة 96 بئر على مائة ميكرولتر من الدواء الثاني.

هذا يكفي لطبقتين في دواء لوحة واحدة. ثلاثة يعيشون من الخاصرة بالإضافة إلى أربعة أنابيب مخروطية مختلفة في 14 مل من الماء المقطر المعقم. احسب الحجم المراد إزالته من محلول مخزون الدواء.

قم بإزالة الحجم المحسوب من الماء المقطر المعقم سعة 14 مل من كل أنبوب وأضف الحجم المقابل للدواء. بعد تحضير التركيزات المطلوبة من الدواء الثالث ، خذ 50 ميكرولترا وأضفه إلى الآبار المقابلة بين الصفين B و G والعمودين اثنين و 12 في اللوحة المقابلة. في كل لوحة حيث يتوافق C واحد مع الألواح الأربعة P ، والألواح الأربعة ، C ، يتوافق اثنان مع الأربعة P ، صفيحتين ، والألواح الأربعة C3 تتوافق مع الأربعة P ، وثلاثة ألواح ، والألواح الأربعة و C الأربعة تتوافق مع أربعة صفائح P ، والألواح الأربعة ، والألواح الأربعة ، وأربعة ، ثلاثي ميثوبريم ، سلفاميثوكسازول ، إضافة إلى أنبوب مخروطي ، أضف 14 مل.

نسعى الماء المقطر. احسب الحجم المراد إزالته من محلول مخزون الدواء. قم بإزالة الحجم المحسوب من الماء المقطر المعقم سعة 14 مل لكل أنبوب وأضف الحجم المطلوب للدواء.

بعد تحضير التركيزات المطلوبة من الدواء الرابع ، خذ 50 ميكرولترا وأضفه إلى الآبار المقابلة بين الصفين B و G والعمودين الثاني و 12. في اللوحات الأربع في اللوحة المقابلة حيث يتوافق C واحد مع اللوحة واحدة C اثنان يتوافق مع اللوحة الثانية C3 ، ويتوافق مع اللوحة الثالثة و C أربعة يتوافق مع اللوحة أربعة. تحضير وإضافة اللقاح البكتيري يساوي I-E-S-B-L باستخدام نقل حلقة معقمة.

مستعمرة واحدة من العزلة البكتيرية تساوي استزراعها مسبقا على طبق إلى ملتين مرق مولر هينتون معقم ودوامة تحقق من التعكر حيث يجب أن يكون 0.5 ماكفارلاند باستخدام كثافة أضف مرق مولر هينتون المعقم TML إلى كوب البول المعقم أضف اللقاح البكتيري من لقاح 0.5 ماكفارلاند إلى كوب البول بعد الصيغة C واحد V واحد يساوي C اثنين V اثنين حيث V واحد يساوي 800 ميكرولتر ماصة الأنابيب 50 ميكرولتر من محلول اللقاح ولكل بئر باستثناء H 12 ، وهو التحكم في العقم ، احتضان الألواح جيدا عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. يمثل هذا الشكل اللوحة أ واحد. مساكن الألوان هي الآبار التي تحتوي على نمو بكتيري ، وتمثل الأسهم السوداء الآبار على النمو.

لا توجد واجهة نمو في اللوحة الأولى واللوحة الثانية واللوحة الثالثة. يمكننا أن نرى أن هناك تثبيطا في الصف D يحتوي على واحد أكثر من ثمانية ميكروفونات ميكروفونية من أميكاسين بالإضافة إلى العديد من الميكروفونات الفرعية من سيفوتاكسيم وليفوفلوكساسين بالإضافة إلى واحد أكثر من ثمانية ميكروفونات ميكروفونية من تريميثوبريم سلفاميثوكسازول في اللوحة الرابعة. نلاحظ أنه لا يوجد نمو بكتيري في الربع الذي يحتوي على المزيج.

هذا لأنه في هذه اللوحة لدينا MIC من ليفوفلوكساسين الذي سيمنع النمو تماما. يمثل الشكل الأول ب اللوحة الثانية. في هذه اللوحة ، يمكننا أن نرى أن تثبيط نمو البكتيريا يظهر أيضا في RD ، والذي يحتوي على دوائر فرعية من سيفوتاكسيم وليفوفلوكساسين بالإضافة إلى واحد أكثر من ثمانية ميكروفون ميكروفوني من أميكاسين وواحد على أربعة ميكروفون من ثلاثي ميثوبريم سلفاميثوكسازول الشكل واحد C يمثل اللوحة A ثلاثة.

في هذا الشكل ، يمكننا أن نرى أن تثبيط نمو البكتيريا يظهر في الصف C والصف D الذي يحتوي على العديد من الميكروفونات الفرعية من سيفوتاكسيم وليفوفلوكساسين ، بالإضافة إلى نصف ميكروفون ميكروفوني من ثلاثي ميثوبريم سلفاميثوكسازول ، وواحد على أربعة ميكروفون من أميكاسين في الصف C وواحد على اثنين من MIC من Amikacin في الصف D الشكل 1D يمثل اللوحة A أربعة. في هذه اللوحة لدينا MIC واحد من Trimethoprim sulfamethoxazole مع عدة تركيزات من Cefotaxime و amikacin و Levofloxacin. في هذا الشكل ، يمكننا أن نرى أن نمو البكتيريا مثبط تماما في الربع الذي يحتوي على المجموعة حيث يكون هذا التثبيط هو تأثير MIC واحد من Trimethoprim sulfamethoxazole في ورقة FIC ، كل ذلك في ملف Excel.

سيعرض الجدول الصوت النهائي FIC ، مع تفسير القيمة التي تم الحصول عليها. في الختام ، تدرس تقنية رقعة الشطرنج Q جميع التركيبات الممكنة بين أربعة أدوية في تجربة واحدة. يتم الحصول على النتائج في اليوم التالي ويتم تفسيرها بطريقة سهلة وسريعة باستخدام قالب Excel.