Calcofluor White 染色:一种通过紫外诱导荧光可视化双子叶植物茎切片细胞壁中纤维素沉积的简易方法

0 次观看2:37 分钟 • July 8th, 2025

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在植物细胞中,细胞壁是一种特化的保护层,位于质膜外侧。细胞壁主要由纤维素构成,纤维素是一种线性、无分支的多糖,由葡萄糖单体首尾相连而成 通过 β-1,4 糖苷键

纤维素以正交排列的纤维素微纤丝形式存在,嵌入在半纤维素、果胶和蛋白质基质中。

某些细胞(如维管束木质部组织和束间纤维的细胞)的细胞壁中还含有木质素,这是一种起硬化作用的物质。

为了观察植物细胞壁中的纤维素沉积,首先将双子叶植物茎的横切面置于缓冲液中的琼脂糖中。加入荧光增白剂(calcofluor white)的水溶液,该染料为一种化学荧光性平面染料。孵育一段时间,使染料扩散进入组织。

进入后,使用荧光增白剂 Calcofluor white 通过 其羟基官能团与纤维素中葡萄糖单体的羟基相互作用并形成氢键,从而使染料与纤维素紧密靠近,并促进额外的范德华相互作用,形成稳定的染料-纤维素复合物。

将茎段转移至载玻片上,并加盖盖玻片。在紫外光照射下,与纤维素结合的染料分子会发出明亮的白色荧光。

表皮、皮层和髓部细胞因含有丰富的纤维素而表现出强烈的荧光,细胞壁轮廓清晰可辨。相比之下,木质部和束间纤维细胞的荧光较弱,可能提示由于木质素的存在导致染料扩散不充分。

对于荧光增白剂白染色,将茎段转移至微量离心管中,加入1毫升0.02%的荧光增白剂白溶液。轻轻吹打溶液数次。随后按照文本方案中所述步骤进行孵育,并洗涤茎段,然后在紫外光下观察。

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最后更新:22 八月 2026