使用电容型免疫探针生物传感器进行靶肽的检测与测定

从一根已组装好的、带有聚多巴胺层的全氟烷氧基涂层铂丝开始。

将此探针浸泡在含有靶向肽特异性抗体的溶液中，抗体将固定在聚多巴胺上，形成免疫探针。 

清洗并将免疫探针置于带有氯化银接地电极的流动室中，建立电路。

首先，引入缓冲液并施加电压以激活免疫探针，使其能够作为电池或电容器工作，将能量以电荷形式储存。

记录电信号以生成基线。

现在，将生物传感器暴露于含有目标肽的溶液中。

这些肽与探针上的抗体结合，导致生物传感器局部电荷及储存能量发生变化。

记录电信号。信号的增加表明目标肽的存在，而信号的强度与目标肽的浓度相关。

首先，截取一段25厘米长的全氟烷氧基包覆铂丝。然后，使用解剖刀从一端剥除约5毫米的全氟烷氧基涂层，注意不要割伤内部的铂丝。接着，将铂丝裸露的一端插入镀金的1毫米公头连接针中。随后，使用尖嘴钳将连接针的金属齿压接在铂丝裸露端周围，并将铂丝焊接到镀金连接针上。

接下来，通过将50毫克盐酸多巴胺加入50毫升、pH为6的10毫摩尔磷酸盐缓冲液（PBS）中来配制多巴胺溶液，并通过搅拌混合。待多巴胺完全溶解后，将铂丝的尖端放入盛有新配制的含多巴胺PBS溶液的容器中。将氯化银圆盘电极连接至前置放大器的接地通道，然后将该氯化银圆盘电极置于含有含多巴胺PBS溶液和铂丝的容器中。

继续操作前，将一根导线分流器连接到前置放大器的参考通道。打开交互式数据采集软件，并通过设置起始电位为-0.6伏、终止电位为0.65伏、扫描速率为0.04伏/秒、沉积持续时间为420秒，来设定一个锯齿波电沉积电位程序。

完成聚多巴胺沉积后，从容器中移除氯化银参比电极颗粒和铂丝尖端。将铂丝尖端放入含有 pH 7.4 磷酸盐缓冲液（PBS）的微量离心管中，浸泡 2 至 5 分钟，确保铂丝尖端不接触微量离心管的管壁或管底。随后，在适当大小的容器中，按 1:20 的比例将目标抗体与 pH 7.4 的 PBS 混合，配制抗体溶液。

接下来，将沉积了聚多巴胺的铂电极尖端浸入抗体溶液中，在室温下孵育两小时，确保铂丝尖端悬浮于溶液中，不与微量管内壁接触。将电容型免疫探针的功能端放入流动池中，操作时需小心避免触碰电极尖端，以免损坏探针的传感部分。

在首次实验测试之前，执行一次 TBS 标准运行以活化电容型免疫探针；在电压协议中，将正向阶跃电位设为 110 毫伏，负向阶跃电位设为负 5 毫伏，阶跃持续时间为 20 毫秒，采集持续时间为 600 秒。

接下来，使用相同的TBS配制所需浓度的肽溶液。为维持灌流液的成分，建立一个灌流系统，使灌流液可在TBS与添加肽的TBS之间切换。采用TBS的标准参数，并通过将数据采集时长设定为360秒，建立肽感应的数据采集方案。