2013年5月28日
本文介绍如何进行最小红斑剂量(MED)检测,以确定对个体施加后可引起红斑(灼伤)的最低紫外线辐射剂量。
以下实验的总体目标是进行最小红斑剂量测试,以确定对个体施加后能够引起红斑的最低紫外线辐射剂量。该过程首先准备光源和受试者以进行紫外线照射。第二步,对受试者施加不同持续时间的紫外线照射,这可能会导致红斑,即晒伤。
接下来,通过评估皮肤颜色的变化来确定最小红斑量,从而获得结果。根据肉眼观察和分光光度法,显示了不同照射时间下个体皮肤变暗的差异。我的名字是Susan Darlow。
我是卡罗琳·哈克曼博士实验室的博士后研究员。本实验操作将由哈克曼博士实验室的研究助理塔夏·蒙奇演示。我将示范受试者所扮演的研究角色。开始此操作前,首先向受试者解释最小红斑剂量(MED)测试的原理和过程。
因此,我将用紫外线照射你皮肤的一部分,持续近20分钟,明天我们将检查皮肤的反应情况,以判断你对光的敏感程度。被紫外线照射的皮肤区域可能会出现灼伤感,如果感到疼痛,可像处理其他日晒伤一样进行护理。在向受试者解释完操作流程后,工作人员和受试者均需佩戴防紫外线护目镜,然后暴露受试者的前臂皮肤。
接下来,移除贴片左右两侧的背衬,并将贴片贴于前臂内侧。放置贴片时应避开已有的皮肤瑕疵。让受试者戴上防护手套,并用其衬衫或其他材料覆盖手臂上其余暴露的皮肤区域,以保护这些部位免受紫外线照射。
下一步是调整受试者手臂的位置,使贴片上的孔与紫外光源对齐。务必仔细检查,确保没有其他皮肤部位暴露在紫外光下。一旦受试者的手臂处于正确位置,应告知他们实验开始后会感到温热,但需向他们确认手臂在测试过程中不会被灼伤。
在开始紫外线照射之前,根据光源的制造商说明书以及受试者的Fitzpatrick皮肤类型,选择照射的总持续时间。该皮肤分型标准分为1至6级,其中1级代表非常白皙的皮肤,6级代表非常深色的皮肤。
然后设定紫外线照射总时长的计时器。该受试者的皮肤类型为III型,照射时间为20分钟。也可同时使用第二个备用计时器。
接下来,移除达尔文贴片上第一个孔的遮盖物。打开紫外光源并启动计时器。在紫外照射期间,按照设定的时间间隔依次揭开贴片上的后续各孔,总照射时间为20分钟。
在两分钟后打开第二个孔,四分钟后打开第三个孔。八分钟后打开第四个孔。十二分钟后打开第五个孔,十六分钟后打开第六个孔。在紫外线照射后,用一个小点标记贴片上第一个和最后一个孔远端边缘的扫描曝光位置。
为了更方便地在24至48小时后识别暴露区域,请受试者在检查皮肤前不要洗掉标记。然后让受试者脱去手套和贴片。再提醒他们于24至48小时后返回,以便重新检查皮肤。
请务必确保明天回来,以便我们检测结果。在24至48小时后,检查暴露的皮肤区域。
红色或粉红色皮肤表明出现红斑或灼伤。将紫外线照射时间最短的皮肤区域出现的红斑定义为最小红斑量(MED),并使用孔洞角落的小圆点将贴片重新放回皮肤上。每六个中取一个,将贴片重新放置到已暴露的皮肤区域,以识别不同部位。
确定曝光区域后,将分光光度计的光圈置于待测第一个孔的中心位置。然后按数字顺序依次测量六个曝光区域。接着,测量邻近区域中的一个未曝光区域。
作为对照,应避免选择雀斑、痣或其他与紫外线无关的色素沉着区域。分光光度计可提供 L* 值(代表皮肤暗度)和 B* 值(代表色调)的测量结果,A* 值则反映皮肤的红度。
A*值升高表明皮肤更红,应与紫外线暴露时间的延长相对应。如果A*值未随紫外线暴露时间的增加而升高,则需重新测量。此处显示的非对应顺序的数值是在紫外线照射后24至48小时观察到的典型结果。实验后留下的标记有助于对齐补丁,在对每个区域进行分光光度测量时,该补丁将被重新放置于手臂上。
为了确定最小红斑量,需采集分光光度计读数,并计算每个区域的 ASTAR 值。最小红斑量定义为暴露时间引起 astar 值较基线水平升高超过 2.5 时的时间点。对于该受试者,最小红斑量为暴露 18 分钟。如果表格中的数据似乎顺序混乱,请重复测量读数。
注意避免分析带有皮肤瑕疵或异常色素沉着的区域。本例中,基线值或NA值为9.0,但该值应低于持续四分钟时测得的7.2。观看本视频后,您应充分了解如何开展最小红斑剂量测试。
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本文介绍了如何进行最小红斑剂量(MED)检测,以确定对个体施加时可引起红斑的最低剂量紫外线辐射。该过程包括准备光源和受试者、对受试者进行紫外线照射,以及评估皮肤颜色的变化。
最小红斑剂量(MED)检测提供了一种定量且可重复的方法,用于评估个体皮肤对紫外线(UV)辐射的敏感性,从而为光疗研究与开发中的安全有效剂量设定提供直接依据。该方法可实现受试者的精确分层,并支持从早期发现到临床前皮肤科模型的转化连续性。可靠的MED测定可减少生物学上的不确定性,并为基于UV的治疗干预措施提供可预测性的坚实基础。
MED检测位于早期发现与临床前模型开发的交汇点,为紫外线敏感性评估和剂量选择提供标准化的工作流程。