最小红斑剂量检测：一种用于测量小鼠模型中紫外线敏感性的方法

— 黑色素细胞会产生一种称为真黑素的深色色素，可吸收有害的紫外线，从而保护皮肤。为测量紫外线敏感性，首先取一只已麻醉的小鼠模型。通过去除小鼠背部的毛发以暴露表皮层，进行小鼠准备。在暴露的皮肤上贴附一块带有固定数量小孔的防紫外线胶带。除一个孔外，在其余所有小孔上固定小型可拆卸胶带，以遮蔽开口。

现在，将小鼠暴露于紫外辐射中，持续所需的时间。在暴露期间，按照预定的时间点依次打开其余孔洞。这使得相继暴露的皮肤区域接受到逐渐减少的紫外辐射剂量。这些孔洞可使紫外线局部穿透至小鼠的表皮。

暴露后，表皮细胞会释放促炎分子。这些分子向真皮层扩散，并扩张真皮血管，导致红斑或皮肤发红。随后，白细胞浸润真皮层，引起暴露区域的水肿或肿胀。

在实验终点时，停止照射并移除胶带，以观察红斑和水肿。在以下方案中，我们将通过测定最小红斑量，评估佛司可林（一种促进黑色素生成的药物）处理的人源化小鼠模型对紫外线的敏感性。

— 为了确定最小红斑量（Minimal Erythematous Dose，MED），需对每只动物施加不同剂量的紫外线照射。首先准备一块避光胶带，使用重型打孔器在胶带上打出面积为1平方厘米的圆形孔洞。在胶带每个孔洞上方，贴上一小块易于剥离的小胶片，以便在进行紫外线照射时移除。将该胶带贴于麻醉小鼠的背部表面。

如果动物的眼睛已睁开，应涂抹人工泪液，以防止因干燥和紫外线暴露造成损伤。打开由两个峰值输出为313纳米、波长范围为280至370纳米的UVB灯组成的紫外光源。在使用配备UVB传感器的紫外光度计检测输出前，先让灯稳定至恒定的紫外输出水平。

根据紫外光度计测得的紫外线透过率，计算每个目标剂量所需的紫外线照射时间。例如，您的灯管紫外线B波段（UVB）输出量为每平方厘米2.4毫瓦。因此，要给予5千焦耳每平方米的剂量，皮肤需要接受208秒的UVB辐射，计算过程如下所示。

接下来，将麻醉后的动物腹侧朝下放置，以确保紫外线照射均匀。根据所需辐射剂量，在适当时间依次移除覆盖在孔洞上的小段胶带。

例如，如果最大剂量为 40 千焦每平方米，则小鼠需在灯下照射 27 分钟 47 秒，且该剂量对应的孔洞应从开始就暴露。然而，对于 5 千焦每平方米的条件，在剩余 208 秒照射时间时应移除胶带。紫外线照射后，小心移除胶带，并将动物置于温暖安静的环境中，待其从麻醉状态恢复后再放回笼中。

最小红斑剂量（Minimal Erythematous Dose，简称 MED）是指能够引起整个暴露皮肤区域出现红斑和/或水肿等炎症反应的紫外线最低剂量。在紫外线照射后 24 至 48 小时内观察小鼠，检查照射区域是否存在明确的红斑或水肿病灶。

有时，残留的毛发茬会掩盖皮肤潜在的红斑或水肿，从而影响最小红斑量（MED）检测结果的判读。使用70%乙醇润湿皮肤可显著提高皮肤状况的可判读性。应对任何皮肤表现进行拍照记录，然后将小鼠送回动物房。