2017年6月4日
本研究描述了一种采用组分解析方法的实验方案,用于研究中国南方一群过敏性鼻炎和/或哮喘患者对禾本科花粉过敏原的致敏情况。
本实验的总体目标是研究中国南方地区人群对多种禾本科花粉过敏原组分的致敏情况。该方法有助于解答过敏领域中的关键问题,即个体如何对禾本科花粉产生致敏反应。该技术的主要优势在于使用重组或纯化的过敏原分子。
还可反映混杂性皮疹的发生情况,从而提高检测准确性。该技术的应用意义在于有助于排除过敏、鼻炎和哮喘的诊断,因为这些患者中许多人对常见的可检测过敏原呈致敏状态。
尽管该方法可为过敏性气道疾病提供研究依据,也可应用于其他类型的过敏反应,例如食物过敏。我们最初产生该方法的构想,是源于在您发现或鉴定出中国人群中的相关病例时。接下来将由我实验室的 Nili Wei 演示该实验操作流程。在从生物样本库中提取符合条件的患者血清样本后。
打开全自动免疫分析仪及其内置的信息数据管理计算机。在接通主电源后,将仪器切换至系统电源,并等待三分钟,使内置软件启动。然后,每种过敏原和/或过敏原组分检测向一个样品管中加入 140 微升血清。
并用每位患者唯一的识别编号标记每管血清。在信息数据管理界面中,打开申请单列表窗口,确认血清IgE为首选检测方法,然后将样本管装入样本架中。
并将条形码标记的质量控制管放入质量控制架中。在检测处理菜单中,根据加载列表选择并加载试剂,完成样本架和质量控制架、显色液、结合物、校准品、载体、移液枪头、终止液和洗涤液的加载。单击加载冲洗液和加载洗涤液。
当所有材料加载完毕后,选择“加载并开始”,然后点击“确定”。测量结束后,结果将显示在信息数据管理界面中。选择需要分析的数据,点击菜单中的“批准”和“另存为”,将血清IgE检测结果导出为电子表格文件。
然后将电子表格文件导入适当的统计分析软件,并使用Spearman相关系数的特定模块来分析百慕大草花粉、提摩西草花粉和葎草花粉组分之间致敏性的相关性。在本实验研究的258名呼吸道过敏患者中,22.5%对百慕大草花粉呈阳性反应,13.6%对提摩西草花粉呈阳性反应,7%对葎草花粉呈阳性反应。
有趣的是,与患有其他过敏性疾病的患者相比,过敏性鼻炎和/或哮喘患者对百慕大草的致敏率显著更高。在百慕大草IgE血清反应等级为1级的患者中,对Cyn d 1、梯牧草或葎草过敏原或交叉反应性碳水化合物表位的检测呈阳性的可能性低于30%。相比之下,百慕大草sIgE反应等级为4级的患者对这些草类组分同时呈阳性的概率则达到67%至100%。
在35名梯牧草阳性患者中,最常检测到的过敏原组分是Phl p 4,其次是Phl p 1。各有3名患者对Phl p 5、6、7、11或12中的任意一种呈阳性。血清Phl p 4特异性IgE水平与总梯牧草过敏原及交叉反应性碳水化合物表位特异性IgE水平呈强相关性。
对交叉反应性碳水化合物决定簇呈特异性IgE阳性的百慕大草过敏患者占41.4%,猫尾草致敏患者中该比例为68.6%。Spearman等级相关性分析显示,交叉反应性碳水化合物决定簇与其他交叉过敏原之间的致敏性存在显著关联。在此基础上,可采用免疫分析仪等相关方法,进一步在中心或全国范围的研究中探讨草花粉过敏致敏性的其他问题。
进行该操作时,重要的是要确保系统中已完成适当且正确的校准。这是获得准确检测结果的关键。观看本视频后,您应能够充分了解如何检测患者对禾本科花粉过敏原组分的致敏情况。
请注意,处理人血清样本可能具有极高的危险性。在进行本实验操作时,应始终采取适当的预防措施以防止病原体感染。
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本研究探讨了中国南方地区过敏性鼻炎和/或哮喘患者对禾本科花粉变应原组分的致敏情况。通过使用全自动免疫分析仪作为组分解析诊断(CRD)工具,该研究为广州大都市区禾本科花粉致敏的流行率及致敏模式提供了新的见解。研究结果强调了在传统诊断方法可能不可靠的地区,采用标准化的组分为基础的过敏诊断的重要性。
使用全自动免疫分析仪进行组分解析诊断(CRD),可精确定量过敏原特异性IgE,克服了基于粗提物的检测方法在过敏研究中的局限性。该方法提高了区分真实致敏与交叉反应的预测可靠性,有助于在转化过敏研发中进行更准确的靶点验证和风险评估。标准化的定量结果支持多中心数据的可比性,有利于以生物标志物为导向的研究在项目组合层面做出科学决策。
该CRD工作流程整合了从早期发现到转化研究的各个环节,支持过敏及免疫学研究管线中的先导物识别和生物标志物验证。