生物芯片微流控技术在血清特异性免疫球蛋白E（sIgE）过敏原检测中的应用

生物芯片微流控技术系统是一种基于微流控卡盒的检测平台，利用化学发光原理测定血清特异性IgE。与其他检测方法相比，该生物IC系统具有成本低、所需血清量少等优势，适用于血清IgE的检测。该技术的应用前景主要在于过敏性疾病（如鼻炎和哮喘）的诊断，因为许多此类患者对常见的可检测过敏原存在致敏反应。

尽管该方法可为呼吸道过敏性疾病提供研究依据，但也适用于其他情况，例如食物过敏和皮肤过敏。由于该技术更易于使用，且对操作人员的培训要求较低，因此新接触该系统的人员能够快速掌握其操作。该操作过程的清晰演示至关重要，因为其直接决定检测是否成功，并需要熟练的手动操作技能。

为了检测血清样本中针对完整过敏原的血清免疫球蛋白E抗体，随机选取三份血清量至少为900微升的样本，并从试剂盒中取出芯片并编号。然后，打开计算机和分析仪电源。在计算机上启动Lab IT程序。

如果暗场校准警告窗口弹出，请点击“确定”以运行泄漏测试，然后点击中心标志进入操作界面。检查反应温度和电荷耦合器件（CCD）温度，反应温度应在约10分钟内升至37±1°C，CCD温度应降至-15±1°C。当CCD温度降至-15±1°C后，请确认仪器内部无其他物品遗留，然后关闭门。

然后点击工具、系统测试、漏液测试。测试完成后，报告窗口将弹出。接下来，向微流控芯片上相应的试剂槽中加入 620 µL 洗涤缓冲液、120 µL 封闭缓冲液、60 µL 结合物 A 和 B、60 µL 底物 A 和 B，以及每份血清样本各 100 µL。

单击试剂盒编号后，使用条形码扫描仪扫描试剂盒的序列号，并输入样本编号。然后将试剂盒放入分析仪中，关闭门，单击分析仪并运行以开始分析。分析结束后，将结果导出至适当的统计分析软件，并从分析仪中取出试剂盒。用75%酒精轻轻擦拭分析仪内部的加热铁和电磁体，并关闭Lab IT窗口。

温度监测窗口将弹出，并在CCD升温至五摄氏度保护模式时自动关闭，此时可以安全地关闭分析仪和计算机。微流控系统具有良好的重复性，如对猫皮屑、狗皮屑和蟑螂过敏原经过九轮测试所得数据所示。如图所示，所有数据均位于两个标准差范围内，符合临床允许的最大误差范围。

根据过敏原阳性率的结果，所有吸入性过敏原的评估结果均优于食物过敏原。由于曲线下面积（AUC）值范围为0.613至0.984，且三种吸入性过敏原的曲线下面积值均大于0.950，因此可以得出结论：相对于系统一，系统二具有较高的准确性。两个系统的一致性分析显示，三种吸入性过敏原的Kappa值均高于食物过敏原的Kappa值，而食物过敏原的Kappa值通常低于0.4。

在这些散点图中，x 轴显示系统二的结果，y 轴显示系统一的结果，可以观察到两种系统对六种不同过敏原的血清免疫球蛋白 E 浓度检测结果的分布情况。在开始检测之前，务必检查反应温度和 CCD 温度，因为它们与检测的准确性相关。按照此步骤操作后，还可进行其他方法，如组分解析诊断，以回答有关过敏原交叉标准化和共致敏的进一步问题。

微流控芯片技术已成功应用于过敏诊断领域，以解决血清样本不足和医疗成本高等问题。由于操作涉及人源血清，可能存在潜在危险，因此在进行该实验操作时，必须穿戴适当的个人防护装备，并采取其他必要的安全防护措施。