小鼠不同脂肪组织库的鉴定与分离

对全身脂肪组织库进行鉴定和分离的标准化方法，对于研究不同解剖微环境中脂肪细胞特征与功能的差异至关重要。该技术的主要优势在于，它是一种可靠且准确的方法，可用于鉴定和切除常见及较少研究的啮齿类动物脂肪组织库。在鉴定和分离肩胛间棕色脂肪组织（BAT）时，使用虹膜剪在安乐死小鼠前部皮下组织底缘水平方向剪开，沿脂肪库的自然边界进行操作。

沿着组织储存区的侧缘，在其自然边界处做两个垂直切口。使用镊子小心地翻起储存区，以暴露嵌在白色脂肪组织内的蝴蝶形肩胛间棕色脂肪组织。然后仔细将棕色脂肪组织（BAT）从周围的白色脂肪组织（WAT）中分离出来。

将脂肪组织储存于适当的容器中，以备后续分析。为鉴定和分离后侧皮下白色脂肪组织，将小鼠置于仰卧位并固定其四肢。用镊子提起胸骨基部的皮肤，并做一毫米的皮肤切口。

将虹膜剪的一侧刀片插入切口，从胸骨基部开始沿中线向上至尾部基底，做一条4到5厘米长的皮肤切口。接着，在初始垂直切口的顶端，从中线向两侧各做一条1厘米长的水平切口。用镊子小心地将皮肤从腹膜腔剥离，利用腿部位置辨认位于皮肤下方的后部皮下白色脂肪组织（WAT），该脂肪组织应仍附着于皮肤上。

将伸展的皮肤固定，并从腹股沟处后肢基部腹侧完全切除三角形的腹股沟 WAT 脂肪垫。为识别和分离内脏 WAT 脂肪垫，用镊子提起胸骨基部的薄腹膜腔壁，并在提起的组织上做一毫米切口。将虹膜剪的一侧刀片插入切口，从腹膜腔顶部至直肠方向做四到五厘米的纵向向下切口。

在垂直切口的顶部和底部各做一个一厘米长的横向切口，切口方向从正中线向外侧延伸，然后用镊子剥离腹膜，暴露腹腔内容物。接着将展开的腹膜固定在解剖盘上，以采集腹膜腔内的白色脂肪组织（WAT）储存部位。为识别和分离内脏性生殖腺相关WAT，需先定位生殖腺，用镊子提起与其相连的生殖腺WAT，再使用虹膜剪小心地将WAT从生殖腺上切除。

为了切除肾周脂肪组织，首先定位肾脏，并用镊子轻轻提起肾组织。将肾脏拉向中线，以清晰区分肾周脂肪库与腹膜后脂肪库，然后切除与肾脏直接相连的白色脂肪组织（WAT）。随后，从脂肪组织中分离并移除位于肾脏上方的肾上腺。

为了识别和分离腹膜后脂肪组织，再次将肾脏提至中线位置，使用虹膜剪仔细从后腹膜壁上分离腹膜后脂肪组织。为了分离腘窝脂肪组织，将髌骨置于解剖盘上，注意使膝关节后方的腘窝朝上。使用虹膜剪从后肢基部至足部小心去除皮肤。

使用虹膜剪在腓肠肌内侧头和外侧头的下缘处进行剪切，用镊子提起肌肉以暴露三角形的腘窝脂肪组织。然后使用虹膜剪沿天然组织边界切除该脂肪组织。此处展示了小鼠皮下、棕色、内脏及腘窝脂肪组织的大体解剖位置。

通过标准的苏木精和伊红染色方案，可以评估皮下、棕色、内脏、腘窝、组成型和调控型骨髓脂肪、肌内以及髌下脂肪组织库的组织学特征。采用本方案分离的脂肪组织可用于多种实验终点，包括组织学分析、分子研究以及基因和蛋白质表达分析。对不同脂肪组织库鉴定方法的全领域标准化，无疑将有助于进一步加深我们对其分子和代谢特征的理解，以及它们在局部和系统性病理状态中的差异化作用。