2025年4月4日
本论文介绍了一种在大鼠模型中通过腹正中切口行锐性双极切除术进行5/6肾切除的标准化操作方案,旨在通过精确的方法学手段减少肾实质,从而诱导肾功能不全状态,并最大限度降低技术误差风险。
本研究特定领域的范围是为特定病症和疾病提供高度标准化和受控的动物模型。通过采用这一部分肾切除术方案,我们建立了大鼠肾功能不全的标准化模型。本方案的优势在于保留腹腔内脏器官的轴向结构。
如果所需的动物模型需要同时对其他器官进行操作,这一点尤为重要。目前最相关的实验挑战在于,通过标准化程度外科切除肾实质并不一定会导致相同程度的肾功能不全。因此,可能需要通过术后实验室检测进一步确认。
首先,将多股缝合线、硅胶血管环、钝头组织钳、精细解剖剪、镊子、止血贴片、暴露装置、加热垫和手术准备钩等器械摆放在手术台上。通过新生儿面罩向麻醉后的大鼠提供100%氧气。剃除预定手术区域的毛发,并使用无菌棉签蘸取70%乙醇和聚维酮碘溶液,以旋转方式交替擦拭,对术区进行消毒。
进行中线小切口剖腹手术时,在腹部正中做一长约三厘米的皮肤切口,随后沿腹白线切开筋膜。使用手术纱布和牵开钩充分暴露术野以显露肾脏。之后,仅使用湿润的棉签接触肾实质。
通过抓取附着在肾筋膜(Gerota's fascia)上的肾周脂肪暴露肾脏。施加张力,将筋膜局部从肾实质上抬起。用剪刀的一侧锐端切开并分离筋膜,随后沿纵向继续解剖肾筋膜(Gerota's fascia)。
接下来,使用闭合的剪刀对肾周筋膜(Gerota's fascia)进行钝性游离。逐渐在实质周围游离筋膜,并将筋膜囊向内侧折叠。用硅胶血管吊带环绕肾门,以实现更好的血管控制。
将镊子尖端插入腹膜后间隙以固定肾脏,防止肾脏在切割过程中向背侧移位。随后使用剪刀,精准地进行一次性的头侧三分之一肾实质锐性切除。通过应用止血贴片或使用钝性器械进行手动压迫,实现止血。
或者,可应用肾门YASARGIL钳以减少血流。以与肾上极结肠切除相同的方式进行肾下极三分之二的锐性肾切除。采用倾斜的分离平面,在肾门侧保留较多的肾实质,而在外侧保留较少,以避免肾门损伤并减少来自肾盂肾盏系统的尿液渗漏。
肾脏游离后,使用钝性剥离钳对肾门进行隧道式分离,并用多股缝线悬吊肾门。在靠近腹腔血管处的肾门位置打一个牢固的滑结,以阻断肾血流和输尿管。用剪刀锐性解剖肾门,摘除肾脏。
然后,控制止血并剪断结扎线的末端。使用多股缝线在腹筋膜上缝合一针角部缝线。继续用连续缝合方法缝合腹筋膜,每针穿透约两毫米组织,针距保持四毫米。
用单个缝线缝合皮肤层,每针缝入3毫米组织,每针之间间隔6毫米。残余肾实质的生理数值显示氧合水平约为60%,表明切除后组织仍具活力。灌注不良的肾组织氧合水平显著降低,为20.9%,符合无活力组织的特征。
灌注值表明残余肾脏具有生理灌注,进一步证实了组织的活性。
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本论文介绍了一种在大鼠模型中通过锐性双极切除法进行5/6肾切除术的标准化操作流程。其目的是精确诱导肾功能不全,并将技术误差降至最低。
在大鼠中建立标准化的5/6肾切除模型为慢性肾脏病提供了可靠的临床前研究模型,有助于肾脏病研究中的机制性风险评估和转化连续性。该模型通过提供可重复的生物学复杂性以及术中成像验证的机会,支持药物和生物分子研究。其精确性和可重复性对于肾脏病药物研发中的研发管线决策及跨职能研发协同至关重要。
该模型可融入从发现到临床前研究的连续过程,支持肾脏研究中的先导化合物鉴定、机制研究以及转化生物标志物的验证。