סטנדרטיזציה של שיטה שאינה קטלנית לאפיון מעמד הרבייה והתפתחות הזחל של מולים מים מתוקים (ביובלויה: Unionida)

הפרוטוקול שלנו מתקנן מתודולוגיות לדגימה של זימים של מולים מים מתוקים ואפיון השלבים השונים של פיתוח הזחלים תוך מתן מסד נתונים מקוון להגשת נתונים וחקר אלמנך Gravidity. הטכניקה אינה תלותית ואינו משפיע באופן מהותי על היכולת של מול נקבה להישאר gravid לאחר דגימת הזימים, ולכן השיטה יכולה להיות מיושמת על מינים נפוצים ומוגנים. מתודולוגיה זו יכולה להיות מיושמת על אורגניזמים המאופיינים במשפחות Bivalvia של Hyriidae, Margaritiferidae, ו Unionidae, אשר מופצים במערכות אקולוגיות מים מתוקים בכל יבשת למעט אנטארקטיקה.

חשוב לפתוח מולים בזהירות, לאסוף מידע מיקום ולוודא שהנתונים נאספים כראוי. אם הזיהוי מוטל בספק, יש לצלם ולצרף קשר עם המומחים המתאימים. התחל על ידי איסוף מולים חיים מהשדה באמצעות שיטות חזותיות מישוש.

להעריך את הכבידה הנשית על ידי בדיקה חזותית או במהלך או אחרי איסוף על ידי חטטנות בעדינות לפתוח את השסתומים רק מספיק כדי להסתכל פנימה ולראות אם הזימים מנופחים. אם משתמשים בדגימה משומרת ממוזיאון, בצעו בדיקה ויזואלית על ידי פתיחת השסתומים ובדיקת הזימים. כדי לדגום את תוכן הזימים, הכינו צינור איסוף מיקרוצנטריפוגה מפלסטיק 1.5 מיליליטר עם כמיליליטר של מים או אתנול, תלוי כמה מהר תם ההערכה.

פתור מחט סטרילית של קצה משופע של 30 מד על מזרק של 10 מיליליטר, חשוף את הכובע כדי לחשוף את המחט, ותדחוף את ידית המזרק למטה כך שהפקען יהיה בקו האפס מיליליטר. להרים את הנקבה gravid בעדינות לחטט לפתוח את שני שסתומים באמצעות קצות האגודלים. השתמש בקצה המחט כדי לחדור בעדינות צינור מים יחיד של זימ הכיס המנופח, ולאחר מכן בעדינות לגרוף את תכולת הזימים החוצה עם קצה משופע של המחט.

אחסן אותם בצינור המיקרוצנטריפוגה המוכן להערכה מאוחרת יותר. רשום מידע רלוונטי, כגון זיהוי מיני סוגים, מידע מיקום איסוף ומיקום כבידה בגיליון הנתונים ורשם מזהה ייחודי בכל כלי איסוף כדי להבטיח רשומות נתונים מדויקות במהלך ההובלה. כוון כראוי את המולים כדי לצלם את השסתום הנכון לצורך אימות זהות, הנח אותו וצלם את התמונה, ודאג לכלול את צינור הדגימה המסומנו בתמונה.

כדי להעריך את תכולת הזימים, מעבירים אותם לצלחת פטרי וממלאים את תחתית המנה במים. בעדינות מערבל את המנה כדי לאסוף את התוכן במרכז לתצוגה מרוכזת יותר של המדגם. מניחים את צלחת פטרי תחת מיקרוסקופ ניתוח כדי להעריך את המדגם, ואם אפשר, לצלם את המדגם מתחת למיקרוסקופ.

רשום את התוצאות של אילו שלבים התפתחותיים קיימים בכל מדגם גיל. אם הנקבות מהורהרות זחלים בשלבים התפתחותיים מרובים, לדווח על כל שלב התפתחותי שנצפה מדגם נתון. אם מזוהים glochidia מפותחת במלואה ואתנול לא שימש לשימור, להעריך את הכדאיות שלהם על ידי הוספת גביש של נתרן כלורי טיפה תת קבוצה של מדגם הזימים.

glochidia קיימא יגיב על ידי פתיחה וסגירה של השסתומים שלהם או פשוט לסגור אותם מעמדה פתוחה. דווח על כל גלובידיה שנבדקה במלח עם T בסוף הכינוי כאשר הנתונים נרשמים. כדי לדווח על הנתונים, גש לדף FMGA או לאפליקציה לנייד והתרשם מהתוצאות בטופס הזנת הנתונים באמצעות תפריטים נפתחים ושדות הזנת טקסט.

לקבלת ערכות נתונים גדולות קיימות, פנה לעורכים לקבלת הגיליון האלקטרוני של התבנית. הזן את הנתונים המוקלטים תחת כותרות העמודות המתאימות, תוך שמירה על כך שכל שורה בגיליון האלקטרוני מייצגת תצפיות של דגימת זימים מאדם אחד gravid, ולאחר מכן לשלוח את התוצאות והם יתווספו למסד הנתונים FMGA לאחר אימות על ידי מנהל מערכת, אשר עשוי לפנות אספן לבקש פרטים נוספים או תמונות. מסד הנתונים FMGA אוסף את כל המידע שנשלח ומאפשר למשתמש לדמיין נתוני gravidity זמניים עבור כל המינים במסד הנתונים.

מול המים המתוקים Gravidity Almanac הוא כלי מחקר שנועד לתקנן את איסוף נתוני הכבידה תוך הקלת מאמצי מחקר, שימור ושחזור עתידיים. פרוטוקול דגימת הזימים הוערך על ידי תיוג ותקציר מחדש של נקבות במרווחים חודשיים לאורך כל השנה. למרות גודל המדגם במחקר אינם שווים על פני מינים, התוצאות להדגיש את היישומים מועיל ומעשי של פרוטוקול זה.

לוח השנה הכבידתי של וילוזה לינוסה מראה נקבות gravid המהורהרות glochidia מפותחת לחלוטין נמצאו כמעט בכל חודש של השנה למעט אוגוסט, כאשר רק נקבות מהורהרות מסות ביצה נמצאו. נקבת ההומיוטה אוסטרליס נמצאה לא נלהבת ביולי, אוגוסט ודצמבר. שיעור גדול יותר של נקבות היו מהורהרים glochidia מפותחת באופן מלא בחודשים ינואר ופברואר ובאוקטובר ונובמבר.

לא נמצאו פרטים של אליפטיו פולאטה המהורהרים בגלוכידיה מפותחת במלואה, אם כי הנקבות היו מסות ביצים מהורהרות ממאי עד יוני. רק נקבה אחת של סטרופיטוס וויליאמסי נמצאה ונוספתה מחדש שלוש פעמים. נקבה זו נמצאה מהורהרת מפותחת לחלוטין glochidia בחודש מרץ, לא gravid בחודש מאי, דיווח gravid בחודש יוני, וביצים מהורהרות באוגוסט.

נקבות גרוויד של Villosa vibex המהורהרות גלוכידיה מפותחת נמצאו בין פברואר ליוני. מולים של מים מתוקים הם קבוצה מאוד מסוכן של אורגניזמים. מתודולוגיה זו חשובה משום שהיא מספקת דרך לא תלותית להעריך את מאפייני הרבייה של מינים בסכנת הכחדה.

זה קריטי להתמודד עם מולים בזהירות. ניתן למדוד בשטח תנאים סביבתיים, כגון טמפרטורת מים וזרימות נחלים כדי לקבוע אילו תנאים מעוררים השרצה ופיתוח זחלים במולים של מים מתוקים. אוסף של נתוני כבידה זמניים עבור כל המינים של מולים מים מתוקים יכול לסייע במחקרים באפידמיולוגיה, מורפולוגיה גלובידיאלית, היסטוריית חיים, פילוקנטיקה, התפשטות, טרנסלוקציה.