16 בפברואר 2024
מאמר זה מציג מדריך לדגימת שישה איברים משמעותיים ומגוונים בקסנופוס בוגר שניתן לגשת אליהם במהירות ובקלות: חדר הלב, אונת הכבד, הלבלב, גופי השומן, הכליות הזוגיות והעור.
לפני עבודה זו פיתחתי פרוטוקול לזילוח מהיר של דו-חיים. פרוטוקול זה צריך לשמש לפני הדגימה למחקר כגון פרוטאומיקה ואימונוכימיה, שבו נוכחות של כמויות מוגזמות של דם ברקמות אינה רצויה. למרות שישנם דיאגרמות ועזרים רבים אחרים זמינים, אין כיום מדריכים מקיפים כיצד לנתח רקמות מתוך קסנופוס בוגר במהירות ובאמינות.
אנו מקווים כי טכניקות דגימה סטנדרטיות יאפשרו למעבדות לשתף רקמות בקלות. זה יתרון במיוחד במצבים שבהם ייבוא וייצוא של בעלי חיים אינו אפשרי בשל חששות ביטחון ביולוגי או אילוצי משלוח.
מאמר זה מספק מדריך מקיף לדגימה מהירה ויעילה של שישה איברים שונים בקרפד Xenopus בוגר, כולל חדר הלב, נאבה של הכבד, הלבלב, גופי השומן, הכליות הזוגיות והעור. הטכניקות המתוארות נועדו להקל על מחקרים בדיסציפלינות ביולוגיות שונות על ידי מתן אפשרות לאיסוף רקמות סטנדרטי.
דגימה מהירה וסטנדרטית של איברים ב-Xenopus בוגר מאפשרת השגה שמישה של רקמות באיכות גבוהה ובצורה הניתנת לשחזור עבור פרוטאומיקה כמותית וטרנסקריפטומיקה של תא בודד. פרוטוקול זה נותן מענה לפער קריטי בזרימות העבודה של מודלים של דו-שחורים בוגרים, תומך בעקביות של נתונים בין מעבדות ומקל על שיתופי פעולה של מו"פ באתרים מרובים. הכנה אמינה של רקמות בשלב זה מהווה בסיס לביטחון ניבוי במחקרים מולקולריים ותרגומיים המשכיים.
פרוטוקול זה משתלב ברצף השלבים מהגילוי ועד לשלב הפרה-קליני על ידי אספקת דגימות סטנדרטיות של איברים ממבוגרים לצורך ניתוחים מולקולריים ותאיים.