Название сотовый Инкапсуляция воздушно-капельным путем

Меня зовут Ханг Мун. Я работаю с профессором кондомов. Мы вместе используем систему XYJ для создания 3D-структуры клетки.

Здравствуйте, я ПЭ и Линн, я работаю над проектом по печати клеток, который включает инкапсуляцию клеток, использование сред и гелей. Это электромагнитный клапан для выброса клеток и смеси клеток с альгинатом в клеточную среду. Клапан активируется двумя сигнальными линиями.

Сигнальная линия поступает сюда с платы разводки. Сигнал подается здесь. Эта линия проходит через ту линию, которая представляет собой первый генератор функций.

Сначала поток создается заданным программным способом. Таким образом, если вам потребуется изменить импульс, вы можете изменить программу в соответствующей строке переключения или управлять генератором процесса через компьютер. Клеточный клапан открывается и закрывается электрическим сигналом, при этом подача в клетку осуществляется через эту линию.

Клетки и среда или агрогель подаются через шприцы. Шприцы находятся в воде, внутри шприца создается давление воздуха. Сжатый воздух подается из резервуара, как показано здесь по линии.

Таким образом, поток воздуха проходит через воздушный фильтр. Воздушный фильтр задерживает пыль и другие виды загрязнений. Генератор давления создает сигнал, используемый для открытия или закрытия солнечного воздушного клапана; компьютер подключен через разъем P-I-B-U-S-V.

Мы можем использовать USB-порт, подключив его напрямую к нашему компьютеру или ноутбуку. Этот разъем подключен к данной стороне. После этого управление осуществляется через данный управляющий ноутбук.

Таким образом, если нам необходимо синхронизировать движение предметного столика и открытие колокола, это можно реализовать с помощью одного контроллера, подключенного к ноутбуку. Это позволяет управлять временем открытия, закрытия, начала и прекращения движения, обеспечивая полную синхронизацию перемещения и работы колокола.

Данный предметный столик является моторизованным. Он перемещается автоматически с помощью линии сигналов управления и двигателя. Точность позиционирования составляет 0.1 micrometers.

Таким образом, устройство может проводить линию длиной до 100 миллиметров. Ось струи перемещается вверх и вниз, контролируя зазор между подложкой и солнечной лентой.

Таким образом, можно контролировать высоту выброса. Этот субстрат подключен к столам XY: здесь ось X, а там — ось Y. Таким образом, он перемещается в плоскости XY.

Таким образом, демонстрируются некоторые особенности работы; основные этапы включают три оси: X, Y и Z. Ось струи или оси XY управляются этим сигналом. Линия сигнала подключена к данному контроллеру движения. Этот контроллер движения не имеет ручного переключателя, так как ручное управление им невозможно.

Управление осуществляется через ноутбук. Таким образом, ноутбук подключен. На задней панели контроллера расположены три разъема xs для печатающей ячейки XY jet.

Таким образом, создаются три различных типа сигналов независимо друг от друга. Затем контроллер движения передает данные через разъемы RF 2, 3, 2, которые напрямую подключены к USV. В свою очередь, USV подключен к ноутбуку.

Таким образом, управление осуществляется с помощью ноутбука. Мы используем программу AutoCAD, создаем траекторию движения следующим образом, и затем она преобразуется в машинный код.

Таким образом, машинный язык передается в виде простых символов и цифр. Каждая позиция соответствует осям X, Y и Z; здесь я выбираю файл, содержащий соответствующую программу, и затем открываю программу загрузки таким образом. После этого я выбираю из файлов именно этот текстовый файл.

Загрузите только текстовый файл, выберите его, и он будет автоматически передан с ноутбука на исполнительный контроллер движений Com Motion, после чего система перейдет в режим BAM, как я упоминал ранее. В этой колбе находятся клетки мышиных фибробластов NIH 3T3. Сначала я аспирирую старую среду.

Данный процесс представляет собой пассирование клеток, которые прикреплены к дну флакона. После аспирации среды я добавлю 6 мл трипсина, который является ферментом. Хорошо? После введения трипсина во флакон необходимо подождать от трех до пяти минут, чтобы клетки отделились от дна флакона.

Теперь мы готовы добавить среду и перенести клетки в центрифужную пробирку. Разведение составляет один к одному. Таким образом, я добавляю 6 мл этой среды и слегка промываю клеточный слой, чтобы убедиться, что все клетки были перенесены.

Теперь клетки готовы к центрифугированию в этой пробирке. Мы центрифугируем клетки при 1000 RPM в течение 3–5 минут. После того как клетки осядут в виде осадка, я аспирирую супернатант.

Теперь я промою клетки с помощью PBS. Это необходимо для окрашивания клеток. В качестве красителей мы используем субстраты эстеразы.

Теперь мы снова проведем центрифугирование, чтобы осадить клетки в гранулы. Затем я аспирирую PBS и ресуспендирую клетки в среде для подсчета.

Я перемешиваю клетки, чтобы при отборе пробы концентрация была равномерной по всему объему пробирки. Теперь я возьму 100 µL суспензии клеток для измерения плотности клеток. Затем я добавлю 100 µL красителя трипанового синего.

Мы подождем от трех до пяти минут, чтобы краситель проник через мембраны погибших клеток. При подсчете клеток окрашенные в синий цвет клетки не учитываются. Теперь клетки готовы к подсчету с помощью гемоцитометра; я перенесу по 50 µL клеточной смеси в каждую камеру гемоцитометра.

Теперь я накрою его покровным стеклом. У гемоцитометра две камеры. Я посчитаю клетки в первой камере, затем, после подсчета в обеих камерах, вычислю среднее значение и умножу его на два, так как мы использовали разведение один к одному с трипановым синим.

Таким образом, плотность клеток составит 135 × 10⁴ клеток на мл. Для нашего эксперимента мы будем использовать клеточный раствор с концентрацией 0,5 миллиона клеток на мл. Поскольку у нас имеется 13,5 миллиона клеток, я ресуспендирую их в 27 мл среды.

Мы используем два различных типа красителей. Это тест на жизнеспособность клеток (live/dead assay) от Molecular Probes. Наш первый краситель называется Calcium AM.

Наш второй краситель называется AUM-гомодимер. Он окрашивает погибшие клетки. Мы используем синее возбуждение для получения зелесной флуоресценции и зеленое возбуждение для получения красной флуоресценции. Для этих двух красителей при проведении визуализации наш раствор будет приготовлен в PBS.

Сначала я перенесу 5 mL PBS (фосфатно-солевого буферного раствора) в пробирку. Это физиологический раствор. Теперь я добавлю 0.5 µL кальциумерона.

Теперь я добавляю в пробирку 2,5 µL кальциума и 2 µL гомодимера на 1 мл PBS. Перед нами аппарат btex. Он обеспечивает равномерное распределение клеток и среды по всему объему.

Теперь мы загружаем 200 µL суспензии клеток в ячейку. Затем мы надеваем колпачок, обеспечивая плотную герметизацию. Таким образом, я открываю клапан, чтобы внутрь поступил сжатый воздух, после чего регулирую вентиль. Это позволяет изменить давление.

Я вношу корректировки. Давление составляет 5 PSI. Давление внутри трубки составляет 5 PSI.

Отсюда досюда соединение проходит через этот элемент внутри отверстия. Мы открываем колокол здесь, затем в камеру подается давление 5 PSI, после чего начинается открытие. Затем начинает работать электромагнитный клапан.

Затем мы подготавливаем подложку. В качестве подложки используется обычное предметное стекло. После этого мы наносим соответствующую порцию материала и закрепляем подложку с помощью малярного скотча, вот так, верно?

И я просто закрепляю его. Таким образом, мы устанавливаем всю систему: ячейку, клапан ARY и подложку; затем, когда ARY начинает перемещаться, начинается работа. Мы подготавливаем всю установку, после чего открываем клапан ARY для запуска.

Затем мы перемещаем предметный столик таким образом, верно? Затем мы создаем определенный узор на подложке, и вуаля — получается структура. Теперь я погружу эти напечатанные нами капли в раствор красителя, который мы приготовили ранее.

Теперь капли будут инкубироваться в течение 10 минут, после чего будет проведена визуализация. Сначала я настрою изображение через окуляр. Наш первый снимок — это просто изображение в светлом поле.

Я выключу свет и заменю фильтр, чтобы использовать синее возбуждение, которое обеспечит зеленую флуоресценцию. Третьим снимком будут мертвые клетки, окрашенные красителем Thm Homodimer. При использовании зеленого света мы получим красную флуоресценцию.