إنشاء اثنين من تمدد الأوعية الدموية العجزية المهضومة بالإيلاستيز مع ديناميكا الدم المختلفة في أرنب واحد

يصف بروتوكولنا تقنية قابلة للتكرار لإنشاء نموذج تمدد الأوعية الدموية للأرانب مع كل من ديناميكا الدم الجذعية والتشعب وحالة الجدار المنحلة في واحد وخلال نهج جراحي واحد مع انخفاض معدلات المراضة والوفيات وارتفاع معدلات المباح. يسمح النموذج بإجراء مقارنة مباشرة للمسار الطبيعي لتمدد الأوعية الدموية العجزي فيما يتعلق بدور ديناميكا الدم ، بالإضافة إلى اختبار الأجهزة داخل الأوعية الدموية في اثنين من تكوين تمدد الأوعية الدموية المتميز وحالة التدفق. يبقى العيب الرئيسي لهذه الطريقة هو نفسه بالنسبة لإنشاء نموذج تمدد الأوعية الدموية الكلاسيكي للتشعب والجذع ، والحاجة إلى معدات مختبرية متطورة ومهارات جراحية مجهرية محددة.

استخدم مشرطا لعمل شق متوسط في الجلد من العظم اللامي حتى 1.5 سم ذيلي إلى ستيرني المانوبريوم. تحضير الأنسجة تحت الجلد والدهنية من الشق الإنسي أثناء إجراء الإرقاء الدقيق. حرر العضلة القصية الرأسية من النسيج الضام الملتصق ، وتطبيق يدوكائين موضعيا لتجنب الرمع العضلي.

كشف الشريان السباتي الشائع الأيمن، أو CCA، عن طريق العضلة القصية الدماغية، وإبقائه مبللا بمسحات مبللة. تحضير الأجزاء الجانبية والقريبة من العضلة القصية الرأسية ، وسحبها بشكل إنسي باستخدام حلقة وعاء لفضح CCA. تحديد الوريد الوداجي الخارجي ، وحمايته بمسحة صغيرة مبللة.

تشريح النسيج الضام بعناية على طول CCA حتى تشعب الجذع العضدي للكشف عن الشريان. إذا كانت الفروع الصغيرة تخرج من الشريان ، فقم بتخثرها مع الكي. ضع مقطعين مؤقتين ، الأول في أصل CCA والثاني سنتيمترين بعيدين عنه.

ضع وسادة مطاطية تحت الوعاء ، واشطفها بهيدروكلوريد بابافيرين لتوسيع الأوعية. إزالة adventitia بعناية باستخدام مقص مجهري. قم بإجراء بضع الشرايين أسفل المشبك البعيد باستخدام قسطرة رباعية قياس 22 ، وأدخل القسطرة بشكل سببي حتى المشبك القريب.

اغسل الجزء داخل اللمعان بكلوريد الصوديوم الهيبارين حتى لا يكون هناك دم مرئي. ثم إصلاح القسطرة مع الرباط 4-0. من خلال القسطرة ، حقن 0.1 إلى 0.2 ملليلتر من elastase في قطاع الشريان ، واحتضن لمدة 20 دقيقة.

بعد 20 دقيقة من وقت الحضانة مع الإيلاستاز ، قم بمسح محلول الإيلاستاز ، وقم بتغيير المحقنة لشطف جزء الشريان حوالي 10 مرات بنسبة 0.9٪ ملحية. ضع اثنين من الأربطة ، مع الأول في خمسة ملليمترات بعيدة من المقطع القريب والثاني بالقرب فقط تحت بضع الشرايين. قطع السفينة في حوالي ثلاثة ملليمترات فوق الرباط الأول ومرة أخرى بين الرباط الثاني والمشبك البعيد.

احتفظ بهذا الطعم الذاتي في محلول هيبارين حتى يتم إنشاء تمدد الأوعية الدموية المتشعب. افتح بعناية أول مقطع قريب ، وقم بقياس تمدد الأوعية الدموية. لإنشاء تمدد الأوعية الدموية التشعب ، قم بإزالة adventitia بعناية ، وقم بعمل شق طولي يبلغ طوله حوالي مليمترين أفقيا في جذع CCA الأيمن.

ضع مقطعين مؤقتين على CCA الأيسر لتحديد المقطع الذي يبلغ حوالي سنتيمتر واحد ، وقم بإزالة adventitia بينهما. قم بإجراء بضع الشرايين باستخدام إبرة قياس 23. ثم ، اغسل الجزء بكلوريد الصوديوم الهيبارين.

قم بتكبير بضع الشرايين باستخدام المقص المجهري إلى حوالي أربعة إلى خمسة ملليمترات للسماح بخياطة CCA الأيمن وجيب تمدد الأوعية الدموية. لإجراء المفاغرة ، قم بخياطة الجدار الخلفي القريب من حادة السباتي اليمنى بخمس غرز ، بدءا من الحافة القريبة من بضع الشرايين على CCA الأيسر. بعد ذلك ، قم بخياطة الجانب الخلفي من كيس تمدد الأوعية الدموية بأربع إلى خمس غرز ، بدءا من الحافة البعيدة لاستئصال الشرايين على CCA الأيسر.

استمر في الجانب الخلفي البعيد على مستوى شق فم السمكة لخياطة الجانب الخلفي الرأسي لطعم تمدد الأوعية الدموية بثلاث غرز. خياطة الجانب الأمامي من شق فم السمك بثلاث غرز ، تبدأ لأعلى وتتحرك لأسفل. الانتهاء من خياطة الجبهة بين CCA الأيسر والجانب الأمامي من طعم تمدد الأوعية الدموية و CCA الأيمن مع حوالي ست غرز.

قبل الانتهاء من المفاغرة ، شطف الأوعية بمحلول ملحي هيبارين 0.9٪ داخل اللمعان. قم بإزالة المقطع الموجود على CCA الأيمن مع وضع بعض الضغط على المفاغرة باستخدام المسحات الدقيقة للإرقاء. ثم تابع بإزالة المقطع البعيد من CCA الأيسر.

إذا لم يكن هناك نزيف كبير ، فاستمر في إخراج المشبك القريب على CCA الأيسر للسماح بتدفق الدم. في المتابعة ، تم تأكيد تمدد الأوعية الدموية عن طريق تصوير الأوعية بالرنين المغناطيسي. يتم عرض تسلسل TOF ثلاثي الأبعاد تم الحصول عليه باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي ثلاثي التسلا الذي يركز على شرايين الرقبة.

لوحظ تمدد الأوعية الدموية الجذع على الشريان تحت الترقوة الأيمن ، ولوحظ تمدد الأوعية الدموية التشعب على التشعب الناتج عن مفاغرة CCA اليمنى على الشريان تحت الترقوة الأيسر. كما تم تأكيد تمدد الأوعية الدموية عن طريق الفحص العياني بعد استخراج الأنسجة. تشير الأخاديد الرئيسية على المقطع إلى ملليمتر واحد ، وتشير الأخاديد الصغيرة إلى 0.5 ملم.

تم إجراء تحليل مجهري لتمدد الأوعية الدموية الجذع والتشعب بعد تلطيخ العينات بالهيماتوكسيلين - الإيوسين. هناك خطوتان حاسمتان أثناء الجراحة ، الأولى ، التعرض وتشريح الشريان السباتي الأيمن حتى الجذع العضدي ، والثانية ، حماية الهياكل الحيوية مثل القصبة الهوائية والوريد الوداجي والعصب الحنجري.