C. elegans 胚裂球解剖：一种去除卵壳并解离胚胎细胞的方法

- 对于 这 解剖 使用 二 微量移液器： 一 与 一个 开启 大约 的 相同 宽度 作为 一个 卵 和 一 那 是 两次 作为 宽， 和 a 系列 的 溶液 有序的 在 孔 到 促进 快速 转移 之间 它们。

首先， 将 成年 雌雄同体 放入 卵盐 溶液 中， 该溶液 为 等渗 环境 以 防止 胚胎 发生 破裂。 将 线虫 从 中间 切断 以 释放 正在 发育的 胚胎。

然后， 识别 二细胞 阶段 胚胎 这些 细胞 是 的 卵裂球 形成 由 的 分裂 的 的 受精的 卵子 使用 的 微量移液器 与 的 较大 开启 至 转移 一个 胚胎 到 次氯酸盐 溶液， 漂白剂， 哪个 将 开始 到 中断 向下 的 保护性的 蛋壳

之后 仅 40 到 55 秒， 转移 的 胚胎 到 谢尔顿的 生长 培养基 或 SGM 洗涤 每个 胚胎 简要地 在 二 孔 的 SGM 到 移除 全部 痕迹 的 的 漂白 之前 放置 他们 在 a 第三 好。

现在， 使用 的 较小的 微量移液器 到 反复地 移液器 的 胚胎 提供 的 机械的 力 到 移除 的 蛋壳 和 暴露 的 卵裂球 轻柔地 继续 到 移液器 的 胚胎 到 分离 的 个体 卵裂球 细胞 在 的 随后 方案 我们 将 见 这 技术 在 动作。

- 持有 每个 结束 的 a 微毛细管 在 a 容量 的 10 微升 与 右侧 和 左侧 手 拉 的 微毛细管 朝向 两者 末端 到 应用 张力 和 带来 的 中心 的 的 毛细管 结束 a 燃烧器 到 制作 二 手工拉制 毛细血管

下 的 解剖 显微镜, 修剪 的 提示 的 的 手工拉制 的 毛细血管 与 镊子 制作 的 二 尖端 开启 大小 大约 二 次 和 一 次 的 短 轴 长度 的 C. elegans 胚胎 用于 的 胚胎 转移 和 蛋壳 去除， 分别。

连接 的 拉出 毛细管 进入 a 口 移液 仪器 移液器 45 微升 的 卵 盐 溶液 到……上 a 良好 的 a 多孔板 载玻片

放置 5 到 10 成年 C. elegans 到……上 的 好。 至 获得 早期 C. elegans 胚胎， 切 成虫 进入 片 由 定位 二 针 到 的 右侧 和 左侧 的 C. elegans 身体 和 滑动 的 针 过去 每个 其他。

移液器 45 微升 的 次氯酸盐 溶液 到……上 a 良好 下一步 到 的 良好 含有 卵 盐 溶液， 和 移液器 45 微升 的 谢尔顿的 生长 培养基 到……上 的 随后的 三 孔 转移 单细胞 阶段 和 早期 二细胞 阶段 胚胎 进入 的 次氯酸盐 溶液 由 的 口 移液器 与 较大 大小 开启 和 等待 用于 40 到 55 秒

洗涤 的 胚胎 由 转移 它们 进入 的 下一步 三 孔 与 谢尔顿的 生长 培养基 与 1 到 2 秒 在 每个 的 的 首先 二 孔 使用 的 手绘 毛细管 与 a 较小的 大小 开口， 仔细地 重复 移液 的 胚胎 用于 蛋壳 去除

之后 ， 持续使用 移液 操作 将 手工拉制的 毛细管 用于 分离 处于 二细胞 阶段 的 胚胎卵裂球。

- 之后 蛋壳 去除， 最小化 的 力 在 移液 胚胎 向上 和 向下 到 防止 破裂