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- 在 a 管 含有 M9 缓冲液, 收集 向上 到 150 雌雄同体 线虫 在 的 期望的 载物台 的 发育 移除 细菌 从 的 线虫 由 洗涤 与 M9 缓冲液 和 离心 的 样品
查看 的 管 在……下方 a 解剖 显微镜 当 去除 的 上清液 到 防止 损失 的 样品 转移 的 线虫 进入 a 玻璃 培养皿 与 a 最小 体积 的 M9 缓冲液 添加 左旋咪唑 到 麻醉 的 蠕虫。
定位 的 头部 的 的 蠕虫 和 的 咽 或 前肠, 哪个 包含 二 球茎状 结构 已使用 二 针 到 切 通过 的 线虫 在……后面 的 咽 确保 那 你 完整 的 解剖 快速地 到 避免 影响 的 组织
一旦 的 角质层 是 中断的, 的 二 性腺 臂 是 挤出的 或 推压 出 的 的 身体 由于 到 的 内部 压力 的 的 蠕虫
在 这 例如, 我们 将 解剖 性腺 从 成年 线虫 用于 免疫荧光 分析。
- 挑选 100 至 150 线虫 在 的 期望的 发育的 载物台 和 收集 他们 在 a 1.5毫升 微型离心机 管 含有 100 微升 的 M9 缓冲液 然后, 填充 的 微型离心机 管 与 900 更多 微升 的 M9 缓冲液 和 离心机 它 在 1,000 次 g 用于 1 分钟 在 房间 温度
在……下方 a 解剖 显微镜, 轻柔地 移除 900 微升 的 的 M9 缓冲液 然后, 重复 的 洗涤 二 更多 次 到 移除 大多数 的 的 已附上 细菌
接下来, 使用 a 200微升 微量移液器 尖端 与 a 增宽的 钻孔, 转移 的 线虫 在 100 微升 的 M9 缓冲液 到 a 扁平 底部 玻璃 观察 培养皿 然后, 添加 1 到 3 微升 的 0.1 摩尔 左旋咪唑 到 的 培养皿 和 涡旋混合 它 轻柔地。 现在, 连接 二 25-gauge 针 到 二 注射器 至 制备 一 解剖 工具 用于 每个 手
下 a 解剖 显微镜, 位置 每个 针 在……下方 和 结束 每个 蠕虫 和 制作 a 精细 切 开启 每个 蠕虫 接近 的 第二 咽部 球茎 使用 a 剪刀 像 运动 切割 全部 的 动物 在 最少 一次 全部 在……之内 五 分钟 用于 的 左旋咪唑 到 保持 有效。
- 它 是 非常 重要 那个 的 解剖 的 的 动物 在 的 培养皿 是 已完成 在 在……下方 五 分钟
- 若 未 见 有 外 翻 的 性腺, 可 跳 过 该 动 物。 正 确 外翻的性腺如图所示。