大鼠和小鼠的诊断性剖检及特定组织与样本采集

本操作的总体目标是进行基本的啮齿类动物尸检。首先记录有关动物的基本信息，以此开始操作。该操作的第二步是检查内脏器官。

第三步是采集样本，例如器官或肠系膜淋巴结。最终，可通过组织病理学或其他技术确定动物的健康状况。通常，初次进行剖检的人员会遇到困难，因为啮齿类动物的解剖结构需要在实际操作中学习掌握。

这些方法有助于回答有关研究种群中动物健康状况的关键问题。由于学习各种组织的位置以及如何区分正常与异常组织需要一定时间，因此这些技术的可视化演示至关重要。在对动物实施安乐死后，应收集其病史信息，并记录其当前特征，如身体状况、行为、性别、年龄、体重、品系等。

该记录对于在处死动物前检查组织的人员至关重要。务必使用适当的个人防护装备。准备解剖板、镊子、剪刀、容器标签、固定液、培养基和收集容器。

处死动物后，评估其身体状况，检查皮肤和被毛是否异常、有无消瘦和脱水现象。同时检查动物体表是否存在人为操作、植入物或手术瘢痕。接下来，使用解剖显微镜仔细检查所有体表开口部位。

这些部位包括耳、眼、鼻、口、肛门和外生殖器。现在将动物仰卧放置于解剖板上，用镊子提起其皮肤，使用剪刀从肛门向颏部剪开皮肤。接着将皮肤向两侧翻开，切开腹壁和肋骨 cage。

通过在肋骨笼两侧各做一道侧向切口，暴露胸腔内脏。切开膈肌，然后在胸骨顶部横向切断，移除肋骨笼。

现在检查暴露的胸腔和腹腔器官。观察是否有颜色改变、异常气味、大小差异，以及器官缺失或移位的情况。检查器官表面的质地，并注意是否存在组织肿块或充满液体的囊腔。

同时注意观察任一腔隙内是否存在液体。继续检查胃肠道，观察肠系膜是否有肿大的淋巴结或组织肿块。

描述消化道内容物，并仔细检查管壁是否增厚、有无肿块或出血。为检查肾脏内部结构，使用刀片将左肾沿纵向切开，将右肾在偏离正中线的位置进行横向切开。检查肾实质是否存在任何异常。

现在检查雄性的泌尿生殖系统。辨认精囊、睾丸、附睾以及雌性中的输精管和尿道旁腺。辨认子宫、卵巢和输尿管。

检查泌尿生殖系统是否存在阻塞、积液、出血或其他异常情况。完成上述检查后，分离并切除目标器官以进行进一步检查。通常在切除时即采集心脏、肝脏、肾脏和脾脏。

将每个器官浸入固定剂中，或按照需要使用这些组织的方案（如冷冻或免疫组织化学）进行初步操作，以获得充分的固定。通常情况下，组织应以20体积固定剂对1体积组织的比例浸入防腐剂（如10%NBF）中。在处理大鼠时，应先收集支气管吸出物，再收集鼻腔吸出物。

首先将颈部区域的皮肤连同皮下组织向远离颈部的方向翻起，从而暴露唾液腺和颈部肌肉组织。随后去除这些组织以暴露气管。在气管上做一个3毫米的切口，将装有1毫升采样液的移液管插入气管腔内，并朝向四分之一方向推进。

缓慢地将采样液经气管灌注至肺部，重复三次。然后吸出采样液，并将移液器从气管中取出。并非所有液体都会回流至移液器中。

因此，如果需要更多液体，请重复该过程。适用于小鼠检测。采集鼻腔灌洗液或支气管灌洗液样本时，使用已灭菌的剪刀进入鼻咽部ATU。

切断颞下颌关节，将下颌骨从上颌骨上分离并牵开，暴露鼻咽腔以采集鼻腔抽吸物。将装有1毫升采样液的移液管插入小鼠的鼻咽腔或大鼠的气管腔内。移液管应朝向头侧方向插入并推进。

因此，尖端接触鼻腭。到达位置后，缓慢注入采样液。当液体进入鼻腔时，会在鼻孔处形成弯月面，并可通过半透明的口腔腭部观察到。

然而，如果液体从口腔流出，请重新调整移液管的方向。完全注入后，将鼻腔内的采样液体重新吸回移液管中，然后取出移液管。首先用镊子夹住气管，并在镊子上方将其剪断。

接下来，轻轻向上牵拉气管，剪断组织连接，直至整个胸腔组织被切除。现在，将肺组织平放在工作台面上，并在气管周围 loosely 系上一段缝合线或细绳。不要扎紧结，否则将无法将针头插入气管。

现在，用固定液充满注射器，将针头插入气管开口处，同时固定气管使其紧贴针头。用镊子夹持并缓慢向肺部注入固定液，直至肺完全膨胀。固定液的用量根据动物的年龄、品系和健康状况而有所不同。

如果充气不足，组织会显得扁平；如果过度充气，充气后会有泡沫状液体从组织渗出，此时应收紧气管周围的缝合材料或细绳，以防止固定液从肺部回流。然后将充气后的肺置于固定液中。将尸体腹侧朝下放置于干净的解剖板上，使用剪刀和镊子去除覆盖在头骨上的皮肤和肌肉。

然后使用小剪刀将尸体断头。将剪刀的下刃插入枕骨大孔，通过向上的动作沿头骨中线剪开。接着，用镊子撑开头骨以暴露脑组织。

如果病理学家倾向于在颅骨内对脑组织进行切片，则应立即将暴露脑组织的颅骨放入10% NBF中。否则，用镊子或手指握住鼻部周围的头部，轻轻翻转颅骨，使重力有助于组织从颅骨中滑出。小心地将弯头镊子沿脑组织外缘滑动，从嗅球开始。

继续用镊子沿颅骨向小脑方向滑动，同时用同一把镊子轻轻夹住神经。当脑组织松脱后，将其放入固定液中。如需定位肠系膜淋巴结，应先找到肠道中形状较大的盲状盲肠。肠系膜淋巴结是位于盲肠旁肠系膜内呈黄色、卵圆形或球形的组织团块。

它们的质地通常比周围的肠系膜和脂肪略厚且更坚实。初次操作时，使用解剖显微镜有助于区分组织，但随着经验积累，此步骤将不再必要。用镊子和剪刀分离肠系膜淋巴结，然后将其转移至储存管中，用于培养、PCR 或组织病理学检查。

完成该方案后，病理学家或科研人员可获得一份关于安乐死时动物客观与主观状况的书面报告。报告包括组织在固定前的客观描述、所有主要腹腔和胸腔器官的固定组织样本、脑组织和肠系膜淋巴结，以及鼻腔和支气管吸出物样本。一旦熟练掌握，简化的剖检过程可在30分钟内完成。

在进行此操作时，重要的是要记得记录动物及其组织状况的观察结果。观看本视频后，您应能够充分掌握如何完成啮齿类动物的全面剖检，包括灌注肺组织、肠系膜淋巴结和脑组织的采集。